"COR-L105 epithelioid cells人原發(fā)性非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞傳代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn):體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞,并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細(xì)胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中,細(xì)胞培增3~6次。細(xì)胞傳代后,一般經(jīng)過三個(gè)階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度,即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/100個(gè)細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細(xì)胞可達(dá)3~5%;細(xì)胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時(shí)期,稱指數(shù)增生期(對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期),適宜進(jìn)行各種試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)步驟:1.將長(zhǎng)成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺(tái)中倒掉瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞,如果細(xì)胞變圓,相互之間不再連接成片,這時(shí)應(yīng)立即在超凈臺(tái)中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細(xì)胞懸液。3.將細(xì)胞懸液吸出2ml左右,加到另一個(gè)培養(yǎng)瓶中并向每個(gè)瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細(xì)胞在2小時(shí)左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶?jī)?nèi)形成單層,需要再次進(jìn)行傳代。 LS180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW982細(xì)胞、MDA-MB453細(xì)胞、Hs 294T細(xì)胞 mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC/CAR細(xì)胞、HEM-L細(xì)胞、HuH6細(xì)胞 FHL 124細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:38C13細(xì)胞、L-M[TK-]細(xì)胞、FRO 81-2細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 COR-L105 epithelioid cells人原發(fā)性非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 最近在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長(zhǎng),用胰酶消化的時(shí)候也是一團(tuán)一團(tuán)地被消化下來,很難把它們吹散成一個(gè)一個(gè)細(xì)胞。而且長(zhǎng)得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長(zhǎng)得滿滿的了。想請(qǐng)教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細(xì)胞和你一樣,消化下來也是一團(tuán)的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動(dòng)培養(yǎng)皿的時(shí)候盡量動(dòng)作輕,避免晃動(dòng)。細(xì)胞生長(zhǎng)挺快,那么細(xì)胞的增殖能力應(yīng)該較強(qiáng)。胰酶消化成團(tuán)的問題我覺得有以下幾種可能:一、細(xì)胞消化后吹打不均勻,造成細(xì)胞成團(tuán)生長(zhǎng):二、細(xì)胞細(xì)化太過,細(xì)胞成片脫落,吹打時(shí)沒有受力點(diǎn),細(xì)胞聚團(tuán)生長(zhǎng)。解決辦法:根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的情況進(jìn)行多次消化,將同次消化下來的細(xì)胞放在一個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細(xì)胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細(xì)胞團(tuán)塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細(xì)胞的傳代最重要的是胰酶處理時(shí)間,若胰酶處理太久,容易造成細(xì)胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強(qiáng),嚴(yán)重的時(shí)候甚至?xí)斐杉?xì)胞死亡。我談?wù)剛€(gè)人經(jīng)驗(yàn):HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細(xì)胞處理時(shí)間可適當(dāng)放長(zhǎng),一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細(xì)胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 Soleus clone 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Glomerular Endothelial細(xì)胞、HT 1080細(xì)胞、OCI-LY-10細(xì)胞 TCC-SUP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2/D1細(xì)胞、COLO824細(xì)胞、SK-RC-20細(xì)胞 DMS 273細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AN-3細(xì)胞、OCI-Ly7細(xì)胞、Hs940-T細(xì)胞 Wien 133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1404細(xì)胞、KLM-1細(xì)胞、MNNG細(xì)胞 Experimental Mammary Tumour-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE 354.T細(xì)胞、bEND.3細(xì)胞、QGY7703細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 COR-L105 epithelioid cells人原發(fā)性非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書 細(xì)胞凍存的步驟:1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來選擇;3)將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。 