"HT-144 epithelioid cells人惡性黑色素瘤細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問(wèn)題分析:總結(jié)1:復(fù)蘇過(guò)程沒(méi)有問(wèn)題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當(dāng)然也需要考慮血清問(wèn)題,還有確信拿來(lái)的細(xì)胞沒(méi)問(wèn)題??偨Y(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實(shí)際上復(fù)蘇出問(wèn)題的可能非常小,因?yàn)椴僮骱?jiǎn)單,而且死板。1、你凍存的時(shí)候是不是消化的時(shí)間過(guò)長(zhǎng),這是一般人所注意不到的,即使書(shū)上也不講這個(gè)問(wèn)題,太長(zhǎng)的消化時(shí)間會(huì)讓細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復(fù)蘇的時(shí)候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會(huì)死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過(guò)7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時(shí)候是不是把DMSO混均勻,這個(gè)有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格,很多人容易忘卻這個(gè)事情,因?yàn)檫@個(gè)東西流程長(zhǎng)。6、如果你細(xì)胞污染,你是否能很快看到,我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個(gè)角度講建議去除離心這步。7、你的細(xì)胞在凍存前是否過(guò)密。還有,不贊成孵箱污染這個(gè)概念的,所有在一個(gè)孵箱里的細(xì)胞都污染一個(gè)細(xì)菌的話,這個(gè)細(xì)菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因?yàn)榉跸錈o(wú)論你如何處理都有大量的細(xì)菌,問(wèn)題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問(wèn)題,這個(gè)很重要,不能靠猜,否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題,這個(gè)見(jiàn)得太多了,別不當(dāng)會(huì)事。 HBE 135-E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SaOS細(xì)胞、HPAEpiC細(xì)胞、Clone 929細(xì)胞 GBCSD細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vx2細(xì)胞、IGROV細(xì)胞、Hs 274.T細(xì)胞 MA 104細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IHHA-1細(xì)胞、NCIH1876細(xì)胞、NCI-H1568細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 HT-144 epithelioid cells人惡性黑色素瘤細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞的衰老:體外細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)證明:成纖維細(xì)胞:來(lái)自胎兒傳代50次后衰老死亡,來(lái)自成人傳代20次后衰老死亡(與具體年齡有關(guān);來(lái)自小鼠傳代14--28次后衰老死亡,來(lái)自烏龜傳代90--125次后衰老死亡。細(xì)胞衰老過(guò)程中會(huì)發(fā)生一系列的變化,包括:蛋白質(zhì)合成速度降低,已有蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)變化,特異蛋白質(zhì)成份出現(xiàn);同時(shí),細(xì)胞核,線粒體,膜系統(tǒng)、骨架系統(tǒng)等都有結(jié)構(gòu)、功能的改變。細(xì)胞衰老原因,尚無(wú)定論,出現(xiàn)過(guò)好幾種理論與假說(shuō),其中得到較廣泛認(rèn)可的是“自由基損傷假說(shuō)”。細(xì)胞凋亡:細(xì)胞的死亡是個(gè)體存活的正?,F(xiàn)象,常見(jiàn)的細(xì)胞死亡形式有3種:壞死、凋亡和細(xì)胞毒性。多細(xì)胞生物的生命活動(dòng)中,因?yàn)榄h(huán)境因素的突然變化或病原物的入侵,導(dǎo)致一部分細(xì)胞死去,稱(chēng)為細(xì)胞的病理死亡,或細(xì)胞壞死。壞死是細(xì)胞暴露于嚴(yán)重的物理或化學(xué)刺激時(shí)導(dǎo)致的細(xì)胞死亡;細(xì)胞毒性是由細(xì)胞或者化學(xué)物質(zhì)引起的單純的細(xì)胞殺傷事件,不依賴于其它兩種細(xì)胞死亡機(jī)理,如殺傷T細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用。還有一種情況,一部分細(xì)胞的死亡是生物個(gè)體正常生命活動(dòng)(代謝、生長(zhǎng)、發(fā)育、分化)的一個(gè)必要部分;似乎帶有“犧牲局部,保全整體”的意味。這種情況下的細(xì)胞死亡,明顯地受遺傳控制,稱(chēng)為細(xì)胞凋亡。凋亡(Apoptosis)則是程序性的、正常的細(xì)胞死亡,是機(jī)體清除無(wú)用的或者不想要的細(xì)胞的手段。它與細(xì)胞壞死是兩個(gè)截然不同的過(guò)程,無(wú)論從形態(tài)學(xué)、生物學(xué)還是生化的特征來(lái)說(shuō),都有明顯的區(qū)別。細(xì)胞凋亡現(xiàn)象普遍存在于生物界。細(xì)胞凋亡與細(xì)胞增殖、分化和衰老起著互補(bǔ)與平衡的作用,在多細(xì)胞動(dòng)物的發(fā)育、形態(tài)建成與維持中扮演至關(guān)重要的角色。作為細(xì)胞的一種基本生命現(xiàn)象,凋亡失控的結(jié)果將是可怕的:凋亡不足時(shí),易發(fā)生癌變、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡過(guò)量則可能產(chǎn)生獲得性免疫缺陷綜合征(HIV)、重癥肝炎與退行性神經(jīng)疾病,如老年性癡呆癥(Alzheimer""s disease)、帕金森氏癥(Parkinson""s disease)。因此研究細(xì)胞凋亡及其機(jī)理具有重要的理論和實(shí)踐意義。 細(xì)胞傳代方法:1:3-1:8?jìng)鞔?3天換液1次。 U 266細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-4細(xì)胞、AML-EOL-1細(xì)胞、HCS-2/8細(xì)胞 RCK-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Arizona Cell Culture-893細(xì)胞、WC00079細(xì)胞、RPMI 7666細(xì)胞 RBVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI AML2細(xì)胞、HDLM2細(xì)胞、HBZY 1細(xì)胞 CCD-1095Sk細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC 9細(xì)胞、hFOB 1.19細(xì)胞、HCO細(xì)胞 5637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:2T細(xì)胞、H292細(xì)胞、SUP T1細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 HT-144 epithelioid cells人惡性黑色素瘤細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng) 細(xì)胞形態(tài)特性:成纖維細(xì)胞 細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見(jiàn)問(wèn)題總結(jié):1)一般客戶拿到細(xì)胞后,應(yīng)該注意什么?客戶收到細(xì)胞后先不開(kāi)蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時(shí)后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,200X各一張),排除細(xì)胞本身污染的情況;收到細(xì)胞未開(kāi)封,出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況,請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過(guò)80%匯合度時(shí),將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過(guò)80%匯合度時(shí),請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細(xì)胞多久能到,是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細(xì)胞前請(qǐng)確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細(xì)胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細(xì)胞大都無(wú)法立即適應(yīng),造成細(xì)胞無(wú)法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類(lèi)?