"H22 epithelioid cells小鼠肝癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:1952年,前蘇聯(lián)醫(yī)學(xué)科學(xué)院腫瘤研究所以C3HA小鼠誘發(fā)的H22肝癌實(shí)體瘤的瘤細(xì)胞懸液,昆明種小鼠皮下移植后,轉(zhuǎn)腹水瘤。經(jīng)檢測(cè),該瘤株在Km小鼠、615小鼠、C57BL/6小鼠、BALB/C小鼠體內(nèi)可以形成實(shí)體瘤和腹水瘤。 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 貼壁細(xì)胞消化傳代時(shí)通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細(xì)胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細(xì)胞始脫落時(shí),棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對(duì)細(xì)胞施加胰酶選擇,因?yàn)榭偸琴N壁不牢的細(xì)胞先脫落,對(duì)腫瘤細(xì)胞來(lái)說(shuō),這部分細(xì)胞有可能是惡性程度較高的細(xì)胞亞群。一種簡(jiǎn)單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細(xì)胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細(xì)胞消化單細(xì)胞。對(duì)于較難消化的細(xì)胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對(duì)細(xì)胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點(diǎn),直接加酶消化應(yīng)該不會(huì)有什么問(wèn)題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預(yù)熱)總體積1/10v。消化到有細(xì)胞脫落。不過(guò)有人說(shuō)EDTA對(duì)細(xì)胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡(jiǎn)單、省事;效果很好并且不損失細(xì)胞! 293A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WC00044細(xì)胞、A-2058細(xì)胞、4175細(xì)胞 TE 354.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NFHIOSE-80細(xì)胞、EB-1細(xì)胞、RPMI 7951細(xì)胞 TE14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H/10T1/2 clone 8細(xì)胞、OVCAR10細(xì)胞、7404細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 H22 epithelioid cells小鼠肝癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代的一般方法:開始細(xì)胞傳代前,仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細(xì)胞(單層細(xì)胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬(wàn)單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細(xì)胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細(xì)胞,挑選生長(zhǎng)狀態(tài)良好,細(xì)胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無(wú)污染、無(wú)異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細(xì)胞;先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細(xì)胞瓶?jī)?nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細(xì)胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 hTERT-HME-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-EBNA細(xì)胞、HGF-1細(xì)胞、KOPN-8細(xì)胞 Ly18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH28細(xì)胞、TC-1 [Mouse lung]細(xì)胞、P3.times.63 Ag8.653細(xì)胞 MMAc-SF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEB細(xì)胞、Kit-225-K6細(xì)胞、MB157細(xì)胞 Roswell Park Memorial Institute 7666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-Olig2細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-85-1細(xì)胞、Wistar Institute-38細(xì)胞 YT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC細(xì)胞、HCEpiC細(xì)胞、SKNMC細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 H22 epithelioid cells小鼠肝癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:懸浮 細(xì)胞形態(tài)特性:淋巴母細(xì)胞 細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請(qǐng)嚴(yán)格遵照無(wú)菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞(注意把握消化時(shí)間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細(xì)胞邊緣縮小,貼壁松動(dòng)時(shí)(不建議消化到細(xì)胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細(xì)胞層,盡量把細(xì)胞層吹落,吹散;3)取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當(dāng)?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細(xì)胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細(xì)胞密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實(shí)驗(yàn)室或者初次接觸細(xì)胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請(qǐng)?jiān)谠颗囵B(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時(shí)間最長(zhǎng)不宜超過(guò)72小時(shí));2)貼壁細(xì)胞收到當(dāng)天切忌立刻消化,請(qǐng)將細(xì)胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請(qǐng)優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進(jìn)行傳代培養(yǎng);3)如簽收時(shí)出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請(qǐng)及時(shí)做好照片記錄并聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室。 ketr 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTSMC細(xì)胞、Granta-519細(xì)胞、OVCAR 4細(xì)胞 NTERA2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-4細(xì)胞、NK-92 MI細(xì)胞、SW 1353細(xì)胞 GLC82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC 929細(xì)胞、Panc5.04細(xì)胞、TE-8細(xì)胞 RWPE1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker-256細(xì)胞、mIMCD3細(xì)胞、P3-X63-Ag8.653細(xì)胞 MV-4-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY-3細(xì)胞、SPC-A1細(xì)胞、UACC-893細(xì)胞 SKNBE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKOV-433細(xì)胞、BC3H-1細(xì)胞、JS1細(xì)胞 TN5B14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV4;11細(xì)胞、SKES-1細(xì)胞、F56 [Human neoplasm]細(xì)胞 SK-N-BE(2C)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLP8細(xì)胞、INS1E細(xì)胞、LM2-4175細(xì)胞 