"SNU-484 epithelioid cells人胃癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng):細(xì)胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯(cuò),就是記得到時(shí)間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細(xì)胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢?細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細(xì)胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長(zhǎng)行為。凍存細(xì)胞:補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長(zhǎng)至70%單層時(shí)收獲細(xì)胞,計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù),用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng),應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)24小時(shí))內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每?jī)龃婀懿怀^1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個(gè)最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞,以免其中的一個(gè)液氮罐出現(xiàn)問題!細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點(diǎn):當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時(shí),有可能會(huì)出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要;其實(shí),細(xì)胞復(fù)蘇只是一個(gè)簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn),不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié),不然,也不一定會(huì)盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護(hù)目鏡;盡量降低DMSO對(duì)細(xì)胞的損傷等等。 LM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NFS 60細(xì)胞、NCI-H735細(xì)胞、P30-OHKUBO細(xì)胞 HUT-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-815細(xì)胞、Hut292細(xì)胞、NMCG1細(xì)胞 CNE-2Z細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Centre Antoine Lacassagne-27細(xì)胞、WM35細(xì)胞、Line 870 Emory University-4細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 SNU-484 epithelioid cells人胃癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代的一般方法:開始細(xì)胞傳代前,仔細(xì)檢查細(xì)胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全:一般主要有:細(xì)胞(單層細(xì)胞,鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-0.2%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或199等適合細(xì)胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液(1萬單位)、7.5%NaHC03溶液、0.25%胰蛋白酶、PBS洗液。用具:小方瓶(100m1)、克氏瓶、膠塞、吸管(10ml、1m1)、細(xì)胞吹打管(20ml)(以上用具需經(jīng)121℃至少15分鐘高壓滅菌)、C02 孵箱、超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、4℃、-20℃冰箱;操作步驟:鏡檢細(xì)胞,挑選生長(zhǎng)狀態(tài)良好,細(xì)胞界限清晰,具有立體感,形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細(xì)胞。配制細(xì)胞培養(yǎng)液:按以下配比配制MEM-0.2%LH培養(yǎng)液100ml內(nèi),加入滅活小牛血清10m1,慶大霉素溶液0.3m1,7.5%碳酸鈉溶液3ml。(僅供一般參考)。消化細(xì)胞;先用PBS洗液沖洗細(xì)胞表面1-2次,每次10m1,棄去洗液,向細(xì)胞瓶?jī)?nèi)加入0.25%胰蛋白酶溶液,每瓶1m1,細(xì)胞瓶平放,使消化液完全覆蓋細(xì)胞表面。至細(xì)胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液吹打分散細(xì)胞,按所需的傳代比例分裝于小方瓶(100m1)中,再加入10m1細(xì)胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝,然后補(bǔ)加至所需培養(yǎng)量。加塞,置于37±1℃孵箱培養(yǎng)。約2~4天成片。(由細(xì)胞接種濃度決定);填寫傳代記錄。 細(xì)胞傳代方法:1:2傳代 P3HR1-BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pan02細(xì)胞、MCA-205細(xì)胞、SK-ES-1細(xì)胞 Mouse INsulinoma 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U251MG細(xì)胞、H1436細(xì)胞、WI38細(xì)胞 T24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KCL22S細(xì)胞、GA-10細(xì)胞、UCLA-RO 81細(xì)胞 Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHEK細(xì)胞、T-HEECs細(xì)胞、SV40-MES13細(xì)胞 Transformed C3H Mouse Kidney-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1088細(xì)胞、NK92-MI細(xì)胞、HAEC細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 SNU-484 epithelioid cells人胃癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁或懸浮,詳見細(xì)胞說明書部分 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書 常見細(xì)胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會(huì)對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因?yàn)楹窟^低會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)不足,過高則會(huì)破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時(shí)須更換培養(yǎng)基?視細(xì)胞生長(zhǎng)密度而定,或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時(shí)間,按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換;3)購買的復(fù)蘇細(xì)胞,為何會(huì)有脫落?因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^程中不可避免的會(huì)有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少,大都是因?yàn)殡x心過程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性損傷,以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長(zhǎng)隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí),均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。 