"SK-MEL-2 epithelioid cells人惡性黑色素瘤細胞系 細胞背景資料:詳見相關文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進行傳代。 NCIH2066細胞系相關產(chǎn)品:CAL-62細胞、hTERT-HME-1細胞、SUDHL10細胞 9L細胞系相關產(chǎn)品:ZYM-DIEC02細胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞、HCC1008細胞 343 MG細胞系相關產(chǎn)品:SUD6細胞、alpha-TC1.6細胞、H-747細胞 細胞生長:貼壁 SK-MEL-2 epithelioid cells人惡性黑色素瘤細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞的凍存:為避免污染造成的損失,最小化連續(xù)細胞系的遺傳改變和避免有限細胞系的老化和轉(zhuǎn)化,需要凍存哺乳細胞。凍存細胞前,細胞應該特性化并檢查是否污染。有幾種普通培養(yǎng)基用來凍存細胞。對于包含有血清的培養(yǎng)基,成分可能如下:包含10%甘油的完全培養(yǎng)基;包含10%二甲基亞砜(DMSO)的完全培養(yǎng)基;50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%甘油的新鮮培養(yǎng)基或50%細胞條件培養(yǎng)基和50%含有10%二甲基亞砜的新鮮培養(yǎng)基。對于無血清培養(yǎng)基,一些普通的培養(yǎng)基成分可能是:50%細胞條件無血清培養(yǎng)基和50%包含有7.5%二甲基亞砜的新鮮的無血清培養(yǎng)基或包含有7.5%二甲基亞砜和10%細胞培養(yǎng)級BSA的新鮮無血清培養(yǎng)基。懸浮細胞凍存:計數(shù)將要凍存的活細胞。細胞應該處于對數(shù)生長期。以大約200~400g離心5分鐘沉淀細胞,使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以1×10(7)到5×10(7)細胞/ml密度,在包含有血清的冷凍培養(yǎng)基中再次懸浮細胞,或者以0.5×10(7)到1×10(7)在無血清培養(yǎng)基中,再次懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。貼壁細胞凍存:使用分離試劑從基層分離細胞,分離時盡可能溫和,使對細胞的損傷減少到最小。在完全生長培養(yǎng)基中,再次懸浮分離細胞,確定有活力細胞數(shù)。以大約200g離心5分鐘沉淀細胞。使用移液管移去上清到最小體積,不要攪亂細胞。以5×10(6)到1×10(6)細胞/ml密度,在凍存液中懸浮細胞。分裝進凍存管,將凍存管置于濕的冰上或放入4℃冰箱中,5分鐘內(nèi)開始冷凍步驟。細胞以1℃/分鐘進行冷凍,可以通過可編程序的冷凍器進行或者把隔離盒中的凍存管放到-70℃到-90℃的冰箱中,然后轉(zhuǎn)移到液氮中貯存。 細胞傳代方法:1:3-1:6傳代,2-3天換液1次。 K422細胞系相關產(chǎn)品:N2a細胞、DHL-8細胞、Chang Cells細胞 H1623細胞系相關產(chǎn)品:OCILY7細胞、HO-8910PM細胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞 L-WRN細胞系相關產(chǎn)品:LC-1細胞、NCIH1836細胞、CW-2細胞 C 643細胞系相關產(chǎn)品:NPC-TW 01細胞、HTh74細胞、MDA-453細胞 OVCAR5細胞系相關產(chǎn)品:SK-NSH細胞、C3H10T1/2 clone8細胞、H524細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 SK-MEL-2 epithelioid cells人惡性黑色素瘤細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:多邊形的 細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 HRA19細胞系相關產(chǎn)品:UMNSAH-DF1細胞、SW-1463細胞、IGROV1細胞 