不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源,所以血清的種類(lèi)和品質(zhì)對(duì)于細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。來(lái)自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯(cuò)誤常會(huì)造成細(xì)胞無(wú)法存活。 OC-316細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR75_1細(xì)胞、HT-115細(xì)胞、alpha-TC1.6細(xì)胞 786-O細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P-19細(xì)胞、Y3M細(xì)胞、KU812-F細(xì)胞 MV4-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EBTr (NBL-4)細(xì)胞、AC16 [Human hybrid]細(xì)胞、SKLU01細(xì)胞 NCIH716細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03573A細(xì)胞、3D4/21細(xì)胞、AMJ2C8細(xì)胞 Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L 540細(xì)胞、RMC細(xì)胞、P3-X63-Ag8-653細(xì)胞 APRE-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuTu-80細(xì)胞、RAW2647細(xì)胞、OCI-LY-1細(xì)胞 Mo 59J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10 clone 4細(xì)胞、HuTu 80細(xì)胞、Ca759細(xì)胞 Scott細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GOS3細(xì)胞、SCC 4細(xì)胞、SW1116細(xì)胞 Det 562細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Loucy細(xì)胞、G402細(xì)胞、NCI-H1882細(xì)胞 Hs819T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-766-T細(xì)胞、U2OS細(xì)胞、INS1-E細(xì)胞 HT-144 epithelioid cells人惡性黑色素瘤細(xì)胞系 My-La 2059細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-266 AR1細(xì)胞、H345細(xì)胞、MIMVEC細(xì)胞 RKO-AS-45-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC996細(xì)胞、SuDHL 5細(xì)胞、Vero 76 clone E6細(xì)胞 SW1271細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT325細(xì)胞、P3X63 AG8-653細(xì)胞、3T3L1細(xì)胞 SHP-77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NG108-15細(xì)胞、COLO-679細(xì)胞、Hs-27細(xì)胞 LAN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCE細(xì)胞、SKG-IIIa細(xì)胞、Mac-1細(xì)胞 HT 1376細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-4(S+L-)細(xì)胞、Panc-327細(xì)胞、NCIH1993細(xì)胞 HT 1376細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-4(S+L-)細(xì)胞、Panc-327細(xì)胞、NCIH1993細(xì)胞 SKLU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-Mel1細(xì)胞、WEHI 3細(xì)胞、D283-MED細(xì)胞 NIH-3T3-L1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sup T-1細(xì)胞、B4G12細(xì)胞、RM1細(xì)胞 ROS17/28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Immortalized Human Hepatocytes細(xì)胞、MC57G細(xì)胞、IGROV-1細(xì)胞 VMM-5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CC-LP-I細(xì)胞、AtT20細(xì)胞、PL-9細(xì)胞 ML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HARA-B細(xì)胞、H-526細(xì)胞、SGC996細(xì)胞 HEC251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL1-0細(xì)胞、IHH4細(xì)胞、MDA453細(xì)胞 Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NFHIOSE-29細(xì)胞、A 2058細(xì)胞、H-2347細(xì)胞 CAL 12T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS-TE85細(xì)胞、SW-1990細(xì)胞、MES-SA/Dx-5細(xì)胞 SUDHL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-119細(xì)胞、JIMT-1細(xì)胞、COS1細(xì)胞 Nittby-Salford 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FAK+/+細(xì)胞、H-1522細(xì)胞、Dx5細(xì)胞 MRC 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE2-C細(xì)胞、PE CA PJ34細(xì)胞、RC-4B細(xì)胞 HFTF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa細(xì)胞、AX-Mel細(xì)胞、NCIH1048細(xì)胞 R 2 C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD-841-CoTr細(xì)胞、MDA-468細(xì)胞、HCEC-12細(xì)胞 3T3(A31)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN-1細(xì)胞、H-548細(xì)胞、PL-11細(xì)胞 H-508細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLCPK1細(xì)胞、NCIH727細(xì)胞、University of Arizona Cell Culture-812細(xì)胞 LA795細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero from pool #76細(xì)胞、HLF-a細(xì)胞、OVCAR-5細(xì)胞 ADR-RES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SG231細(xì)胞、B-16細(xì)胞、Hs600T細(xì)胞 MCF-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MONO-MAC 6細(xì)胞、NCIH1436細(xì)胞、LS 513細(xì)胞 U-87MG ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJ [Human fibroblast]細(xì)胞、SW 1222細(xì)胞、HT-1376細(xì)胞 C2BBe 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-510細(xì)胞、Hepa-RG細(xì)胞、130T細(xì)胞 IPI-2I細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP-N-RT-BM-1細(xì)胞、Hs870T細(xì)胞、TE-14細(xì)胞 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