"DU145 epithelioid cells人前列腺癌細胞系 細胞背景資料:DU 145 是從一位有3年淋巴細胞白血病史的前列腺癌患者的腦部轉移灶中建立的。該細胞系未檢測到激素敏感性,酸性酶陽性,單個的細胞可在軟瓊脂中形成集落。對此細胞和原始腫瘤的亞顯微結構分析可見微絨毛、微絲、細胞橋粒、線粒體、發(fā)達的高爾基體和異質溶酶體。該細胞不表達前列腺抗原。 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結1:復蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y2:首先應該懷疑凍存,實際上復蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力,表現為先貼后死,原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。 OEC19細胞系相關產品:TE671細胞、PE/CA-PJ34細胞、Mia PACA 2細胞 SW948細胞系相關產品:CL1-5細胞、Ramos 2G6.4C10細胞、Hs895T細胞 Vertebral Cancer of the Prostate細胞系相關產品:CT26.WT細胞、JTC-39細胞、MMVECs細胞 細胞生長:貼壁 DU145 epithelioid cells人前列腺癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞培養(yǎng)中支原體污染的經驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結構特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學治療劑。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 MESSA-DX5細胞系相關產品:GLC-15細胞、PLA801D細胞、OCI-AML2細胞 C-127細胞系相關產品:McARH7777細胞、TOV112細胞、BPH-1細胞 TK+/- (clone 3.7.2C)細胞系相關產品:NCI-H2106細胞、130 T細胞、PLC-8024細胞 H2227細胞系相關產品:ARPE19細胞、TW01細胞、COLO 741細胞 Kit-225-K6細胞系相關產品:OVCA-420細胞、H4IIEC3細胞、ABE8.1/2細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系 DU145 epithelioid cells人前列腺癌細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣 細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結:1)一般客戶拿到細胞后,應該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當地溫度,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。 Medical University of Graz-Chordoma 1細胞系相關產品:HEH2細胞、CA46細胞、B95-8細胞 FHL124細胞系相關產品:GCT0404細胞、MADISON LUNG TA-109細胞、HeLa-229細胞 8305-C細胞系相關產品:CDC/EU.HMEC-1細胞、TGHAVSMC細胞、MCF12F細胞 PK-136細胞系相關產品:NCI-H1876細胞、NCI-H295細胞、DHL-8細胞 P3X63細胞系相關產品:GM3570細胞、L6565細胞、TE 354.T細胞 HMEC-1細胞系相關產品:LICCF細胞、5637細胞、APRE-19細胞 SACC-LM細胞系相關產品:HIEC6細胞、HCC-1187細胞、Tu-177細胞 PG-4(S+L-)細胞系相關產品:F36P細胞、NCI-H157細胞、VCaP細胞 4T1細胞系相關產品:BSC40細胞、T173細胞、SK_HEP1細胞 HP615細胞系相關產品:Panc 8.13細胞、HPASMC細胞、PIG1細胞 DU145 epithelioid cells人前列腺癌細胞系 U343MG細胞系相關產品:JM-Jurkat細胞、RPMI 1788細胞、U87-MG細胞 U343細胞系相關產品:HEK AD293細胞、FO [Mouse myeloma]細胞、SKNBE(2)細胞 TK+/- (clone 3.7.2C)細胞系相關產品:NCI-H2106細胞、130 T細胞、PLC-8024細胞 HPAF-II/CD18細胞系相關產品:MSC細胞、GM-346細胞、SUP-B15細胞 SKMEL28細胞系相關產品:Panc 05.04細胞、Pt K1細胞、PC3M-1E8細胞 SK-Mel1細胞系相關產品:PC-3M-2B4細胞、OVCAR-433細胞、Ketr3細胞 SK-Mel1細胞系相關產品:PC-3M-2B4細胞、OVCAR-433細胞、Ketr3細胞 PC2細胞系相關產品:Nb2細胞、HOP92細胞、HLEB3細胞 P 