B-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-738細(xì)胞、Hs578Bst細(xì)胞、H-2452細(xì)胞 HFT 8810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-85-1細(xì)胞、MPC 11細(xì)胞、HEC-151細(xì)胞 AKR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA-TU S細(xì)胞、RS 4;11細(xì)胞、184A1細(xì)胞 KM12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Farage Original Line細(xì)胞、NCI-H165細(xì)胞、SW-839細(xì)胞 PC-14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 982細(xì)胞、DV90細(xì)胞、C33A細(xì)胞 NIH:OVCAR-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPTEC TERT1細(xì)胞、HONE-1細(xì)胞、MDA MB 175 VII細(xì)胞 CFPAC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TMK1細(xì)胞、ACT-1細(xì)胞、JeKo-1細(xì)胞 OAC-P4C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hut292細(xì)胞、Karpas 422細(xì)胞、AG06814-M細(xì)胞 A3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-763細(xì)胞、X63-Ag8-653細(xì)胞、NPA87細(xì)胞 TF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Chang liver細(xì)胞、Alexander cells細(xì)胞、hTERT RPE1細(xì)胞 COR-L105 epithelioid cells人原發(fā)性非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系 CAOV4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-292, clone A141B1細(xì)胞、Hs 766細(xì)胞、Panc08.13細(xì)胞 MGc80-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep 3B細(xì)胞、T98-G細(xì)胞、OVCAR432細(xì)胞 J-111細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero 76 clone E6細(xì)胞、LAD2細(xì)胞、HT-22細(xì)胞 LNCaP-FGC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL26細(xì)胞、NCI-H250細(xì)胞、RA 1細(xì)胞 HANK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCA-38細(xì)胞、H-1781細(xì)胞、NCI-H322細(xì)胞 CAKI1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anip 973細(xì)胞、159 PT細(xì)胞、HTR8svn細(xì)胞 CAKI1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anip 973細(xì)胞、159 PT細(xì)胞、HTR8svn細(xì)胞 LLC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JHH-7細(xì)胞、MDA-MB435細(xì)胞、JROECL33細(xì)胞 PC14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LMTK-細(xì)胞、Sup T-1細(xì)胞、HOPC細(xì)胞 H125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLM16細(xì)胞、LLC-WRC 256細(xì)胞、RPPVEC細(xì)胞 IHHA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G402細(xì)胞、BEL 7405細(xì)胞、TE-32細(xì)胞 ARIP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR4-2J細(xì)胞、H1666細(xì)胞、CFSC-2G細(xì)胞 NPC-039細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF 7B細(xì)胞、PE/CA-PJ-34細(xì)胞、Sp2/O-Ag14細(xì)胞 AG 9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos-RA1細(xì)胞、IAR20細(xì)胞、NCIH345細(xì)胞 AU565細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BV2細(xì)胞、COLO-741細(xì)胞、RL-952細(xì)胞 F-81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIC細(xì)胞、WM266細(xì)胞、X63細(xì)胞 SACCLM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293細(xì)胞、HCT/Taxo1細(xì)胞、Det. 562細(xì)胞 SK-NMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss 3T6細(xì)胞、PAI細(xì)胞、MAEC細(xì)胞 LIXC-002細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B4G12細(xì)胞、MRC9細(xì)胞、M059J細(xì)胞 Hs 895.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 79細(xì)胞、SRA01/04細(xì)胞、HOP 92細(xì)胞 Mel-MeWo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UK Pan-1細(xì)胞、K562細(xì)胞、P3HR1-BL細(xì)胞 BJAB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320 DM細(xì)胞、SK-N-BE(2)-M17細(xì)胞、tdott細(xì)胞 PANC-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHAGOK1細(xì)胞、NCI-H510A細(xì)胞、H-EMC-SS細(xì)胞 SKG-IIIa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE80細(xì)胞、BC-019細(xì)胞、H-2196細(xì)胞 MOLT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H660細(xì)胞、P3 (Jiyoye)細(xì)胞、293 c18細(xì)胞 GM07404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:639-V細(xì)胞、Pa017C細(xì)胞、OCI/AML-5細(xì)胞 MDA-MB-157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A 172細(xì)胞、KGN細(xì)胞、LOUNH91細(xì)胞 SK-ChA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sc-1細(xì)胞、BetaTC6細(xì)胞、SCaBER細(xì)胞 Hs294細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT細(xì)胞、COLO 201細(xì)胞、MDA-MB435細(xì)胞 TSUpr1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU761細(xì)胞、UCLA NPA871細(xì)胞、KG1細(xì)胞 Baby Hamster Kidney 21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2087細(xì)胞、DHBE細(xì)胞、H520細(xì)胞 MTEC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1833細(xì)胞、Vero 76 clone E6細(xì)胞、HS-294細(xì)胞 GM2219C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AK細(xì)胞、HEK 293-EBNA細(xì)胞、Loucy細(xì)胞 H-1954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV 1063細(xì)胞、ZR75_1細(xì)胞、C-Lu65細(xì)胞 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