"KYSE-450 epithelioid cells人食管癌細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細(xì)胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細(xì)胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細(xì)胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細(xì)胞濃度過低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細(xì)胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
NCI-SNU-119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NRK clone 49F細(xì)胞、MDAMB134細(xì)胞、H-2172細(xì)胞
University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fortner's melanotic melanoma #3細(xì)胞、3T3-442A細(xì)胞、HCCC9810細(xì)胞
UCH1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBZY1細(xì)胞、H-650細(xì)胞、P3J HR1-K細(xì)胞
細(xì)胞生長：貼壁
KYSE-450 epithelioid cells人食管癌細(xì)胞系
細(xì)胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
冷凍細(xì)胞解凍程序：依據(jù)細(xì)胞株數(shù)據(jù)單指定之基礎(chǔ)培養(yǎng)基種類、血清種類和其它指定之成份和比例，制備培養(yǎng)基。絕大多數(shù)之細(xì)胞均無法立即適應(yīng)不同之基礎(chǔ)培養(yǎng)基或不同之血清種類，若因?qū)嶒?yàn)需要，必須有所不同時，務(wù)必以緩慢比例漸次改變培養(yǎng)基組成，確定細(xì)胞適應(yīng)后，方進(jìn)行所需之實(shí)驗(yàn)。FBS(fetal bovine serum,胚牛血清), CS(calf serum,小牛血清)和HS(horse serum,馬血清)，對細(xì)胞而言差異極大，請務(wù)必依據(jù)細(xì)胞株資料單指定之血清種類培養(yǎng)之。將培養(yǎng)基置于３７°C水槽中回溫，回溫后噴以７０%酒精并擦拭之，移入無菌操作臺內(nèi)。取出冷凍管，立即放入３７°C水槽中快速解凍，水面高度不可接近或高過冷凍管之蓋沿，否則易發(fā)生污染。輕搖冷凍管使其在１分鐘內(nèi)全部融化后，以７０%ethanol擦拭冷凍管外部，移入無菌操作臺內(nèi)。依據(jù)細(xì)胞種類和濃度，于無菌操作臺內(nèi)?。保癿l培養(yǎng)基加至T２５或T７５flask中。取出已解凍之細(xì)胞懸浮液，緩緩加入T２５或T７５flask內(nèi)之培養(yǎng)基，混合均勻，放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。對絕大多數(shù)細(xì)胞而言，１%以下之冷凍保護(hù)劑DMSO，不會對細(xì)胞之貼附或活化有不良影響，不需立刻由解凍細(xì)胞中去除，待第二天確定細(xì)胞生長或貼附良好后再去除即可。惟對極少數(shù)因?qū)MSO敏感或會造成細(xì)胞分化之細(xì)胞，需立即去除DMSO者，則可將解凍后之細(xì)胞懸浮液放入５-１０ml培養(yǎng)基中，離心３００xg(約１０００rpm)，５分鐘，小心移去上清液，加入適量新鮮培養(yǎng)基，將細(xì)胞均勻混合后，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶中，再放入３７°C，５%CO２培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
細(xì)胞傳代方法：１：２傳代
MC57細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB19-RIKEN細(xì)胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1細(xì)胞、NPA細(xì)胞
SNU182細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266細(xì)胞、CC-LP-1細(xì)胞、hTERT-RPE1細(xì)胞
LS-123細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 739.T細(xì)胞、HEK293-F細(xì)胞、H2330細(xì)胞
SKNBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PZ-HPV-7細(xì)胞、L-132細(xì)胞、H-446細(xì)胞
ME 180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細(xì)胞、RD 2細(xì)胞、IR 983F細(xì)胞
細(xì)胞來源說明：細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
KYSE-450 epithelioid cells人食管癌細(xì)胞系
細(xì)胞生長特性：貼壁生長
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見細(xì)胞說明書
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細(xì)胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開的時候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
BEL/FU細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KOSC-2 cl3-43細(xì)胞、HBL1細(xì)胞、RT-BM細(xì)胞
NCI-H1092細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 2650細(xì)胞、COR-L105細(xì)胞、KOSC-2細(xì)胞
Ca Ski細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb 1 Lu (NBL-12)細(xì)胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-14細(xì)胞、D-407細(xì)胞
GM346細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN 229細(xì)胞、HS-766-T細(xì)胞、NCI-H2286細(xì)胞
NCIH1688細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H23細(xì)胞、AGS細(xì)胞、786-0WT細(xì)胞
Huh-7.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293-H細(xì)胞、NCI-H510細(xì)胞、MA104細(xì)胞
HCC 70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Nthy-ori 3-1細(xì)胞、SK-MEL28細(xì)胞、AC16 [Human hybrid]細(xì)胞
BT-549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H719細(xì)胞、Karpas-422細(xì)胞、Dami細(xì)胞
MSB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIPF178C細(xì)胞、HGC-27細(xì)胞、KPL1細(xì)胞
RMS1598細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1355細(xì)胞、T2細(xì)胞、Ramos 1細(xì)胞
KYSE-450 epithelioid cells人食管癌細(xì)胞系
HL-60 Clone 15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HHUA細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細(xì)胞、TE-6細(xì)胞
B/C3T3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1672細(xì)胞、HMC細(xì)胞、HNE3細(xì)胞
MDA-MB 231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT 116細(xì)胞、UM-UC-1細(xì)胞、HCC1806細(xì)胞
LA795細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Vero from pool #76細(xì)胞、HLF-a細(xì)胞、OVCAR-5細(xì)胞
293 c18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-668細(xì)胞、HPAF-I細(xì)胞、A431/P細(xì)胞
LC1sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fukuoka University-Malignant mixed Mullerian Tumor-1細(xì)胞、RPMI-8226S細(xì)胞、RenCa細(xì)胞
ACC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH226細(xì)胞、U373 MG細(xì)胞、Pt K1 (NBL-3)細(xì)胞
PLA801-95C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-HUT-292細(xì)胞、SK Mel 1細(xì)胞、H841細(xì)胞
