Alarma Blue細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒

中文名稱：Alarma Blue細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒

英文名稱：AlamaBlue Cell Viability Assay Kit 說

產(chǎn)品規(guī)格：500T

AlamaBlue 細(xì)胞活力檢測試劑盒提供了一種可靠、靈敏、安全和低成本的快速有效檢測細(xì)胞活力與毒性的方法。AlamaBlue 通過在細(xì)胞生長的培養(yǎng)基中所產(chǎn)生的化學(xué)還原反應(yīng)，將非熒光信號的染料轉(zhuǎn)換成為一紅色熒光物質(zhì)，試鹵靈（9-羥基-3-異吩惡嗪酮7-羥基-3H-吩惡嗪-3-酮），從而檢測細(xì)胞的存活率。維持細(xì)胞生產(chǎn)需要還原性環(huán)境而抑制生長則表現(xiàn)為氧化型環(huán)境。細(xì)胞生長率相關(guān)的降低可表現(xiàn)為氧化還原指示劑從氧化型（非熒光素、紫色）轉(zhuǎn)為還原型（熒光素、紅色）。該熒光信號可以用530~560nm 的激發(fā)波激發(fā)，在590nm 處可以獲發(fā)射波，檢測570 和600nm 的的吸光度值，校正監(jiān)測值，可以減去相應(yīng)的570nm 和600nm 的背景吸光度值。檢測所產(chǎn)生的熒光信號是與樣品中的活細(xì)胞數(shù)成正比的。

AlamaBlue 細(xì)胞活性檢測試劑盒的靈敏度相似于[3H]胸苷法檢測細(xì)胞增殖法。根據(jù)不同類型的細(xì)胞，AlamaBlue 可以檢測到至少40個細(xì)胞，同時保證很好的重現(xiàn)性和靈敏度。作為試鹵靈（紫紅、紅色熒光）可以進(jìn)一步被還原為水解化的試鹵靈（無色、無熒光），當(dāng)細(xì)胞數(shù)量增多，所有的刃天青（7-羥基-3-羰基-10-氧化-三氫吩惡嗪）被轉(zhuǎn)換為試鹵靈（9-羥基-3-異吩惡嗪酮7-羥基-3H-吩惡嗪-3-酮），試劑盒的信號反而會發(fā)生衰減。因此，對于您所用的試劑盒來說，針對不同的細(xì)胞類型，應(yīng)該調(diào)整您的細(xì)胞數(shù)，做相應(yīng)的優(yōu)化，才能得到更好的結(jié)果。

操作說明
以下操作可用作通用指導(dǎo)建議?？紤]不同細(xì)胞類型與培養(yǎng)條件的差異性，有必要根據(jù)實(shí)際情況優(yōu)化您的操作步驟。
1. 96 孔細(xì)胞培養(yǎng)板每孔100μL 培養(yǎng)基飼養(yǎng)細(xì)胞，控制細(xì)胞數(shù)目在40~10000 個/貼壁細(xì)胞，2000~500000 個/懸浮細(xì)胞。設(shè)置空培養(yǎng)基做對照。
2. 加入10μL AlamaBlue 溶液至培養(yǎng)基中，37 度孵育：24 小時（比色法讀數(shù)）；5-6 小時（熒光讀數(shù)）。
3. 檢測570nm 和600nm 的吸光度，或者用熒光微孔板讀數(shù)530nm 激發(fā)，590nm 發(fā)射波讀數(shù)。
4. 如果采用比色法檢測，選擇OD570-OD600 檢測，如果檢測熒光信號，請在校正OD 值后，先設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線，選擇合適您實(shí)驗(yàn)的細(xì)胞濃度。

操作步驟
1. 96 孔板飼養(yǎng)細(xì)胞至所需濃度。
2. 根據(jù)您的實(shí)驗(yàn)加藥刺激，培養(yǎng)細(xì)胞一段時間。
3. 加入10μL AlamaBlue 溶液至培養(yǎng)基中，37 度孵育：24 小時（比色法讀數(shù)）；5-6 小時（熒光讀數(shù)）。
4. 檢測570nm 和600nm 的吸光度，或者用熒光微孔板讀數(shù)530nm 激發(fā)，590nm 發(fā)射波讀數(shù)。
5. 如果采用比色法檢測，選擇OD570-OD600 檢測，如果檢測熒光信號，請在校正OD 值后，先設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線，選擇合適您實(shí)驗(yàn)的細(xì)胞濃度。

特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！