"Mel-RM epithelioid cells人黑色素瘤細胞系
細胞背景資料：黑色素瘤；神經(jīng)節(jié)轉(zhuǎn)移；男性
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標準流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
3T3F442A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Microbiological Associates-104細胞、JB-6 Cl 30細胞、NWA細胞
LL/2(LLc1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL/IU細胞、MDA-MB-361細胞、SW 1463細胞
HR1K細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JB6 Cl 30-7b細胞、TM-4細胞、IB-RS2細胞
細胞生長：貼壁
Mel-RM epithelioid cells人黑色素瘤細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享：支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物，大小一般在０.３-０.５um之間，呈高度多形性，有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞，也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色，用姬姆薩染色很淺，革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長，營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到６３%，支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達，又不能通過可視法對其進行檢測，而且它對細胞的生長率影響較小，不易引起注意。國內(nèi)外研究表明，９５%以上是以下四種支原體：口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii)，為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群，但能夠污染細胞的支原體種類是很多的，國外調(diào)查證明，大約有二十多種支原體能污染細胞，有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染：控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作；細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌；在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后，特別是重要的細胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁，一般來講，對作用于細胞壁生物合成的抗生素，如萬古霉素等完全不敏感；對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用，所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
2PK-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OC-3-VGH細胞、MLA 144細胞、A 2780 CP細胞
Hs-578T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MV411細胞、SGC-996細胞、H-2126細胞
3T3 Swiss Albino細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVTOKO細胞、BNL CL2細胞、CCK81細胞
Rca-B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GT39細胞、MDA-MB 231細胞、NCI-H1792細胞
VM-CUB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC4細胞、MSCs（mUCMSCs）細胞、SW-948細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
Mel-RM epithelioid cells人黑色素瘤細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
GM00346B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ReNcell CX細胞、RCC10 RGB細胞、TR-146細胞
Eca 109細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO8910/PM細胞、PC 12細胞、SNU869細胞
N1S1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTera2 cl.D1細胞、373MG細胞、RCF細胞
Mino細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EoL-1-cell細胞、LM6細胞、RPMI.8226細胞
KU-812細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC14細胞、2008細胞、NKT細胞
OVCAR-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IAR20細胞、NK-92MI細胞、Hs 895.T細胞
H2452細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BrCL12細胞、PTK2細胞、EB2細胞
NGEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Duke University 145細胞、TCam-2細胞、SF-763細胞
T2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-38細胞、Mel-624細胞、Hs-695-T細胞
MES13細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FTC-133細胞、COLO201細胞、A-2780細胞
Mel-RM epithelioid cells人黑色素瘤細胞系
PL 45細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RK 13細胞、HC-11細胞、Human Embryo Lung-1細胞
293F細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH1876細胞、T_T_細胞、MV4;11細胞
C-643細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AD293細胞、RA.1細胞、Granta519細胞
LM8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECV 304細胞、PK-13細胞、Centre Antoine Lacassagne-62細胞
HLEC-B3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT 16細胞、BN-CL2細胞、MTEC1細胞
SKCol1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AtT 20細胞、NCIH250細胞、OVCAR-8/ADR細胞
SKCol1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AtT 20細胞、NCIH250細胞、OVCAR-8/ADR細胞
COLO680N細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCC-HSF-1細胞、SNU182細胞、LS411N細胞
T/GHA-VSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC-7901細胞、NCIH441細胞、KOSC2細胞
Y3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCCLM3細胞、DiFi細胞、DHL8細胞
Jijoye細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D283細胞、SRA 01/04細胞、Mo 59J細胞
Dakiki細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS411N細胞、DU 145細胞、U031細胞
SK-MEL5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HemECs細胞、HUT-28細胞、SW 403細胞
NCIH2171細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-148細胞、NCI-H2073細胞、LICR-LON-HN6細胞
Jijoye細胞系相關(guān)產(chǎn)品：D283細胞、SRA 01/04細胞、Mo 59J細胞
WiDr-TC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Los Angeles Prostate Cancer-4細胞、SUM-190PT細胞、WIL2 Secreting細胞
Mink細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ROS 17/28細胞、SUIT2細胞、Human Microglia Clone 3細胞
CEK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEAS 2B細胞、HS 445T細胞、Calu-1細胞
HIT-T15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMA560細胞、H747細胞、SNU886細胞
HIT-T15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SMA560細胞、H747細胞、SNU886細胞
WSU-DLCL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL-95-2細胞、MIO-M1細胞、CEM/C1細胞
DoTc2 4510細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO201細胞、SACC-83細胞、T-47-D細胞
SW.620細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM-215細胞、MCCAR細胞、SK-NMC細胞
MUGCHOR1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：no.11細胞、HCCC-9810細胞、WIL2S細胞
Hs 683.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TPC1細胞、RPTC細胞、HS5細胞
Y 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MESSA/Dx5細胞、U-251-MG細胞、P3J HR-1細胞
SNU-719細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HcerEpic細胞、P36細胞、Sp2/0-Ag14細胞
NBL-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PT-K75細胞、GM-637細胞、WI 38細胞
AZ521細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T6 Swiss Albino細胞、X63Ag8-653細胞、Uhth-74細胞
HTh-74細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mel-MeWo細胞、HSC-I細胞、YD-15細胞
UO-31細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Kidney-2細胞、PC2細胞、MC-3T3細胞
MG-HU-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-32細胞、CCD-1112sk細胞、LTEPa2細胞
MDA-MB-175VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2108細胞、SF767細胞、BNL-HCC細胞
EL4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCK.2細胞、SK-MEL3細胞、SV40-HCEC細胞
A549 ATCC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ECC1細胞、NCI-H2023細胞、NCIH2122細胞
BIU-87細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT 28細胞、COLO320DM細胞、MDA-MB-468-RED細胞
P3 NS1 Ag4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 706.T細胞、National Medical Center-Glioma 1細胞、RCC-10細胞
C-33-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PVEC細胞、293c18細胞、NCI-H2107細胞
Hep-G2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Emory University-2細胞、FK81細胞、CCC-HSF-1細胞
UMR106細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TGW-nu細胞、Panc203細胞、Mouse INsulinoma 6細胞
HEI-193細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNSC細胞、NIH:OVCAR-5細胞、NCI-H1819細胞
JJN-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOC1細胞、CW2細胞、UMUC14細胞
Neuro 2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A10細胞、HCC-95細胞、OLN 93細胞
Sol8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RAW2647細胞、Oregon J-111細胞、U-118MG細胞
HD11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05887細胞、RPMI-6666細胞、SKNDZ細胞
HCC-70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Swiss/3T3細胞、HBL100細胞、C8D1A細胞
OC-3-VGH細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUDHL-6細胞、PJ34細胞、SUD-4細胞
RPMI 8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC1細胞、A204細胞、Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細胞
PNEC30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly7細胞、FHC細胞、BCPAP細胞
Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GTL16細胞、T47-D細胞、MDA-468細胞
MZ-CRC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2030細胞、KM933細胞、SUM 102細胞
Mel-RM epithelioid cells人黑色素瘤細胞系
GM00346細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3細胞、BT474細胞、HFL-1細胞
HLEB3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：McA-RH 7777細胞、TE-12細胞、AMC-HN-8細胞
GM2132細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 841 CoTr細胞、Sf21細胞、NOZAWA細胞
N1S1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTera2 cl.D1細胞、CEMC7細胞、OV2008細胞
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