"KYSE-30 epithelioid cells人食道癌細胞系
細胞背景資料：來源于一位６４歲，患有高分化的中段食管鱗癌的男性患者。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
KYSE0030細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hOMF細胞、P31/Fujioka細胞、Human Epithelioma-2細胞
NCIH510細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N-9細胞、HCT GEO細胞、SNU-886細胞
Hs 695T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/NS1/1-Ag4-1細胞、L-6細胞、Hos TE-85細胞
細胞生長：貼壁
KYSE-30 epithelioid cells人食道癌細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享：支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物，大小一般在０.３-０.５um之間，呈高度多形性，有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞，也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色，用姬姆薩染色很淺，革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長，營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到６３%，支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達，又不能通過可視法對其進行檢測，而且它對細胞的生長率影響較小，不易引起注意。國內(nèi)外研究表明，９５%以上是以下四種支原體：口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii)，為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群，但能夠污染細胞的支原體種類是很多的，國外調(diào)查證明，大約有二十多種支原體能污染細胞，有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個方面來預防支原體的污染：控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作；細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌；在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后，特別是重要的細胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁，一般來講，對作用于細胞壁生物合成的抗生素，如萬古霉素等完全不敏感；對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用，所以常不用來作為支原體感染的化學治療劑。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
NCI-H1975細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-174細胞、H-889細胞、Jurkat-E6細胞
H-716細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL-IU細胞、KYSE140細胞、MGH-U3細胞
C 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3-L1細胞、NT2D1細胞、Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞
K7M2-WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW.620細胞、CMT93細胞、SCL-I細胞
MC-3T3-E1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NUGC-4細胞、Mo 59J細胞、NCI-SNU-182細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
KYSE-30 epithelioid cells人食道癌細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞形態(tài)特性：上皮細胞樣
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
M210B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-20細胞、NCIH358細胞、H-920細胞
H-1836細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colo699細胞、BJ [Human fibroblast]細胞、SK-N-AS細胞
Huh 7.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MiaPaCa2細胞、Lewis Lung Cancer細胞、SUM 190細胞
ACCM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Skin 1細胞、143B細胞、SW626細胞
DSL6A/C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-4細胞、SW 900細胞、LK-2細胞
TNC-1B12B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pa18C細胞、G-402細胞、U373MG細胞
H-847細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Li-7細胞、ATDC-5細胞、CMECs細胞
BT-474細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T-47-D細胞、Ly10細胞、BC-028細胞
HEC-1-B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QBC939細胞、BrCL15細胞、KP-4細胞
MC116細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs839.T細胞、SCaBER細胞、IHHA-1細胞
KYSE-30 epithelioid cells人食道癌細胞系
AN3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kasumi 1細胞、alpha TC1 clone 6細胞、MNNG/HOS Cl #5細胞
Murine Leydig Tumor Cell line-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GH3細胞、DrG細胞、Hs 819.T細胞
MHCC-97細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-343細胞、LL2細胞、PTK-1細胞
NS1-Ag 4/1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Meat Animal Research Center-145細胞、AMO-1細胞、ESC細胞
HMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-CCRF (CAMR)細胞、624 MEL細胞、GM2132細胞
PG13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG-HOS細胞、MDST8細胞、FRTL-5細胞
IPEC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 (Jiyoye)細胞、CCRF/CEM/0細胞、SKNO1細胞
CAL 33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO1-N1細胞、HOP 92細胞、KM932細胞
GES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCET細胞、PC-14細胞、GI-1細胞
CMEC/D3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DB細胞、GM00215A細胞、FBHE細胞
GS-9L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BC-028細胞、Neukoplast細胞、OAW42細胞
NCI-HUT-292細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2291細胞、H322T細胞、SUDHL4細胞
HCC-95細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit-225細胞、HDQ-P1細胞、DMS-273細胞
P388-D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCL-I細胞、SU8686細胞、CoCL3細胞
H1437細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C918細胞、THP1細胞、HGC27細胞
Hs 819.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPVECs細胞、NU-GC-3細胞、M3 Clone M-3細胞
NB-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HREC細胞、PGLH7細胞、F98細胞
LX-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-435S細胞、OVCA433_Bast細胞、GM04678細胞
HCC-95細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Kit-225細胞、HDQ-P1細胞、DMS-273細胞
H2405細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALL-1細胞、C3H/10T1/2 CL8細胞、P3 NS1 Ag4細胞
Lewis lung carcinoma line 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA157細胞、IPEC-1細胞、SNU119細胞
NT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CATH.a細胞、CT 26細胞、3T3-L1細胞
P560細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuT-78細胞、H889細胞、OVCAR-10細胞
SK-MEL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BV173細胞、ACC-M細胞、MDA-436細胞
H-526細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMEC-1細胞、GM05384細胞、Mono-Mac-1細胞
CCRF/CEM-C7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SLMT-1細胞、COLO206細胞、SCCVII/St細胞
GM0637細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUM149細胞、TOV112D細胞、Leukemic 1210細胞
NALM 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-1386細胞、BT-549細胞、EC-109細胞
CCF-STTG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MT-2J細胞、ME 180細胞、NCI-H1184細胞
T-HEECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：QBI-HEK 293A細胞、MV4;11細胞、MDA134細胞
NCIH1395細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C2-C12細胞、MH-S細胞、BJAB-1細胞
SKNFI細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Acanthosis Nigricans 3rd attempt-CArcinoma細胞、NCI-H1155細胞、WBF344細胞
SCLC21H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCM-1A細胞、Balb/c3T3細胞、MDA-MB-231 #4175細胞
D-341 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCAR8/ADR細胞、EOC-20細胞、HuCC-T1細胞
CMT-93細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Bac1 2F5細胞、D341MD細胞、H1105細胞
NFS-60細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-600-T細胞、MeSoTheliOma-211H細胞、293 H細胞
A-172MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLEpiC細胞、SKG IIIa細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞
SKNF1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HAC-84細胞、SNU638細胞、AtT-20細胞
KYSE 70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：REC細胞、Pt-K1細胞、Kit225-K6細胞
L-cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI-SCC-090細胞、HCT 116細胞、Hopkins-92細胞
MDA361細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC0038細胞、RCC 786-O細胞、QG56細胞
HBZY-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-AML-3細胞、HSC1細胞、P-388細胞
HCC1359細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL2細胞、MC3T3-E1 Subclone 24細胞、LL/2 (LLC1)細胞
WEHI 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H292細胞、Hs27F細胞、Clone 15 HL-60細胞
AML12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MC-3T3-E1細胞、PIG3細胞、Panc-08.13細胞
PLA802細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CaES-17細胞、HS-5細胞、CCD-19Lu細胞
LICR-LON-HN6-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：751細胞、VM-CUB-1細胞、IGR.OV1細胞
SKG IIIa細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS578T細胞、NIH:OVCAR-3細胞、WEHI 3細胞
HFT-8810細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1155細胞、TJ905細胞、Capan2細胞
WM-266-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD-966SK細胞、T-HSC細胞、MCF-7/ADR-RES細胞
SACC-83細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM-TK-細胞、SGC996細胞、HCC-38細胞
KYSE-30 epithelioid cells人食道癌細胞系
NCI660細胞系相關(guān)產(chǎn)品：87 MG細胞、NCI-H23細胞、MV 4;11細胞
FOX-NY細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A-875細胞、CMECs細胞、CCRF.CEM細胞
H-1694細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEL 92.1.7細胞、HFF細胞、Murine Carcinoma-38細胞
Huh 7.5.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LM(TK-)細胞、U-343 MG細胞、SNU1細胞
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