WEHI 164細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFLS-OA細(xì)胞、H-250細(xì)胞、Neuro-2a細(xì)胞
L cell line細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：IBMF-7細(xì)胞、Hs839T細(xì)胞、SUM102PT細(xì)胞
RGC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa.S3細(xì)胞、L- cell細(xì)胞、SW839細(xì)胞
SK-MEL 28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1-Ag4細(xì)胞、OSC19細(xì)胞、IHC-ST1細(xì)胞
OVCA433_Bast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：AE 1201細(xì)胞、Bat lung細(xì)胞、T1-73細(xì)胞
HOS-143B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DSL6A/C1細(xì)胞、SK_N_FI細(xì)胞、RCCJF細(xì)胞
Hs-274-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GI-1細(xì)胞、HeLa S-3細(xì)胞、Pfeiffer細(xì)胞
H-1930細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PaCa2細(xì)胞、HS-294-T細(xì)胞、253J-BV細(xì)胞
SK-MEL-2-LUC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VE細(xì)胞、CORL105細(xì)胞、B16-F10細(xì)胞
HEP3B2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hos TE-85細(xì)胞、H647細(xì)胞、HMSC細(xì)胞
PC-3M-IE8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-231-GFP細(xì)胞、M059J細(xì)胞、CCK-81細(xì)胞
3T3-A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBE細(xì)胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細(xì)胞、SupB15WT細(xì)胞
COLO-684細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS 273細(xì)胞、NCI-SNU-668細(xì)胞、Hs852細(xì)胞
SAOS 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EO771細(xì)胞、SU.86細(xì)胞、Toledo細(xì)胞
NCIH1155細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 1034細(xì)胞、IEC18細(xì)胞、Opossum Kidney細(xì)胞
BS-C-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U87-MG細(xì)胞、RCC-4細(xì)胞、H-1693細(xì)胞
H3255細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC-4細(xì)胞、KP4細(xì)胞、KU-812F細(xì)胞
COLO-HSR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H.Ep. #2細(xì)胞、HOC1細(xì)胞、rRTEC細(xì)胞
SKMEL-31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NOMO1細(xì)胞、EST81細(xì)胞、b.End3細(xì)胞
HEB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS26細(xì)胞、H-847細(xì)胞、EB1細(xì)胞
NK 10a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1734細(xì)胞、alpha TC1.6細(xì)胞、MPP-89細(xì)胞
CEM/C1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2106細(xì)胞、DH-82細(xì)胞、NK-92.05細(xì)胞
B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMMC7721細(xì)胞、NCI-HUT-460細(xì)胞、LSC-1細(xì)胞
JROECL19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC1/Sq細(xì)胞、U118細(xì)胞、BT483細(xì)胞
NCI-H1836細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GRSL細(xì)胞、WM 266-4細(xì)胞、Jurkat 77細(xì)胞
DU145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKN細(xì)胞、Mc Coy細(xì)胞、1.1B4細(xì)胞
N2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MPP89細(xì)胞、Gejiu Lung Carcinoma-82細(xì)胞、SNU16細(xì)胞
NT2D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GAK細(xì)胞、NL20SV細(xì)胞、D10細(xì)胞
KNS-42細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P-388D1細(xì)胞、mRMEC細(xì)胞、T47-D細(xì)胞
SW-1783細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRhK4細(xì)胞、CHOK1細(xì)胞、U14細(xì)胞
SNU-16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：2E8細(xì)胞、JurkatE6-1細(xì)胞、X63-Ag8.653細(xì)胞
MGc80-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hep 3B細(xì)胞、T98-G細(xì)胞、OVCAR432細(xì)胞
OCI/AML4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE-2c細(xì)胞、MPC11細(xì)胞、OCI/AML4細(xì)胞
HEL299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKOV3細(xì)胞、SK.OV.3細(xì)胞、TGBC11T細(xì)胞
B16/F1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H345細(xì)胞、HEK293E細(xì)胞、NCIH1648細(xì)胞
BT549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC1-A細(xì)胞、U343MG細(xì)胞、DMS79細(xì)胞
Hs 934.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV4-11細(xì)胞、NCIH2030細(xì)胞、G 401細(xì)胞
Hs 742.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：High5細(xì)胞、H-1435細(xì)胞、B16 subline B78細(xì)胞
Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-PCa-2b細(xì)胞、HT-22細(xì)胞、293FT細(xì)胞
NBL-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL952細(xì)胞、H-2085細(xì)胞、WSUDLCL2細(xì)胞
LCMS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KRC-Y細(xì)胞、Tj-905細(xì)胞、CT-26細(xì)胞
16-HBEo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞、OSC-19細(xì)胞、NCIH1915細(xì)胞
C3H10T1/2CL8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNFI細(xì)胞、TE-15細(xì)胞、H-2073細(xì)胞
KYSE-450 epithelioid cells人食管癌細(xì)胞系
CCRF-CEM C7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：1301細(xì)胞、Colon 26細(xì)胞、Alexander細(xì)胞
MDA1386細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT-549細(xì)胞、H378細(xì)胞、NBL-7細(xì)胞
NR8383.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH520細(xì)胞、CAKI 2細(xì)胞、SW 954細(xì)胞
Ca Ski細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Tb 1 Lu (NBL-12)細(xì)胞、Mel-MeWo細(xì)胞、NCI-H2198細(xì)胞
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