"IA-LM epithelioid cells人大細胞癌細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 正確的細胞復(fù)蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。 NCI-H2405細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-134VI細胞、OV3121細胞、MHHCALL2細胞 Human Microglia Clone 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2108細胞、SCL2細胞、32Dcl3細胞 HCe-8693細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLM-16細胞、UACC893細胞、OCIAML5細胞 細胞生長:貼壁 IA-LM epithelioid cells人大細胞癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞的衰老:體外細胞培養(yǎng)實驗證明:成纖維細胞:來自胎兒傳代50次后衰老死亡,來自成人傳代20次后衰老死亡(與具體年齡有關(guān);來自小鼠傳代14--28次后衰老死亡,來自烏龜傳代90--125次后衰老死亡。細胞衰老過程中會發(fā)生一系列的變化,包括:蛋白質(zhì)合成速度降低,已有蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)變化,特異蛋白質(zhì)成份出現(xiàn);同時,細胞核,線粒體,膜系統(tǒng)、骨架系統(tǒng)等都有結(jié)構(gòu)、功能的改變。細胞衰老原因,尚無定論,出現(xiàn)過好幾種理論與假說,其中得到較廣泛認可的是“自由基損傷假說”。細胞凋亡:細胞的死亡是個體存活的正常現(xiàn)象,常見的細胞死亡形式有3種:壞死、凋亡和細胞毒性。多細胞生物的生命活動中,因為環(huán)境因素的突然變化或病原物的入侵,導(dǎo)致一部分細胞死去,稱為細胞的病理死亡,或細胞壞死。壞死是細胞暴露于嚴重的物理或化學(xué)刺激時導(dǎo)致的細胞死亡;細胞毒性是由細胞或者化學(xué)物質(zhì)引起的單純的細胞殺傷事件,不依賴于其它兩種細胞死亡機理,如殺傷T細胞的細胞毒性作用。還有一種情況,一部分細胞的死亡是生物個體正常生命活動(代謝、生長、發(fā)育、分化)的一個必要部分;似乎帶有“犧牲局部,保全整體”的意味。這種情況下的細胞死亡,明顯地受遺傳控制,稱為細胞凋亡。凋亡(Apoptosis)則是程序性的、正常的細胞死亡,是機體清除無用的或者不想要的細胞的手段。它與細胞壞死是兩個截然不同的過程,無論從形態(tài)學(xué)、生物學(xué)還是生化的特征來說,都有明顯的區(qū)別。細胞凋亡現(xiàn)象普遍存在于生物界。細胞凋亡與細胞增殖、分化和衰老起著互補與平衡的作用,在多細胞動物的發(fā)育、形態(tài)建成與維持中扮演至關(guān)重要的角色。作為細胞的一種基本生命現(xiàn)象,凋亡失控的結(jié)果將是可怕的:凋亡不足時,易發(fā)生癌變、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡過量則可能產(chǎn)生獲得性免疫缺陷綜合征(HIV)、重癥肝炎與退行性神經(jīng)疾病,如老年性癡呆癥(Alzheimer""s disease)、帕金森氏癥(Parkinson""s disease)。因此研究細胞凋亡及其機理具有重要的理論和實踐意義。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 HR1K細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB6 Cl 30-7b細胞、TM-4細胞、IB-RS2細胞 Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:451Lu細胞、BNL CL.2細胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞 NB1RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-2-LUC細胞、H-1819細胞、SHIN-3細胞 Hs.27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-526細胞、Hs 578Bst細胞、Nb 2細胞 X63-Ag 8.6.5.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MX1細胞、FRH-0201細胞、H-1581細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 IA-LM epithelioid cells人大細胞癌細胞系 細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導(dǎo)致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復(fù)蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。 VMRC-RCZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-839細胞、H-358細胞、Panc02.03細胞 MLA144細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCA7細胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞、Scott and White No. 13細胞 MES 23.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C2A細胞、Mono Mac6細胞、P3/ag細胞 GM00637F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TMD-8細胞、H766T細胞、X63-Ag8細胞 SKN-AS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1238細胞、Glioma-261細胞、Earle's L cells細胞 C1498細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB-3細胞、BJA-B1細胞、Mono Mac 1細胞 OCIAML5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Leukemia 1210細胞、HS-294細胞、HEL-92-1-7細胞 H-1404細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI.8226細胞、CCC-HSF-1細胞、HTR-8細胞 SW962細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375.S2細胞、HTR-8/SVneo細胞、3T6-Swiss albino細胞 PaTu 8988 S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 02細胞、PLC細胞、NCTC clone 929細胞 IA-LM epithelioid cells人大細胞癌細胞系 RPTEC/TERT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK-2細胞、H1819細胞、NT2細胞 PC-3/M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:184A1細胞、NCM356細胞、H1155細胞 BE(2)-M17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-774細胞、A2780細胞、beta-TC6細胞 A9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1688細胞、H-1573細胞、A-10細胞 Hep-3B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs445細胞、T24細胞、HOS/MNNG細胞 NCIH2030細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DoHH-2細胞、RH-30細胞、GP2-293細胞 WEHI 231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tn 5B1-4細胞、H1793細胞、H647細胞 OUMS-23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:210RCY3-Ag1.2.3細胞、SF 763細胞、COLO206F細胞 HBE 135-E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SaOS細胞、HPAEpiC細胞、Clone 929細胞 MNNG/HOS Cl #5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Chinese Hamster Lung細胞、CHP-212細胞、Hs 895 T細胞 H1792細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IM9細胞、Caco-2BBe細胞、MRC-V細胞 PANC0403細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-540細胞、RGE細胞、A704細胞 RBL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBVEC細胞、Hs 604.T細胞、GM00215細胞 BEL7405細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GDM1細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞、CAL33細胞 Malme3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1993細胞、MDCK2細胞、HEP3B2細胞 Colo320細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC/PRF/5細胞、RBL-I細胞、TERT-RPE1細胞 SKLMS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCLC-21H細胞、PLA 802細胞、L5178Y TK+/-3.7.2c細胞 Human Pancreatic Duct Epithelial細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293H細胞、MDA415細胞、HPAC細胞 GM04680細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL11細胞、KYSE270細胞、WSU-HN13細胞 MDA-MB-468-RED細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM346細胞、Medical Research Council cell strain-5細胞、Me Wo細胞 HeLa.S3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ND7/23細胞、Ocular Choroidal Melanoma-1細胞、BT474細胞 293-GP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHG 44細胞、SKES1細胞、Panc2.03細胞 WM 266-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT 167細胞、SNU484細胞、CTLL-2細胞 LTEP-s細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IEC6細胞、CCRF-CEM/S細胞、TR 146細胞 PK(15)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW403細胞、T/G HA-VSMC細胞、BGC823細胞 LNCaP.FGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB-19細胞、B10BR細胞、SW-1417細胞 293 Ad5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MO59J細胞、639V細胞、NCIADR.RES細胞 NCTC 1469細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WiDrTC細胞、Rat Glomerular Endothelial細胞、HCC-1171細胞 CA922細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT4細胞、Mv.1.Lu細胞、SK-N-SH細胞 UACC-812細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT144-mel細胞、CL 1-5細胞、H69C細胞 HCC-38細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLM1細胞、KE39細胞、SW-756細胞 H-3255細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1080細胞、RL95細胞、B16-F10--RED細胞 HT-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE353.SK細胞、SK-N-BE2細胞、WM-239細胞 NUGC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP C4-2細胞、HBE 135-E6/E7細胞、H1703細胞 Lewis Lung Cancer細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Embryonic Bovine Tracheal cells細胞、HEL-1細胞、Caki-1細胞 H-889細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1930細胞、NS-I/1細胞、SCL-1細胞 Hs819.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKO-007細胞、H-524細胞、NCIH2073細胞 H-23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 363細胞、SK-N-BE(2C)細胞、NCI-H187細胞 G 292 Clone A 141B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-HEECs細胞、COV504細胞、X63-AG 8.653細胞 MSTO-211細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC2細胞、TFK1細胞、SK.MEL.2細胞 SKLMS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA2D1細胞、ASPC1細胞、16-HBE14o細胞 U031細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL299細胞、NCIH1385細胞、CCF-STTG1細胞 F442-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT-16細胞、DH 82細胞、UCLA-SO-M14細胞 Y3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCCLM3細胞、DiFi細胞、DHL8細胞 A9(Hamprecht)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-15細胞、HCC-1359細胞、PC-14細胞 MLE-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA361細胞、Sp 2817細胞、TMK1細胞 Pt K1 (NBL-3)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat 77細胞、Hs-281-T細胞、Huh-7.5.1細胞 GM07404細胞系相關(guān)產(chǎn)品:639-V細胞、Pa017C細胞、OCI/AML-5細胞 H-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2126細胞、NCI-H2228細胞、UACC-812細胞 TT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IEC 6細胞、no.11細胞、GM04154B細胞 GC-1spg細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK.MEL.2細胞、NCI-H1299細胞、YES 2細胞 IA-LM epithelioid cells人大細胞癌細胞系 HMEC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-sm 1細胞、PCI-4B細胞、MDA-MB-134 VI細胞 PFSK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DC 2.4細胞、AAV-293細胞、OCIAML2細胞 HCV29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GS9L細胞、Huh7.5.1細胞、HEK 293-H細胞 MES 23.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C2A細胞、H-1882細胞、HTSMC細胞 "
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