"A375-SM epithelioid cells人惡性黑色素瘤細胞系
細胞背景資料：黑色素瘤；女性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
貼壁消化難題：１，先用PBS 把細胞洗兩遍，使瓶內(nèi)沒有血清了，減少對胰酶的中和，然后用新配的０.２５%的胰酶加入３ml左右，放在３７度，然后可以在細胞有些消化下來時，拿著瓶口，運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體，這樣細胞很快就下來了，還不需要吹打，分散也均勻；２，成團、絮狀：消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象，血清可以終止胰酶的作用，如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉，也可以不倒，直接加血清終止，如果消化液中加入了edta的話，就要將消化液倒干凈，如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話，一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強，用０.５%胰酶(含０.１%EDTA)一般要消化１２~１５min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基，加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢)，隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗，則不能棄去胰酶)，加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代，否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片)；消化過度：馬上用培養(yǎng)基中和，用吸管吹打細胞，收集全部的細胞到以無菌的離心管中８００RPM ３分鐘。棄上清，用全培重懸，換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)，狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落，在換液的時候可以清除掉！
C3H10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1573細胞、PCI-04B細胞、HCEpiC細胞
P1-Raji細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC-10RGB細胞、MG-HU-3細胞、OCI-AML-5細胞
WC00044細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK 293 EBNA細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞、MDA-175細胞
細胞生長：貼壁
A375-SM epithelioid cells人惡性黑色素瘤細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代的一般方法：開始細胞傳代前，仔細檢查細胞傳代所需的儀器和試劑是否齊全：一般主要有：細胞(單層細胞，鏡檢適合)、培養(yǎng)液(MEM-０.２%LH培養(yǎng)液或MEM培養(yǎng)液或１９９等適合細胞有要求的培養(yǎng)液)、滅活小牛血清、慶大霉素溶液（１萬單位）、７.５％NaHC０３溶液、０.２５％胰蛋白酶、PBS洗液。用具：小方瓶(１００m１)、克氏瓶、膠塞、吸管(１０ml、１m１）、細胞吹打管（２０ml）(以上用具需經(jīng)１２１℃至少１５分鐘高壓滅菌)、C０２ 孵箱、超凈臺、倒置顯微鏡、４℃、-２０℃冰箱；操作步驟：鏡檢細胞，挑選生長狀態(tài)良好，細胞界限清晰，具有立體感，形態(tài)好無污染、無異常及可疑病變細胞。配制細胞培養(yǎng)液：按以下配比配制MEM-０.２%LH培養(yǎng)液１００ml內(nèi)，加入滅活小牛血清１０m１，慶大霉素溶液０.３m１，７.５%碳酸鈉溶液３ml。（僅供一般參考）。消化細胞；先用PBS洗液沖洗細胞表面１-２次，每次１０m１，棄去洗液，向細胞瓶內(nèi)加入０.２５％胰蛋白酶溶液，每瓶１m１，細胞瓶平放，使消化液完全覆蓋細胞表面。至細胞完全脫落到胰酶中。每瓶加入１０m１細胞培養(yǎng)液吹打分散細胞，按所需的傳代比例分裝于小方瓶(１００m１)中，再加入１０m１細胞培養(yǎng)液重復(fù)吹打一次后分裝，然后補加至所需培養(yǎng)量。加塞，置于３７±１℃孵箱培養(yǎng)。約２～４天成片。(由細胞接種濃度決定)；填寫傳代記錄。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
RBL.2H3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT20細胞、HCC 70細胞、GM346細胞
MNNG/HOS Cl #5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Chinese Hamster Lung細胞、CHP-212細胞、Hs 895 T細胞
SHEP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC-39細胞、Panc-08.13細胞、Hs940T細胞
HEL299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKOV3細胞、SK.OV.3細胞、TGBC11T細胞
COLO 205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4-II-E細胞、SUM 102PT細胞、COLO_320DM細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
A375-SM epithelioid cells人惡性黑色素瘤細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞接收后的操作流程與注意事項：１)如果細胞為貼壁細胞，而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài)，請將懸浮的細胞即時離心，加１５%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)３天；同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為１５%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)３天。３天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡，請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決；２)貼壁細胞生長緩慢；適當提高血清濃度(最高不能超過２０%)，或可根據(jù)該細胞生長密度，考慮胰酶消化后，轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng)；３)生長不均：貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均，成島狀生長，可將細胞進行消化，重懸打散細胞，加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。
Bovine ENDometrial cells細胞系相關(guān)產(chǎn)品：N9細胞、MDA-MB-134-VI細胞、CF Pac1細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YH-13細胞、SLK細胞、NCIH1869細胞
OSA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHIN3細胞、SUDHL-4細胞、OCI-Ly07細胞
HP615細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Panc 8.13細胞、HPASMC細胞、PIG1細胞
EHEB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE-270細胞、SK-N-DZ細胞、Rh30細胞
SW-756細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CD-18細胞、H250細胞、PTK2細胞
IALM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DMS273細胞、COS7細胞、C28/I2細胞
SNU182細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U266細胞、CC-LP-1細胞、hTERT-RPE1細胞
NMCG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00215細胞、TE-32細胞、CAL 62細胞
Jurkat細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt-K1細胞、ACC2細胞、mRMEC細胞
A375-SM epithelioid cells人惡性黑色素瘤細胞系
SW982細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞、HEI-193細胞、HS 1.Tes細胞
B16-F0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs737T細胞、AK細胞、HOEC細胞
H2405細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALL-1細胞、C3H/10T1/2 CL8細胞、P3 NS1 Ag4細胞
HUCCT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-343-T細胞、MT-3 [Human leukocytes]細胞、Bx-PC3細胞
MD Anderson-Metastatic Breast-415細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM17219細胞、UACC-812細胞、D-324 Med細胞
