"SNU-449 epithelioid cells人肝癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞株(系)的使用,為醫(yī)學(xué)研究和測(cè)試工作帶來(lái)了極大的方便。但細(xì)胞的傳代是有限制的,長(zhǎng)期連續(xù)傳代的細(xì)胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細(xì)胞的生長(zhǎng)與形態(tài)等會(huì)有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細(xì)胞失去原有的遺傳特性,有時(shí)還會(huì)由于細(xì)胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實(shí)際工作中常需凍存一定數(shù)量的細(xì)胞,以備替換使用。細(xì)胞冷凍與復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前,細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。細(xì)胞在不加任何保護(hù)劑的情況下直接冷凍,細(xì)胞內(nèi)外的水分會(huì)很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應(yīng)。如細(xì)胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細(xì)胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復(fù)合體也易破壞引起細(xì)胞膜通透性的改變,使細(xì)胞內(nèi)容物丟失。如果細(xì)胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細(xì)胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷,而致細(xì)胞死亡。因此,細(xì)胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細(xì)胞內(nèi)水分,減少細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護(hù)劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細(xì)胞,可以使冰點(diǎn)下降,提高細(xì)胞膜對(duì)水的通透性,且對(duì)細(xì)胞無(wú)明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細(xì)胞內(nèi)的水分滲出細(xì)胞外,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機(jī)會(huì),從而減少冰晶對(duì)細(xì)胞的損傷。 AU565細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BV2細(xì)胞、COLO-741細(xì)胞、RL-952細(xì)胞 WERIRb1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Clone 15 HL-60細(xì)胞、HCC0070細(xì)胞、Ly18細(xì)胞 RBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGROV-1細(xì)胞、HEK 293 c18細(xì)胞、NS1-Ag4/1細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 SNU-449 epithelioid cells人肝癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 為了防止因污染或技術(shù)原因使長(zhǎng)期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細(xì)胞因傳代而遲早會(huì)出現(xiàn)變異,有時(shí)因寄贈(zèng)、交換和購(gòu)買,培養(yǎng)細(xì)胞從一個(gè)實(shí)驗(yàn)室轉(zhuǎn)運(yùn)到另一個(gè)實(shí)驗(yàn)室,的策略是進(jìn)行低溫保存。這對(duì)于維持一些特殊細(xì)胞株的遺傳特性極為重要?,F(xiàn)簡(jiǎn)要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點(diǎn)。細(xì)胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時(shí),細(xì)胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止?fàn)顟B(tài),故可以長(zhǎng)期保存。細(xì)胞低溫保存的關(guān)鍵,在于通過(guò)0~20℃階段的處理過(guò)程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細(xì)胞的嚴(yán)重?fù)p傷。凍存細(xì)胞的復(fù)蘇:凍存細(xì)胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細(xì)胞要快速融化,并直接加入完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中。若細(xì)胞對(duì)凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細(xì)胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基鋪板細(xì)胞。1ml凍存細(xì)胞使用10~20ml完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基。進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù),細(xì)胞接種應(yīng)該至少在3×10(5)活細(xì)胞/ml;培養(yǎng)細(xì)胞12到24小時(shí),更換新鮮的完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細(xì)胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細(xì)胞加入到大約25ml完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長(zhǎng)培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細(xì)胞,并且進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)。細(xì)胞鋪板,細(xì)胞接種應(yīng)該至少為3×10(5)活細(xì)胞/ml。細(xì)胞的分化:一個(gè)成年人全身細(xì)胞總數(shù)約1012個(gè),可以區(qū)分為200多種不同類型的細(xì)胞:形態(tài)結(jié)構(gòu),代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細(xì)胞均來(lái)自一個(gè)受精卵細(xì)胞。所以,通常把發(fā)育過(guò)程中,細(xì)胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過(guò)程稱為細(xì)胞分化。細(xì)胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細(xì)胞的產(chǎn)生和分化,這個(gè)過(guò)程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長(zhǎng)不斷分裂的細(xì)胞,轉(zhuǎn)入分化,通常從細(xì)胞周期中G1期開始時(shí)一個(gè)確定的點(diǎn)G0點(diǎn)“逃逸”出細(xì)胞周期。旺盛生長(zhǎng)分裂的細(xì)胞和各種分化了的細(xì)胞,它們的基因表達(dá)和代謝活動(dòng)各不相同。 