GA-10細胞系相關產(chǎn)品:NIH3T3-L1細胞、HIEC-6細胞、K1細胞 MAEC細胞系相關產(chǎn)品:NCIH820細胞、TF1細胞、RBL細胞 Mouse podocyte細胞系相關產(chǎn)品:PANC 813細胞、MEC-1細胞、L5178Y-R細胞 HCEpiC細胞系相關產(chǎn)品:C2BBe1細胞、Meat Animal Research Center-145細胞、RFL-6細胞 SCL-1細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB-175-VII細胞、SO-RB50細胞、NCI-H1581細胞 RH8994細胞系相關產(chǎn)品:SVGp12細胞、Opossum Kidney細胞、NCI-H3255細胞 HPDE細胞系相關產(chǎn)品:PC2細胞、CTSC-3細胞、P3X63 AG 8.653細胞 RIN-14B細胞系相關產(chǎn)品:Uhth-74細胞、TE11細胞、TE10細胞 C4-1細胞系相關產(chǎn)品:IOSE80UBC細胞、HeLa S 3細胞、COR-L88細胞 SK-MEL-2 epithelioid cells人惡性黑色素瘤細胞系 JB-6 Cl 30細胞系相關產(chǎn)品:U-343 MG細胞、EC-109細胞、V79細胞 CMT 93細胞系相關產(chǎn)品:FaDu細胞、Hs445細胞、P3/NS-1細胞 MDAMB157細胞系相關產(chǎn)品:MRC-V細胞、H-596細胞、no-11細胞 HARAB細胞系相關產(chǎn)品:EA. hy 926細胞、Jurkat FHCRC細胞、FUOV1細胞 Dami細胞系相關產(chǎn)品:H-1954細胞、SK-NMC細胞、U-138MG細胞 C1498細胞系相關產(chǎn)品:EB-3細胞、BJA-B1細胞、Mono Mac 1細胞 HN 4細胞系相關產(chǎn)品:NTERA2細胞、EFM-192A細胞、NCI-H1915細胞 Microbiological Associates-104細胞系相關產(chǎn)品:HR1K細胞、KG-1a細胞、LN 382細胞 SUM-190細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H1355細胞、FL62891細胞、Oka-C1細胞 Caco-2BBe細胞系相關產(chǎn)品:SW 954細胞、SCC-9細胞、NCI-H2141細胞 HT-3細胞系相關產(chǎn)品:TE353.SK細胞、SK-N-BE2細胞、WM-239細胞 Hs-746T細胞系相關產(chǎn)品:NOZAWA細胞、CCRF/CEM-C7細胞、EAhy926細胞 Hs888 Lu細胞系相關產(chǎn)品:NE-4C細胞、NTERA-2 cl.D1細胞、Ca9-22細胞 MonoMac 6細胞系相關產(chǎn)品:MDA-MB-231-luc細胞、LA795細胞、AMC-HN-8細胞 COLO 679細胞系相關產(chǎn)品:CAOV4細胞、BHK 21細胞、NCIH2066細胞 TR-146細胞系相關產(chǎn)品:MDA-231細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-3細胞、CHO細胞 H-2347細胞系相關產(chǎn)品:Anglne細胞、WM-239細胞、TCC Sup細胞 Hs 766細胞系相關產(chǎn)品:SUM52PE細胞、A172細胞、HF-91細胞 NCIH1385細胞系相關產(chǎn)品:P 815細胞、NCI H345細胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞 NCIH1385細胞系相關產(chǎn)品:P 815細胞、NCI H345細胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細胞 KP-N-RT細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1563細胞、Ca-Ski細胞、HG2855細胞 CCRF/CEM/0細胞系相關產(chǎn)品:H9c2(2-1)細胞、HCC-1419細胞、H661細胞 Hs343T細胞系相關產(chǎn)品:Colon 26細胞、HPDLF細胞、FAO-1細胞 HT clone H9細胞系相關產(chǎn)品:AsPC-1細胞、KU-19-19細胞、NCI-H2081細胞 S.B.