"COLO 201 epithelioid cells人結(jié)直腸腺癌細胞系 細胞背景資料:該細胞源自一位70歲白人男性,CSAp (CSAp-)和CEA陰性。 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 UCLA-SO-M21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK92MI細胞、STO細胞、MV-3細胞 P3X63Ag8653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A704細胞、CHO cell clone K1細胞、HEC-1B細胞 CCD-1095Sk細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC 9細胞、hFOB 1.19細胞、HCO細胞 細胞生長:貼壁 COLO 201 epithelioid cells人結(jié)直腸腺癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時體積會增加約10%,必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌,不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”,常會誤認為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會使此沈淀物增多,更會誤認為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測,又沒有污染。一般而言,此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長,但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號的血清。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 NB19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IHC-ST1細胞、U-251 MG細胞、NCI-H1869細胞 NCIH28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJRH 30細胞、Tu 177細胞、3 LL細胞 HIC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hA549細胞、GP2d細胞、SF 763細胞 L-02細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H4IIE細胞、H-2330細胞、ECC 12細胞 IOSE 29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-EBNA1細胞、F442A細胞、Hx147細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 COLO 201 epithelioid cells人結(jié)直腸腺癌細胞系 細胞生長特性:懸浮+貼壁 細胞形態(tài)特性:淋巴細胞 造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢! H1666_DA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RK13細胞、NCI-SNU-387細胞、ARO細胞 HFL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLaS3細胞、hTERT RPE-1細胞、SKLU-1細胞 NCIH244細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIPF155C細胞、MF2059細胞、EJ細胞 SUIT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:rRMECs細胞、PG-4(S+L-)細胞、CHO Lec1細胞 MG63細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1271細胞、VP 229細胞、SW 13細胞 Hs 27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-13細胞、A101D細胞、HEP-3B2細胞 HCASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NR-8383細胞、J-774細胞、MA-104細胞 MCF7/WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB134VI細胞、MMAc-Serum Free細胞、C26細胞 H-345細胞系相關(guān)產(chǎn)品:V79細胞、X63.Ag8.653細胞、MDA-PCa-2b細胞 HEK/EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K 562細胞、HT3細胞、NCI-H1693細胞 COLO 201 epithelioid cells人結(jié)直腸腺癌細胞系 Hepatoma 22細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03190A細胞、NCI-H1563細胞、OCILY-19細胞 A253細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPE-hTERT細胞、ME16C細胞、LED-WiDr細胞 Suzhou Human Glioma-44細胞系相關(guān)產(chǎn)品:52PE細胞、H-157細胞、B16 melanoma F10細胞 MGC803細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780-CP細胞、SK-GT-4細胞、CEM細胞 Mhh-Call 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GP2-293細胞、RBVEC細胞、J 774A.1細胞 H2195細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-449細胞、COLO679細胞、NCI H716細胞 H2195細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-449細胞、COLO679細胞、NCI H716細胞 KYSE 140細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KU19-19細胞、SG231細胞、LC1/Sq細胞 MM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV 4;11細胞、Tregs細胞、NIH-3T3細胞 HCC-70細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss/3T3細胞、HBL100細胞、C8D1A細胞 PC.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-NM-C細胞、AZ 521細胞、SK-NM-C細胞 HCC-2279細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAEC細胞、UMRC2細胞、UO31細胞 HSAEC1-KT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-403細胞、Duke University 4475細胞、H-1623細胞 WRL68細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-283細胞、H-2107細胞、LC-2/ad細胞 MM134細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H526細胞、SKOV-433細胞、KFB細胞 MKN74細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AtT20細胞、NCI-H838細胞、VeroC1008細胞 NuTu 19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGE細胞、PT-K75細胞、HB611細胞 CEM.C1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:10RGB細胞、NCIH23細胞、MN-9D細胞 H2227細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARPE19細胞、TW01細胞、COLO 741細胞 HCC-9724細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN299細胞、L-6 myoblast細胞、697細胞 H-1975細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-28細胞、U-343-MG細胞、PT67細胞 H82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRTL-5細胞、H596細胞、OCM-1細胞 CMT-64細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GP2d細胞、tdott細胞、UMNSAH-DF1細胞 H2347細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ChaGo-K1細胞、P388細胞、Centre Antoine Lacassagne-148細胞 SCLC21H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCM-1A細胞、Balb/c3T3細胞、MDA-MB-231 #4175細胞 AML193細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH146細胞、MOLP2細胞、GM01232E細胞 OSA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHIN3細胞、SUDHL-4細胞、OCI-Ly07細胞 KNS42細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV4II細胞、HCC0095細胞、NCI-H526細胞 MDST8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2286細胞、A-704細胞、MBdSMC細胞 AM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFLS-RA細胞、GLC-15細胞、HO1N1細胞 SKOV3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA 1386細胞、3T3-L1細胞、SW-1088細胞 GM05384細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RWPE1細胞、MCF10-A細胞、SW403細胞 Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM04671細胞、RKOE6細胞、CW2細胞 LNCaP FGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H446細胞、SMC-1細胞、H1092細胞 Bx-PC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs832T細胞、HOMEC細胞、L78細胞 Lewis lung carcinoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Duck embryo細胞、293H細胞、WERI-Rb1細胞 Hs445細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC-39細胞、CAL85-1細胞、CEM-C1細胞 H2122細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR-8/SV-neo細胞、H2023細胞、RMa-bm細胞 HCC827細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 148細胞、CHO-S細胞、NTERA-2/D1細胞 GM03671細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-3A細胞、NCI-H295R細胞、E304細胞 RPMI7666細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFD-1細胞、EFM192C細胞、Panc_05_04細胞 VP303細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh-7細胞、COLO 205細胞、MOLP-8細胞 U-87MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D341Med細胞、B16/BL6細胞、TT細胞 U373-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Melanoma Cell Bowes細胞、HCC1954細胞、Me-Wo細胞 RMS 1598細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC 61.5.3細胞、JJN-3細胞、NCIH1693細胞 NCI-SNU-407細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAMA1細胞、UC-3細胞、H-2009細胞 HCC1937細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JROECL 21細胞、SHSY-5Y細胞、DMS53細胞 A7r5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKCol1細胞、HuH6細胞、NCI-H64細胞 MADB 106細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT FET細胞、KMS18細胞、KMS18細胞 NCI-SNU-761細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293細胞、KM12細胞、SNU-182細胞 HME1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC 116細胞、LNCaP clone FGC細胞、NCIH1666細胞 COLO 201 epithelioid cells人結(jié)直腸腺癌細胞系 HEK293-EBNA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 2.03細胞、Hs746T細胞、U-937細胞 LC1-Sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCI1細胞、Hs-940細胞、Hep 3B2_1-7細胞 MFE-280細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSAS3細胞、Calu 6細胞、Panc08.13細胞 NCIH244細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIPF155C細胞、WM35細胞、UMRC-2細胞 "
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