細(xì)胞傳代方法:1:5-1:10傳代;每周2-3次 HMEC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-sm 1細(xì)胞、PCI-4B細(xì)胞、MDA-MB-134 VI細(xì)胞 HMCB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madin-Darby Bovine Kidney細(xì)胞、MDCKII-WT細(xì)胞、NPC-TW 01細(xì)胞 B16-F10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp2/mIL-6細(xì)胞、HEK293-A細(xì)胞、EU-4細(xì)胞 RMG-I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMCB細(xì)胞、C3H-10T1/2細(xì)胞、293T/17細(xì)胞 1E8-H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 7666細(xì)胞、RBSMC細(xì)胞、LNCaP細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 SNU-449 epithelioid cells人肝癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng) 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣;多角形 購(gòu)買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復(fù)雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過(guò)程錯(cuò)誤;冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心;懸渾細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞;培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤;細(xì)胞置于-80℃太久等。建議嚴(yán)格參照ATCC的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行細(xì)胞復(fù)蘇、凍存等工作。欲將一般動(dòng)物細(xì)胞離心下來(lái),其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動(dòng)物細(xì)胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過(guò)高或離心時(shí)間過(guò)長(zhǎng)都將造成細(xì)胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對(duì)離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機(jī)轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部?jī)?nèi)壁的距離;rpm為離心機(jī)每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對(duì)離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來(lái)表示單位。 KE-37細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KE39細(xì)胞、6-T CEM細(xì)胞、HM1900細(xì)胞 TE-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS-79細(xì)胞、MCF/Adr細(xì)胞、ECC10細(xì)胞 Merwin Plasma Cell tumor-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PAI細(xì)胞、SUM 190細(xì)胞、MCF12A細(xì)胞 CORL23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DoTc2細(xì)胞、Madin Darby Bovine Kidney細(xì)胞、RF/6A細(xì)胞 HEK-293-FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NP-69細(xì)胞、32D:cl3細(xì)胞、C3H/10T1/2-clone8細(xì)胞 HELF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BAR-T細(xì)胞、MBT-2細(xì)胞、CAL-120細(xì)胞 U-138 MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH196細(xì)胞、A549/DDP細(xì)胞、VMRCRCZ細(xì)胞 JC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H157細(xì)胞、THEECs細(xì)胞、MDCKII-WT細(xì)胞 OCI-AML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO320DM細(xì)胞、Panc02.03細(xì)胞、HNE1細(xì)胞 P3X63-Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:8226/S細(xì)胞、PC14細(xì)胞、OV3121細(xì)胞 SNU-449 epithelioid cells人肝癌細(xì)胞系 P3 NS1 Ag4/1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OLN93細(xì)胞、Panc 2.03細(xì)胞、H-740細(xì)胞 Vero-76細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat Clone E6-1細(xì)胞、KMS26細(xì)胞、NCIH1694細(xì)胞 SUM149-PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC-LM3細(xì)胞、Vero E-6細(xì)胞、NOMO-1細(xì)胞 NPA-87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC92A細(xì)胞、H-4細(xì)胞、SUPT-1細(xì)胞 H-2085細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-PAP細(xì)胞、GTL16細(xì)胞、NCTC 3960細(xì)胞 A549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-341Med細(xì)胞、38C13細(xì)胞、CATHa細(xì)胞 A549細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-341Med細(xì)胞、38C13細(xì)胞、CATHa細(xì)胞 D10G41細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-102細(xì)胞、AR4IP細(xì)胞、bEnd3細(xì)胞 LTPA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH244細(xì)胞、HT-55細(xì)胞、NCIH1299細(xì)胞 Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QBC(939)細(xì)胞、JB 6細(xì)胞、HIT T15細(xì)胞 MILE SVEN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-A31細(xì)胞、HuH7細(xì)胞、IFRS1細(xì)胞 IMR90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Natural Killer-92細(xì)胞、Line 522細(xì)胞、COLO684細(xì)胞 Hs-675-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO8910細(xì)胞、C4 I細(xì)胞、RPMI-8226S細(xì)胞 293-FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-NS1/1Ag 4.1細(xì)胞、H-2066細(xì)胞、LADMAC細(xì)胞 BEL7405細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GDM1細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361細(xì)胞、CAL33細(xì)胞 PLC/PRF/5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos.G6.C10細(xì)胞、HEY A8細(xì)胞、OS-RC-2細(xì)胞 CII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLFC細(xì)胞、bEnd3細(xì)胞、HEL92.1.7細(xì)胞 Doubling time: ~50 hours (ATCC).