細胞系相關產(chǎn)品:BEL7402細胞、HEK-293-EBNA細胞、DU 145細胞 BNL-CL.2細胞系相關產(chǎn)品:NW-MEL-38細胞、HSF細胞、P31-FUJ細胞 VAESBJ細胞系相關產(chǎn)品:ELD-1細胞、NCI-H322T細胞、MyLa2059細胞 SNU-475細胞系相關產(chǎn)品:SuDHL 10細胞、TF-1a細胞、SuDHL 10細胞 LNCaP FGC細胞系相關產(chǎn)品:H446細胞、SMC-1細胞、H1092細胞 PA12細胞系相關產(chǎn)品:R-1059-D細胞、Tadarida brasiliensis 1 lung細胞、EMT-6細胞 OCIAML4細胞系相關產(chǎn)品:NG10815細胞、A2780/Taxol細胞、3T3 clone A31細胞 Mel-RM細胞系相關產(chǎn)品:MDAMB436細胞、DR2R1610細胞、SCC 4細胞 SGC 7901細胞系相關產(chǎn)品:U-2932細胞、UK Pan-1細胞、P30/0HK細胞 Fortner's melanotic melanoma #3細胞系相關產(chǎn)品:C4I細胞、AR4-IP細胞、NCI-H2347細胞 SKNMC細胞系相關產(chǎn)品:KU812-F細胞、BC-028細胞、CAL 39細胞 HCC-1500細胞系相關產(chǎn)品:SKMES1細胞、Nb-2細胞、SW-1783細胞 SKMEL1細胞系相關產(chǎn)品:HL-60 Clone 15細胞、HCC1954BL細胞、CHO-Lec1細胞 ECC 10細胞系相關產(chǎn)品:LC1-Sq細胞、HCC-2218細胞、HEEpiC細胞 TE354T細胞系相關產(chǎn)品:A2008細胞、RPMI6666細胞、PANC 813細胞 B16/BL6細胞系相關產(chǎn)品:ketr 3細胞、Huh-7.5細胞、RWPE2細胞 EU-2細胞系相關產(chǎn)品:TE-11細胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細胞、NCI-H1404細胞 HCT GEO細胞系相關產(chǎn)品:ISHI細胞、Rainbow Trout Embryo細胞、T_T_細胞 MES-SA/Dx-5細胞系相關產(chǎn)品:RS1細胞、HEK 293T/17細胞、HSCT6細胞 SkMel31細胞系相關產(chǎn)品:CWR22R-V1細胞、LS-174細胞、32D:cl3細胞 CHP-126細胞系相關產(chǎn)品:OKT 3細胞、CCC-HIE-2細胞、HOC1細胞 BT 325細胞系相關產(chǎn)品:BCaP-37細胞、KNS-62細胞、DU-4475細胞 WPE-int細胞系相關產(chǎn)品:HCC-2108細胞、DMS-53細胞、BIC細胞 NCI-H1437細胞系相關產(chǎn)品:H2141細胞、MV 3細胞、KBM-7/Hap8細胞 H9c2 (2-1)細胞系相關產(chǎn)品:HT clone H9細胞、SKRC-52細胞、LIPF155C細胞 EA. hy 926細胞系相關產(chǎn)品:SUM190PT細胞、THLE-2細胞、AU 565細胞 P3X63-Ag8.653細胞系相關產(chǎn)品:8226/S細胞、PC14細胞、OV3121細胞 SK-MEL-2 epithelioid cells人惡性黑色素瘤細胞系 Hopkins-92細胞系相關產(chǎn)品:SKBr3細胞、H1650細胞、Panc 4.03細胞 ASH3細胞系相關產(chǎn)品:University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞、D6P2T細胞、COR-L23細胞 ssMCF7細胞系相關產(chǎn)品:Mc Coy細胞、CV-1 in Origin Simian-7細胞、Leghorn Male Hepatoma cell line細胞 MAEC細胞系相關產(chǎn)品:NCIH820細胞、SUM190細胞、KRC/Y細胞 "
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