"COLO 320 epithelioid cells人結(jié)腸癌細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 293-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI/ADRRES細胞、SKNAS細胞、Vero E-6細胞 R1800[RA]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM-192A細胞、NCI H716細胞、NCI-SNU-398細胞 HO-8910PM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T6細胞、TYKnu細胞、T98G細胞 細胞生長:貼壁 COLO 320 epithelioid cells人結(jié)腸癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 最近在培養(yǎng)細胞時,發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來,很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細胞和你一樣,消化下來也是一團的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕,避免晃動。細胞生長挺快,那么細胞的增殖能力應(yīng)該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能:一、細胞消化后吹打不均勻,造成細胞成團生長:二、細胞細化太過,細胞成片脫落,吹打時沒有受力點,細胞聚團生長。解決辦法:根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化,將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間,若胰酶處理太久,容易造成細胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強,嚴(yán)重的時候甚至?xí)斐杉毎劳?。我談?wù)剛€人經(jīng)驗:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細胞處理時間可適當(dāng)放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HemECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Beta-TC-6細胞、H-1184細胞、COS-7細胞 B5537SKIN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLTC-1細胞、HT 29細胞、OVCAR-3細胞 COLO320/DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pro-Lec1.3C細胞、Jurkat-FHCRC細胞、GOTO細胞 MEF (CF-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPDE6c7細胞、RMG-I細胞、1301細胞 Panc 03.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Scott細胞、PANC-04-03細胞、MAVER1細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 COLO 320 epithelioid cells人結(jié)腸癌細胞系 細胞生長特性:貼壁 細胞形態(tài)特性:淋巴母細胞 造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當(dāng)風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢! SU-DHL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs695細胞、HEC1B細胞、Mono-Mac-6細胞 COR-L 105細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP212細胞、MDCKII細胞、HCCLM3細胞 MS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1522細胞、MS-751細胞、YES-2細胞 NCIH1838細胞系相關(guān)產(chǎn)品:High Five細胞、A-20細胞、RMS 1598細胞 SW 1271細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774 A1細胞、T-T細胞、COLO-699細胞 NIH/3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAPC2B細胞、MDA-MB 468細胞、MX-1細胞 HEK293-EBNA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:16HBE細胞、M21細胞、IPECJ2細胞 MDA MB 453細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-G63細胞、T47D:A細胞、C32-mel細胞 RCC10 RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1187細胞、HEC-1B細胞、Rat Skin 1細胞 NB-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LYR細胞、HEM細胞、HEK-AD 293細胞 COLO 320 epithelioid cells人結(jié)腸癌細胞系 H1836細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1581細胞、MUGCHOR1細胞、GM00215A細胞 GA-10 clone 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P388.D1細胞、Hs 636 T細胞、SNU-869細胞 HEC-1-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSU-DLCL2細胞、U-87 MG細胞、Ramos.2G6.4C10細胞 PanC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TB1 Lu細胞、OLN-93細胞、M-20細胞 AR41P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW527細胞、P3/X63/Ag8.653細胞、EC-GI-10細胞 Daudi細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 837細胞、SK-Mel 1細胞、NKM1細胞 Daudi細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 837細胞、SK-Mel 1細胞、NKM1細胞 H1522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss 3T3細胞、AML193細胞、CTLA4Ig-24細胞 MN-9D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mono Mac6細胞、BT549細胞、H-2405細胞 UWB1-289細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780/CP細胞、HHFK細胞、DBTRG-05MG細胞 WM2664細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-172 MG細胞、P3J HR1-K細胞、KYSE 50細胞 SKNDZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:751-NA-15細胞、HCC366細胞、PFSK-1細胞 B-cell with DC Morphology細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL2細胞、Caco-2/ATCC細胞、CA46細胞 HCC-15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRMT-1細胞、Swiss 3T3細胞、OCI-Ly1細胞 DHL-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTHY-ORI3.1細胞、Panc-813細胞、H2110細胞 FL83B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H847細胞、SW 837細胞、WM266-4細胞 HKF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-157細胞、OV1063細胞、NCIH520細胞 HEL-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 737.T細胞、NCIH1184細胞、PT-K75細胞 Epithelioma Papulosum Cyprini細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOMA細胞、McCoy B細胞、MES-SA Dx5細胞 COLO678細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30 OHK細胞、PANC403細胞、H9細胞 CV 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hADSCs細胞、BALL-1細胞、Z310細胞 G402細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLP2細胞、TE353.SK細胞、PANC403細胞 KMS26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kuramochi細胞、NCI-441細胞、3T3 Swiss Albino細胞 MDAMB175細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FCCH1018細胞、Reuber H-35細胞、H292細胞 CNE2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI 3細胞、HuPT3細胞、ECV細胞 MV-522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 102細胞、451-LU細胞、Caki2細胞 NCIH1648細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK-49F細胞、Hs343T細胞、NS-1細胞 RBL.2H3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT20細胞、HCC 70細胞、GM346細胞 MDA-MB361細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS-53細胞、LA4細胞、Mouse Podocyte Clone-5細胞 TF1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB1-RGB細胞、SHEP1細胞、BetaTC6細胞 SUD4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HNTEC細胞、T HEECs細胞、Hs688(A)T細胞 mRMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375mel細胞、SCL-II細胞、SK-GT-2細胞 NUGC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCEpiC細胞、IGROV-1細胞、TGW-nu-1細胞 SNU-119細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL7702細胞、IBRS2細胞、PaCa2細胞 KMS-18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MALME.3M細胞、TCam 2細胞、HH [Human lymphoma]細胞 DI TNC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MXI細胞、KP-4細胞、SW948細胞 SKM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGMC細胞、GM00637H細胞、L cells細胞 Human Microglia Clone 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2108細胞、SCL2細胞、32Dcl3細胞 HASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS TE 85細胞、LIPF178C細胞、OCI Ly1細胞 IEC18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB231細胞、SU-DHL1細胞、QBC-939細胞 GT39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI.H460細胞、RPMI8226細胞、HCC1588細胞 H498細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-23.5細胞、NCI-H676細胞、Mel-MeWo細胞 HMy2.CIR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63 Ag8.653細胞、OCI/AML3細胞、MC-38細胞 DK-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-12T細胞、NRCC細胞、OCI-LY-18細胞 Reuber H-35細胞系相關(guān)產(chǎn)品:STO細胞、Hs940-T細胞、PL 5細胞 SBC5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-C2A細胞、KLE細胞、RD細胞 TE6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEF細胞、Hs 274.T細胞、DLM8細胞 Anip-973細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D 407細胞、HR-8348細胞、RKOE6細胞 AML12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-3T3-E1細胞、PIG3細胞、Panc-08.13細胞 H-2126細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A253細胞、VCaP細胞、Be Wo細胞 Chang Cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Z138細胞、G-361細胞、KYSE450細胞 COLO 320 epithelioid cells人結(jié)腸癌細胞系 NTHY-ORI3.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:hEEC細胞、Mv1Lu細胞、HMy2.CIR細胞 Vero-E6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-513細胞、NFHIOSE-29細胞、OCI Ly3細胞 Panc_05_04細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JIMT1細胞、MOLT16細胞、HBdSMC細胞 MS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1522細胞、GM05372E細胞、PTK 2細胞 "
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