細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV1/P細(xì)胞、HFL細(xì)胞、RBSMC細(xì)胞 CAKI1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anip 973細(xì)胞、159 PT細(xì)胞、HTR8svn細(xì)胞 NCIH548細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 679細(xì)胞、HGC27細(xì)胞、NCI-H838細(xì)胞 Granta519細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE15細(xì)胞、Balb/c 3T3細(xì)胞、Ishikawa細(xì)胞 SK-MEL-24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL 60細(xì)胞、EM-3細(xì)胞、NuTu 19細(xì)胞 HUT125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLE 12細(xì)胞、P3X63Ag8653細(xì)胞、32D clone3細(xì)胞 293E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:INS-1E細(xì)胞、LS 174 T細(xì)胞、SHP77細(xì)胞 X63-Ag8-653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CemT4細(xì)胞、C-4-I細(xì)胞、NCIH1155細(xì)胞 SUM-102PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MZCRC1細(xì)胞、UWB1289細(xì)胞、D283細(xì)胞 GM05887A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK Type II細(xì)胞、H2196細(xì)胞、CORL51細(xì)胞 BpRcl細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR-8/SV neo細(xì)胞、NCI-H508細(xì)胞、ARH 77細(xì)胞 NK-92 transfected with MFG-hIL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293GP細(xì)胞、KY70細(xì)胞、CHO-ori細(xì)胞 WEHI-3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Okayama University Medical School-23細(xì)胞、H1385細(xì)胞、GA-10-Clone-4細(xì)胞 MDA330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pt K2細(xì)胞、PG [Human lung carcinoma]細(xì)胞、ROS-17/2.8細(xì)胞 HUT28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320 HSR細(xì)胞、KS-1 [Human glioblastoma]細(xì)胞、QSG7701細(xì)胞 RGB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RL細(xì)胞、LTEP a2細(xì)胞、SK-MES細(xì)胞 H-847細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Li-7細(xì)胞、ATDC-5細(xì)胞、CMECs細(xì)胞 CNE-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPBALL細(xì)胞、SUSM1細(xì)胞、IA-LM細(xì)胞 MDA-157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJ-RH30細(xì)胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細(xì)胞、NCIH820細(xì)胞 TE671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AU-Mel細(xì)胞、SK.MEL.28細(xì)胞、Y3.AG.1.2.3細(xì)胞 RPMI-1788細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1693細(xì)胞、LK2細(xì)胞、SCC-1395細(xì)胞 NU-GC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-460細(xì)胞、Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-10細(xì)胞 ETCC-007細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL-92-1-7細(xì)胞、UT-7細(xì)胞、HCC1187細(xì)胞 786-0WT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PATU-S細(xì)胞、BXPC3細(xì)胞、TW 01細(xì)胞 SMMC7721細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTLA4Ig-24細(xì)胞、C-6細(xì)胞、GM07404細(xì)胞 KY-270細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B78細(xì)胞、H1688細(xì)胞、COV362細(xì)胞 Colo-206F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Shadyside Hospital Pittsburgh-77細(xì)胞、V-79細(xì)胞、NCI-H1930細(xì)胞 HT3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FDC-P1細(xì)胞、HEK293EBNA細(xì)胞、OK細(xì)胞 Human fetal lung fibroblast 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI AML3細(xì)胞、LC-1 sq細(xì)胞、WM239細(xì)胞 293-EBNA1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS-1-Ag4-1細(xì)胞、RAW264.7細(xì)胞、Blotchy fibroblast-11細(xì)胞 NCIH2081細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:74Int細(xì)胞、HPAFII細(xì)胞、Homo sapiens No. 578, breast cells細(xì)胞 NCI-H1618細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3396細(xì)胞、H-1417細(xì)胞、SNU-1細(xì)胞 KM933細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Psi-2 DAP細(xì)胞、SK-Mel1細(xì)胞、BT549細(xì)胞 WSU-DLCL(2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK細(xì)胞、V 79-4細(xì)胞、HCV 29細(xì)胞 SNU-449 epithelioid cells人肝癌細(xì)胞系 Hs 934.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV4-11細(xì)胞、NCIH2030細(xì)胞、G 401細(xì)胞 SRA01/04 (HLE)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMO-1細(xì)胞、NCI-H1404細(xì)胞、SK-N-BE(1)細(xì)胞 N-9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK15細(xì)胞、U251細(xì)胞、T98-G細(xì)胞 Merwin Plasma Cell tumor-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PAI細(xì)胞、LCD細(xì)胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細(xì)胞 "
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