WST-1細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒

中文名稱：WST-1細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒

英文名稱：WST-1 Cell Proliferation & Cell Viability Detection Kit

產(chǎn)品規(guī)格：100T|500T

疊氮類四唑鹽是一種類似于MTT 的化合物，在電子耦合試劑存在的情況下，可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶能夠被還原成橙黃色水溶性的甲月贊。生成的甲臜能夠溶解在組織培養(yǎng)基中，生成的甲臜量與活細胞數(shù)量成正比。細胞增殖越多越快，則顏色越深；細胞毒性越大，則顏色越淺。

此法是用于測定細胞增殖或毒性試驗中活細胞數(shù)目的一種高靈敏度、高穩(wěn)定性且無放射性的比色檢測法。實驗的靈敏度比其它四唑鹽如MTT, XTT, MTS 高，線性范圍更寬。

我司四唑鹽對細胞無明顯毒性。加入我司四唑鹽顯色后，可以在不同時間反復用酶標儀讀板，使檢測時間更加靈活，便于找到測定時間。

注意事項
1. 本試劑盒的檢測依賴于脫氫酶催化的反應，如果待檢測體系中存在較多的還原劑，例如一些抗氧化劑會干擾檢測，需設(shè)法去除。
2. 如果待測溶液有還原性，測定不含細胞，但含有我司四唑鹽的待測溶液在450 nm 處的空白吸光度。如果該吸光度很小，則可以直接加入我司四唑鹽，如果吸光度相對較大，則需要除去培養(yǎng)基，并用培養(yǎng)基洗滌細胞兩次，然后加入新的100 μl 培養(yǎng)基和10 μl 我司四唑鹽進行檢測。
3. 用酶標儀檢測前請確保孔內(nèi)沒有氣泡，否則會干擾測定。
4. 為保證您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

操作方法
1. 96 孔板加入細胞100μL/孔（約1×104），置37℃ 5%CO2 細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24 小時。
2. 加入適當濃度的受試化合物。
3. 將96 孔板在37℃，含5% CO2 空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4. 向各孔中加入10 μl 的我司四唑鹽工作液。
5. 37℃下孵育1～4 小時。
6. 酶標儀在450nm 波長處檢測每孔的光密度。

結(jié)果分析
1. 細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（完全培養(yǎng)基加我司四唑鹽，無細胞）或空白藥物孔OD 值（完全培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加我司四唑鹽，無細胞），各重復孔的OD 值取均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
2. 求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)。
 

特別提示：本公司的所有產(chǎn)品僅可用于科研實驗，嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途！