H508細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ADR-RES細(xì)胞、U 138 MG細(xì)胞、H-1819細(xì)胞 SUM 102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss-3T3細(xì)胞、ID8/MOSEC細(xì)胞、NFS60細(xì)胞 MD Anderson-Metastatic Breast-435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP-FGC細(xì)胞、HOC-1細(xì)胞、CMT-64細(xì)胞 Hs 578.Bst細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2107細(xì)胞、MPC-5細(xì)胞、HL-60細(xì)胞 SO-Rb 50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293/EBNA細(xì)胞、H-1385細(xì)胞、RASMC細(xì)胞 NCI-H1299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L23細(xì)胞、Madison 109細(xì)胞、C643細(xì)胞 QGY 7701細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H23細(xì)胞、HOPC細(xì)胞、MS1細(xì)胞 MCA38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-hth74細(xì)胞、DMS 273細(xì)胞、P3/NSI/1-AG4-1細(xì)胞 JURKAT E-61細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MT-4細(xì)胞、WM-2664細(xì)胞、HNEpC細(xì)胞 HEK 293FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CBRH7919細(xì)胞、HBE細(xì)胞、IAR 20細(xì)胞 SNU-484 epithelioid cells人胃癌細(xì)胞系 Me-Wo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM細(xì)胞、HO1-N-1細(xì)胞、SW837細(xì)胞 T98 G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon38細(xì)胞、MMQ細(xì)胞、32D.cl3細(xì)胞 WEHI-3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Okayama University Medical School-23細(xì)胞、H1385細(xì)胞、GA-10-Clone-4細(xì)胞 THC-8307細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS 123細(xì)胞、SW-403細(xì)胞、Medical Research Council cell strain-9細(xì)胞 WM266mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hepatoma-22細(xì)胞、HEK-293細(xì)胞、CEMC1細(xì)胞 Jurkat-77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human fetal lung fibroblast 1細(xì)胞、CP-70細(xì)胞、686LN-M4e細(xì)胞 Jurkat-77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human fetal lung fibroblast 1細(xì)胞、CP-70細(xì)胞、686LN-M4e細(xì)胞 Caco-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-1 myeloid leukemia細(xì)胞、HLF細(xì)胞、J774細(xì)胞 BEL 7404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo205細(xì)胞、JiyoyeP-2003細(xì)胞、HIMEC細(xì)胞 Rat Skin 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UCLA SO M21細(xì)胞、B16BL-6細(xì)胞、CAL39細(xì)胞 H-2081細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK 15細(xì)胞、NuTu-19細(xì)胞、HCC-1569細(xì)胞 HuT102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA-801D細(xì)胞、RPMI-8226細(xì)胞、NCl-H157細(xì)胞 RCC-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549細(xì)胞、KPL1細(xì)胞、COLO 320 HSR細(xì)胞 ACC-M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF10-A細(xì)胞、NFS60細(xì)胞、HN13細(xì)胞 CAL78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFE-296細(xì)胞、Hs 737.T細(xì)胞、OEC19細(xì)胞 MDA231-LM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H716細(xì)胞、MA-782細(xì)胞、Reuber H-35細(xì)胞 WEHI-3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Okayama University Medical School-23細(xì)胞、H1385細(xì)胞、GA-10-Clone-4細(xì)胞 MCF-10 Attached細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH929細(xì)胞、E6-1細(xì)胞、RL952細(xì)胞 HCC-1395細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCaBER細(xì)胞、MOLP8細(xì)胞、HO1-N1細(xì)胞 PC-3/M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:184A1細(xì)胞、NCM356細(xì)胞、H1155細(xì)胞 HEK/EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:K 562細(xì)胞、HT3細(xì)胞、NCI-H1693細(xì)胞 A2780細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RMG1細(xì)胞、Sf21細(xì)胞、CCD 841 CoTr細(xì)胞 UO.31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-134 VI細(xì)胞、GB-1細(xì)胞、NBL-1細(xì)胞 H-1341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A1847細(xì)胞、MDBK (NBL-1)細(xì)胞、D-341Med細(xì)胞 MMAc.SF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PIEC細(xì)胞、NCIH2452細(xì)胞、CDC/EU.HMEC-1細(xì)胞 CFSC-8B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-6 myoblast細(xì)胞、HCAEC細(xì)胞、M20 [Human melanoma]細(xì)胞 OUMS-23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:210RCY3-Ag1.2.3細(xì)胞、SF 763細(xì)胞、COLO206F細(xì)胞 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Metastasis細(xì)胞、Okayama University Medical School-23細(xì)胞、FHL124細(xì)胞 KTA7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NuTu-19細(xì)胞、M07e細(xì)胞、QGY7701細(xì)胞 Eca109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H283細(xì)胞、B104 [Rat neuroblastoma]細(xì)胞、H1341細(xì)胞 FRhK-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IEC-18細(xì)胞、EA hy 926細(xì)胞、WEHI-164細(xì)胞 MHCC97-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Homo sapiens No. 578, tumor cells細(xì)胞、RIN m5F細(xì)胞、MC3T3-E1(C4)細(xì)胞 NCI-SNU-668細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16-BL6細(xì)胞、PATU-S細(xì)胞、L2細(xì)胞 BHK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TEC細(xì)胞、I90細(xì)胞、H2085細(xì)胞 NCIH28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJRH 30細(xì)胞、Tu 177細(xì)胞、3 LL細(xì)胞 Hs729T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIHOVCAR3細(xì)胞、EJ細(xì)胞、MDA361細(xì)胞 CCC-HHM-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL40細(xì)胞、NCIH2171細(xì)胞、CCD19-Lu細(xì)胞 HMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM-CCRF (CAMR)細(xì)胞、624 MEL細(xì)胞、GM2132細(xì)胞 LL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMNSAH-DF 1細(xì)胞、HL-60細(xì)胞、SW 1116細(xì)胞 hTERTHME1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-3細(xì)胞、PaCa2細(xì)胞、LY-R細(xì)胞 SNU-484 epithelioid cells人胃癌細(xì)胞系 Meat Animal Research Center-145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hu-P-T3細(xì)胞、CWR22R細(xì)胞、CCD-841-CoN細(xì)胞 PL-45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPNRTBM1細(xì)胞、MN60細(xì)胞、HCa/16A3-F細(xì)胞 NCIH295R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TI-73細(xì)胞、H-1672細(xì)胞、GM03570細(xì)胞 MD Anderson-Metastatic Breast-435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP-FGC細(xì)胞、KYSE410細(xì)胞、Colo320細(xì)胞 "
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