Oka-C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-719細(xì)胞、NCI-H322細(xì)胞、HHFK細(xì)胞 RT-BM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUC-1細(xì)胞、HCC1806細(xì)胞、GM 2132細(xì)胞 H22 epithelioid cells小鼠肝癌細(xì)胞系 NCIH1781細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jijoye細(xì)胞、NRK52E細(xì)胞、Sarcoma OSteogenic-2細(xì)胞 WM-451Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-453細(xì)胞、H-1666細(xì)胞、LN-18細(xì)胞 DF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1184細(xì)胞、UPCI:SCC090細(xì)胞、NCIH727細(xì)胞 RCSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR.8細(xì)胞、H-2073細(xì)胞、LAN-5細(xì)胞 CCFSTTG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL105細(xì)胞、HSAEC1-KT細(xì)胞、HCC2279細(xì)胞 H-1618細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PCI:SG-231細(xì)胞、JROECL 33細(xì)胞、BC-019細(xì)胞 H-1618細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PCI:SG-231細(xì)胞、JROECL 33細(xì)胞、BC-019細(xì)胞 NALM-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCCJF細(xì)胞、NIH:OVCAR3細(xì)胞、MCF.7細(xì)胞 B958細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774A.1細(xì)胞、C4-2 Bone metastatic細(xì)胞、NCI-H2195細(xì)胞 HT1080細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK-13細(xì)胞、PANC.1細(xì)胞、OS-732細(xì)胞 KYSE0030細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hOMF細(xì)胞、P31/Fujioka細(xì)胞、Human Epithelioma-2細(xì)胞 C33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:2B4細(xì)胞、B16-F10--RED細(xì)胞、MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細(xì)胞 SNU-878細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HR8348細(xì)胞、OCI-Ly 1細(xì)胞、NCI-SNU-878細(xì)胞 NPA'87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lewis-Lung細(xì)胞、HBZY1細(xì)胞、87 MG細(xì)胞 CMEC/D3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DB細(xì)胞、GM00215A細(xì)胞、FBHE細(xì)胞 8305C_1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2087細(xì)胞、P-815細(xì)胞、H345細(xì)胞 HT-1376細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUSM1細(xì)胞、NCI-H716細(xì)胞、KBM7細(xì)胞 KP-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ES-2細(xì)胞、IR983F細(xì)胞、P-19細(xì)胞 Vero E6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL-60細(xì)胞、OCIAML3細(xì)胞、HOS TE 85細(xì)胞 T/G HA VSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:10T1/2細(xì)胞、AsPC-1細(xì)胞、HARAB細(xì)胞 OK-WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BBE細(xì)胞、AML-193細(xì)胞、PLA-801C細(xì)胞 MDA-1386細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:786-0細(xì)胞、VMM-5A細(xì)胞、SK BR 03細(xì)胞 D10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDLM2細(xì)胞、ACC-2細(xì)胞、AAV293細(xì)胞 HEK-293 c18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:brain-derived Endothelial cells.3細(xì)胞、Caki2細(xì)胞、GES-1細(xì)胞 LS-1034細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2107細(xì)胞、OsACL細(xì)胞、A 549細(xì)胞 RD-ES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BSC1細(xì)胞、H-810細(xì)胞、OCI-AML-4細(xì)胞 U266 Bl細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1651細(xì)胞、TM4細(xì)胞、SU.86.86細(xì)胞 NCIH1092細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC-JF細(xì)胞、D283細(xì)胞、SK-OV-433細(xì)胞 769-P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:143B細(xì)胞、MA 104細(xì)胞、RBE細(xì)胞 RAW 264.7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2172細(xì)胞、MFM-223細(xì)胞、SK-GT-4細(xì)胞 NRK clone 49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H322T細(xì)胞、OVCA-420細(xì)胞、OE21細(xì)胞 CHP 212細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1806細(xì)胞、H-1155細(xì)胞、KMS-11細(xì)胞 Earle's L cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGECs細(xì)胞、NCI-SNU-620細(xì)胞、JHH7細(xì)胞 Panc 08.13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AZ 521細(xì)胞、HKF細(xì)胞、HSAS1細(xì)胞 TE-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE細(xì)胞、U2-OS細(xì)胞、SuDHL 1細(xì)胞 MM1.S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TKB1細(xì)胞、LM8細(xì)胞、V-79細(xì)胞 SMMC7721細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTLA4Ig-24細(xì)胞、C-6細(xì)胞、GM07404細(xì)胞 AN3-CA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA-SO-M20細(xì)胞、GM16136細(xì)胞、SNK-1細(xì)胞 AN3-CA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA-SO-M20細(xì)胞、GM16136細(xì)胞、SNK-1細(xì)胞 Gingival carcinoma Neck Metastasis細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH/3T3細(xì)胞、BV-173細(xì)胞、HEK/293細(xì)胞 IPECJ2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOC-20細(xì)胞、CAL-12T細(xì)胞、Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細(xì)胞 SK-ES1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-5細(xì)胞、PSN1細(xì)胞、PFSK1細(xì)胞 NCI.H460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:THP-1(ATCC)細(xì)胞、P3J HR-1細(xì)胞、NS-I/1細(xì)胞 RS4-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1688細(xì)胞、H-292細(xì)胞、C-643細(xì)胞 OCI-Ly 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