"COR-L105 epithelioid cells人原發(fā)性非小細胞肺癌細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進行傳代。 LS180細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW982細胞、MDA-MB453細胞、Hs 294T細胞 mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC/CAR細胞、HEM-L細胞、HuH6細胞 FHL 124細胞系相關(guān)產(chǎn)品:38C13細胞、L-M[TK-]細胞、FRO 81-2細胞 細胞生長:貼壁 COR-L105 epithelioid cells人原發(fā)性非小細胞肺癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 最近在培養(yǎng)細胞時,發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來,很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細胞和你一樣,消化下來也是一團的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕,避免晃動。細胞生長挺快,那么細胞的增殖能力應該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能:一、細胞消化后吹打不均勻,造成細胞成團生長:二、細胞細化太過,細胞成片脫落,吹打時沒有受力點,細胞聚團生長。解決辦法:根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化,將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間,若胰酶處理太久,容易造成細胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強,嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談談個人經(jīng)驗:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細胞處理時間可適當放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 Soleus clone 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Glomerular Endothelial細胞、HT 1080細胞、OCI-LY-10細胞 TCC-SUP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2/D1細胞、COLO824細胞、SK-RC-20細胞 DMS 273細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AN-3細胞、OCI-Ly7細胞、Hs940-T細胞 Wien 133細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1404細胞、KLM-1細胞、MNNG細胞 Experimental Mammary Tumour-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE 354.T細胞、bEND.3細胞、QGY7703細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 COR-L105 epithelioid cells人原發(fā)性非小細胞肺癌細胞系 細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 B-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-738細胞、Hs578Bst細胞、H-2452細胞 HFT 8810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-85-1細胞、MPC 11細胞、HEC-151細胞 AKR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA-TU S細胞、RS 4;11細胞、184A1細胞 KM12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Farage Original Line細胞、NCI-H165細胞、SW-839細胞 PC-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 982細胞、DV90細胞、C33A細胞 NIH:OVCAR-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPTEC TERT1細胞、HONE-1細胞、MDA MB 175 VII細胞 CFPAC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TMK1細胞、ACT-1細胞、JeKo-1細胞 OAC-P4C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hut292細胞、Karpas 422細胞、AG06814-M細胞 A3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-763細胞、X63-Ag8-653細胞、NPA87細胞 TF-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Chang liver細胞、Alexander cells細胞、hTERT RPE1細胞 COR-L105 epithelioid cells人原發(fā)性非小細胞肺癌細胞系 CAOV4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G-292, clone A141B1細胞、Hs 766細胞、Panc08.13細胞 MGc80-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep 3B細胞、T98-G細胞、OVCAR432細胞 J-111細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero 76 clone E6細胞、LAD2細胞、HT-22細胞 LNCaP-FGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL26細胞、NCI-H250細胞、RA 1細胞 HANK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCA-38細胞、H-1781細胞、NCI-H322細胞 CAKI1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anip 973細胞、159 PT細胞、HTR8svn細胞 CAKI1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anip 973細胞、159 PT細胞、HTR8svn細胞 LLC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JHH-7細胞、MDA-MB435細胞、JROECL33細胞 PC14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LMTK-細胞、Sup T-1細胞、HOPC細胞 H125細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLM16細胞、LLC-WRC 256細胞、RPPVEC細胞 IHHA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:G402細胞、BEL 7405細胞、TE-32細胞 ARIP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR4-2J細胞、H1666細胞、CFSC-2G細胞 NPC-039細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF 7B細胞、PE/CA-PJ-34細胞、Sp2/O-Ag14細胞 AG 9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos-RA1細胞、IAR20細胞、NCIH345細胞 AU565細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BV2細胞、COLO-741細胞、RL-952細胞 F-81細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIC細胞、WM266細胞、X63細胞 SACCLM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293細胞、HCT/Taxo1細胞、Det. 562細胞 SK-NMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss 3T6細胞、PAI細胞、MAEC細胞 LIXC-002細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B4G12細胞、MRC9細胞、M059J細胞 Hs 895.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 79細胞、SRA01/04細胞、HOP 92細胞 Mel-MeWo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UK Pan-1細胞、K562細胞、P3HR1-BL細胞 BJAB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320 DM細胞、SK-N-BE(2)-M17細胞、tdott細胞 PANC-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHAGOK1細胞、NCI-H510A細胞、H-EMC-SS細胞 SKG-IIIa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE80細胞、BC-019細胞、H-2196細胞 MOLT3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H660細胞、P3 (Jiyoye)細胞、293 c18細胞 GM07404細胞系相關(guān)產(chǎn)品:639-V細胞、Pa017C細胞、OCI/AML-5細胞 MDA-MB-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A 172細胞、KGN細胞、LOUNH91細胞 SK-ChA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sc-1細胞、BetaTC6細胞、SCaBER細胞 Hs294細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT細胞、COLO 201細胞、MDA-MB435細胞 TSUpr1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU761細胞、UCLA NPA871細胞、KG1細胞 Baby Hamster Kidney 21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2087細胞、DHBE細胞、H520細胞 MTEC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1833細胞、Vero 76 clone E6細胞、HS-294細胞 GM2219C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AK細胞、HEK 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149PT細胞、NT2/D1細胞、BALB/c 3T3 clone A31細胞 AtT20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U138MG細胞、HS-766T細胞、PA12細胞 COR-L105 epithelioid cells人原發(fā)性非小細胞肺癌細胞系 PK-13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-BE1細胞、NCI H747細胞、EBNA-293細胞 SW 1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OB2細胞、SK-RC-52細胞、SNB-19細胞 TW 01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A20細胞、CORL51細胞、CHG-5細胞 AKR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA-TU S細胞、MDA-MB231細胞、SK-RC 42細胞 "
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