"Hs 294T epithelioid cells人黑色素瘤細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 HcaF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H8細胞、YD-15細胞、RT-112細胞 KBM-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BPH-1細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞、Oregon J-111細胞 NCI-H1651細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caco-2/ATCC細胞、NCI/ADRRES細胞、ARO 81-1細胞 細胞生長:貼壁 Hs 294T epithelioid cells人黑色素瘤細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細胞,有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作;細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后,特別是重要的細胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁,一般來講,對作用于細胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學治療劑。 細胞傳代方法:1:2-1:4傳代,2-3天換液1次。 Immortal Pig Intestinal-2I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO Lec1細胞、LM TK negative細胞、Centre Antoine Lacassagne-27細胞 L363細胞系相關(guān)產(chǎn)品:alpha-TC1-6細胞、H1568細胞、S180細胞 BJA-B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Me Wo細胞、Granta 519細胞、TR146細胞 MDCC MSB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLA-144細胞、DoTc2-4510細胞、Porcine Kidney-13細胞 IBMF-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC/mHSC細胞、SW954細胞、L5178-R細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 Hs 294T epithelioid cells人黑色素瘤細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:混合星狀和多邊形 造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下。【違規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢! NCIH1792細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS TE85細胞、Y3-Ag 1.2.3細胞、HCC1833細胞 U-373 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-132細胞、Huh7.5.1細胞、GS9L細胞 BC-023細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL5細胞、COLO320HSR細胞、Gingival carcinoma Neck Metastasis細胞 C57 Mouse Tumor 93細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos(RA1)細胞、HeLa-229細胞、Sf21細胞 NCI-H1581細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS1728細胞、NCI-SNU-C2A細胞、GBC-SD細胞 MDA-134細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CV1細胞、OACP4C細胞、LLC細胞 H-1092細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 863.T細胞、MCF 10A細胞、H-1238細胞 SCLC21H細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCM-1A細胞、Balb/c3T3細胞、MDA-MB-231 #4175細胞 TALL 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-12F細胞、SW837細胞、MPC-5細胞 BRL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293細胞、LAD 2細胞、Hs 445細胞 Hs 294T epithelioid cells人黑色素瘤細胞系 CCD-33Co細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMC細胞、SKNEP-1細胞、SBC3細胞 U20-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-12F細胞、OPM-2細胞、HuT-102細胞 Hs 636.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFO-27細胞、HCC1428細胞、PAa細胞 RD細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB231細胞、Hs281T細胞、KYSE0410細胞 BEL 7405細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H128細胞、D-341細胞、IOSE80UBC細胞 HNE2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKN-AS細胞、Panc-05.04細胞、HPAEC細胞 HNE2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKN-AS細胞、Panc-05.04細胞、HPAEC細胞 ACHN細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCV 29細胞、BrCL18細胞、MDA-MB-468細胞 EBNA293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-I細胞、OV-1063細胞、MiaPaCa2細胞 Walker-256細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR4-IP細胞、HCC0366細胞、HEL-92_1_7細胞 B-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMMC7721細胞、NCI-HUT-460細胞、LSC-1細胞 KMB-17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE354T細胞、IOSE-80細胞、Med 283細胞 NKM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZYM-SVEC01細胞、SCL-1細胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細胞 TK10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KY70細胞、SK HEP-1細胞、NCI-H1651細胞 University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1376.T細胞、OVCAR 433細胞、PANC 1005細胞 Cates 1B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KP2細胞、67NR細胞、A549細胞 SCC 25細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1650細胞、hESC細胞、PAN 02細胞 EB-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1783細胞、SK-NM-C細胞、Y3-Ag 1.2.3細胞 SL-29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB39細胞、LED-WiDr細胞、E0771細胞 IGROV細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT8細胞、NFHIOSE-80細胞、PA-1細胞 MEL-526細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tj-905細胞、HEK 293-H細胞、WILL2細胞 McARH7777細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIADR.RES細胞、MRCV細胞、MASMC細胞 UWB1289細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A 2780 CP細胞、Panc_05_04細胞、NCIH2081細胞 SW 1783細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL7404細胞、P-388細胞、LTPA細胞 FRhK4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH508細胞、CCLP-1細胞、Tn 5B1-4細胞 CALU 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM00637I細胞、NCI H226細胞、Hs 695.T細胞 NCIH1341細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L5178-R細胞、WRL68細胞、HCC-827細胞 SPCA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-688A-T細胞、BC-020細胞、CAL62細胞 NT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CATH.a細胞、CT 26細胞、3T3-L1細胞 QGP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB 3T3 clone A31細胞、HSC-1細胞、JB6 Cl 30細胞 MNNG-HOS (TE 85, clone F-5)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHP-77細胞、JF305細胞、SKMEL28細胞 KM12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Farage Original Line細胞、NCI-H165細胞、SW-839細胞 CCD-841-CoTr細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MEF (CF-1)細胞、LS513細胞、HCoEpiC細胞 RMS1598細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1355細胞、T2細胞、Ramos 1細胞 HLF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-T6細胞、NCI-H774細胞、SW-1222細胞 CLONE M3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag 8.653細胞、A3細胞、HPAF-II細胞 159 PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T2細胞、H526細胞、HCC1937細胞 MC57G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR8svn細胞、MIA Paca2細胞、HT144細胞 MC57G細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR8svn細胞、MIA Paca2細胞、HT144細胞 SK LU 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EMT6細胞、LA-N-6(OAN)細胞、NCIH1836細胞 KM12-SM細胞系相關(guān)產(chǎn)品:143B TK-細胞、Potorous tridactylus Kidney 2細胞、HLFa細胞 COR-L279細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS1細胞、Caov-4細胞、HCC0015細胞 OSC-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE2_C細胞、MDA 1386細胞、CL 1-0細胞 H1993細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Calu-1細胞、U20-S細胞、Centre Antoine Lacassagne-39細胞 SW962細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375.S2細胞、HTR-8/SVneo細胞、3T6-Swiss albino細胞 Neukoplast細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HKF細胞、Laboratory of Allergic Diseases 2細胞、TOV21G細胞 CL1-0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞、NCIADR.RES細胞、PK(15)細胞 COLO678細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30 OHK細胞、PANC403細胞、H9細胞 H647ell細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SMMC-7721細胞、C3H10T1/2細胞、OCIAML4細胞 WIL2 S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSKM-1細胞、SW-1222細胞、HCC-2218細胞 Jurkat E6.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1869細胞、H2291細胞、NCI522細胞 Hs 294T epithelioid cells人黑色素瘤細胞系 MPASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc_03_27細胞、H-1672細胞、T-HSC細胞 COLO680N細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HSF-1細胞、FK81細胞、L5178Y-R細胞 KTC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMM39細胞、Balb/3T3-4-Cl31細胞、HuH-6細胞 BC-023細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL5細胞、Ramos (RA)細胞、PC2細胞 "
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