HSAEC1-KT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-403細胞、Duke University 4475細胞、H-1623細胞
HSAEC1-KT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-403細胞、Duke University 4475細胞、H-1623細胞
AR4IP細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D341 Med細胞、IEC 6細胞、SUDHL-16細胞
EAHY-926細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCCPAN2細胞、RMS13細胞、RKOAS451細胞
ESC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y-79細胞、HS-294T細胞、HCe-8693細胞
CEMC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DK-MG細胞、H9c2 (2-1)細胞、MDCK.2細胞
NS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-889細胞、OVCAR-5細胞、AN3細胞
CTLA4Ig-24細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293-H細胞、NCTC-929細胞、A2008細胞
INS-1E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AA-Mel細胞、Ramos (RA)細胞、PL-45細胞
DK-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-12T細胞、NRCC細胞、OCI-LY-18細胞
IM95細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL279細胞、Nakata-1細胞、Panc_04_03細胞
HNE2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKN-AS細胞、Panc-05.04細胞、HPAEC細胞
RT4-D6-P2T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAKI.1細胞、H-2196細胞、AR-42J細胞
Hs 688(A).T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCC25細胞、E.G7-OVA細胞、SK LU 1細胞
VERO C 1008細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMCD3細胞、FDCP-1細胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細胞
hEEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pa017C細胞、A-2780細胞、MM.1S細胞
NBL-S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CZ-1細胞、H-1395細胞、U-373MG ATCC細胞
C32 [Human melanoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：T/GHA-VSMC細胞、WC00097細胞、SCC-15細胞
D-283 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KALS1細胞、HCC1954 BL細胞、RA-FLSs細胞
HT144-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA MB 436細胞、C6細胞、IHH細胞
NCIH2196細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT/Taxo1細胞、CAOV4細胞、RKO_AS45細胞
YT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC細胞、HCEpiC細胞、SKNMC細胞
NCI-H295R細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-8細胞、MIA-PaCa-2細胞、NCI-H1954細胞
COLO-699細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LI7細胞、CMT-64細胞、BSC-1細胞
WC00079細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549ATCC細胞、MKN74細胞、D 407細胞
SUM52細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC-12細胞、NCIH2081細胞、NCI-H524細胞
H-1048細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3-442A細胞、C 6細胞、OC316細胞
WBF344細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1428細胞、TF-1細胞、WRL 68細胞
Walker/LLC-WRC 256細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05384細胞、Panc8.13細胞、HCT 8細胞
HEK293-H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKNMC細胞、OCI AML4細胞、U87MG細胞
Panc 02.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞、VK2/E6E7細胞、CCD-841CoN細胞
BE2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H.Ep.-2細胞、DLD1細胞、LA4細胞
MDA-MB-361細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LICR-LON-HN6細胞、FU-MMT-1細胞、Walker256-TC細胞
MCA-205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293 c18細胞、NCI-SNU-1040細胞、Nb2a細胞
HCC9724細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BIU87細胞、MRAEC細胞、T-47D細胞
VERO76細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AN3CA細胞、SCC090細胞、CAKI.1細胞
Huh-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCM細胞、EAhy926細胞、MDAMB435S細胞
LCLC-103H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mouse Forestomach Carcinoma細胞、RPMI 7666細胞、PA-TU-8988S細胞
LTEP-a2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：S37細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-1細胞、WRL68細胞
RPMI No. 1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2081細胞、MDA-MB-231 #4175細胞、SK-OV-3細胞
HSC-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC3M-2B4細胞、OVCAR.8細胞、Ca Ski細胞
UM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Pt K1 (NBL-3)細胞、MDA-MB-435S細胞、Molm 14細胞
MES-23.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3J.HR1K細胞、TMD-8細胞、RT4細胞
HUT 226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-2185細胞、HCoEpiC細胞、CMT 167細胞
L cell細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C38細胞、CHO-K1細胞、Hep-G2細胞
HR8348細胞系相關(guān)產(chǎn)品：DHL10細胞、LS174T細胞、DMS153細胞
A375-SM epithelioid cells人惡性黑色素瘤細胞系
SJSA1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L2細胞、CL34細胞、SHG44細胞
Tb1.Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CPA47細胞、MLMEC細胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細胞
V-79-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HBZY 1細胞、HDLM2細胞、FRO細胞
OSA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SHIN3細胞、SKRC-42細胞、TT細胞
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關(guān)鍵字： A375-SM epithelioid cells人惡性黑色素瘤細胞系
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