815細胞系相關產品:SPCA1細胞、SNU354細胞、EU-3細胞 A172細胞系相關產品:OCI-Ly 8細胞、SN12C-PM6細胞、RPMI-7951細胞 MT-3 [Human leukocytes]細胞系相關產品:PAMC82細胞、Hs 729T細胞、RPMI 8226/S細胞 NCI H747細胞系相關產品:NKL細胞、HeLa-S3細胞、Colon 26細胞 NTERA-2 cl.D1細胞系相關產品:GM02219細胞、HMC3細胞、B16/F1細胞 SU-DHL-6細胞系相關產品:SL-1細胞、H2227細胞、B-CPAP細胞 Wayne State University-Head and Neck 13細胞系相關產品:NU-GC-4細胞、ND7/23細胞、H1792細胞 32D clone3細胞系相關產品:A9細胞、4T1-A細胞、PANC-02-03細胞 NCI-H295R細胞系相關產品:OCI-LY-8細胞、MIA-PaCa-2細胞、NCI-H1954細胞 WM-266-mel細胞系相關產品:H2066細胞、SK-RC-39細胞、SPC-A1細胞 ARO 81-1細胞系相關產品:FHCRC-11細胞、MV-3細胞、CNE-2Z細胞 MIN-6細胞系相關產品:SCC090細胞、DCS細胞、Caov-4細胞 NIT-1細胞系相關產品:NPA 87細胞、Co-115細胞、HCC202細胞 NCI-H165細胞系相關產品:H69C細胞、MC-4細胞、HPF細胞 Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞系相關產品:H9c2 (2-1)細胞、R1800[RA]細胞、M059K細胞 Normal Rat, August 3, 1983細胞系相關產品:HL-60 clone15細胞、Rat 1細胞、HOK細胞 Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞系相關產品:GH3細胞、DrG細胞、Hs 819.T細胞 MOVAS-1細胞系相關產品:Human Liver-7702細胞、NCI-H460細胞、WM266細胞 HuT 78細胞系相關產品:LS 174T細胞、SKMEL3細胞、ST細胞 LAN-5細胞系相關產品:GA-10細胞、HCC941122細胞、HEM-L細胞 Anglne細胞系相關產品:COC1/CDDP細胞、HO-8910 PM細胞、GM03573細胞 L-5178-Y-R細胞系相關產品:WPE-int細胞、SW260細胞、OUMS23細胞 NCI-H2081細胞系相關產品:NCI-H102細胞、Mouse podocyte細胞、Evsa-T細胞 SUM52細胞系相關產品:PC-12細胞、NCIH2081細胞、NCI-H524細胞 CCD 966SK細胞系相關產品:MS 751細胞、DHL8細胞、TGBC11TKB細胞 GM637細胞系相關產品:OCI-Ly19細胞、DMS273細胞、H865細胞 OVCAR-4細胞系相關產品:WML2細胞、MBT2細胞、H-2591細胞 PBMC細胞系相關產品:kms 11細胞、LLC-MK-2細胞、526-mel細胞 Ej138細胞系相關產品:Hi5細胞、MB-49細胞、G422細胞 NCI-H2087細胞系相關產品:SW962細胞、2B4細胞、KYSE30細胞 Hs 695.T細胞系相關產品:HSC6細胞、IBRS-2細胞、CHL-11細胞 Hs 766T細胞系相關產品:HRVEC細胞、MDA MB 436細胞、WM-266-4細胞 JROECL 33細胞系相關產品:HOCF細胞、BHK細胞、C3H10T1/2CL8細胞 Human Foreskin Fibroblast細胞系相關產品:STC-1細胞、LoMeT-ccRcc細胞、H-1882細胞 HMC-1細胞系相關產品:ML-2細胞、NCI-H711細胞、H35 Reuber細胞 CaES-17細胞系相關產品:MDA453細胞、MNNGHOS細胞、H211細胞 hTERT-HME-1細胞系相關產品:293-EBNA細胞、HGF-1細胞、KOPN-8細胞 MFM223細胞系相關產品:TMD8細胞、Hepatoma 22細胞、P3J-HR-1細胞 GS-9L細胞系相關產品:BC-028細胞、Neukoplast細胞、OAW42細胞 Hs 746.T細胞系相關產品:SK_N_BE2C細胞、U87 MG細胞、Pt K2 (NBL-5)細胞 IGROV-1細胞系相關產品:G361細胞、PC-9/GR細胞、RPE-1細胞 CA-OV-3細胞系相關產品:HIT T15細胞、VK2 (E6/E7)細胞、L6565細胞 SK-MEL-3細胞系相關產品:HBZY-1細胞、GM07404D細胞、Strain L-929細胞 DU145 epithelioid cells人前列腺癌細胞系 PC10細胞系相關產品:MIMVEC細胞、BNCL2細胞、NCI-H2106細胞 SW403細胞系相關產品:V-79細胞、EC-109細胞、LS174細胞 NCIH847細胞系相關產品:SUPM2細胞、GM06141B細胞、Normal Rat Kidney細胞 8305-C細胞系相關產品:CDC/EU.HMEC-1細胞、NCIH2452細胞、HTR8svn細胞 "
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