"L-132 epithelioid cells人胚胎肺上皮細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料:胚肺;女性
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
正確的細(xì)胞復(fù)蘇需知事項(xiàng):細(xì)胞凍存好了,接下來(lái)要注意什么問(wèn)題呢?沒(méi)錯(cuò),就是記得到時(shí)間了,拿出來(lái)復(fù)蘇。那么,細(xì)胞復(fù)蘇的過(guò)程中又有哪些該注意的事項(xiàng)呢?細(xì)胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬(wàn)不要使用不健康的細(xì)胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細(xì)胞的固有形態(tài)和生長(zhǎng)行為。凍存細(xì)胞:補(bǔ)充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細(xì)胞的前一天補(bǔ)充新的培養(yǎng)液。在細(xì)胞長(zhǎng)至70%單層時(shí)收獲細(xì)胞,計(jì)數(shù)活細(xì)胞數(shù),用凍存液調(diào)整細(xì)胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細(xì)胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細(xì)胞并用凍存液重懸細(xì)胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細(xì)胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng),應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細(xì)胞在無(wú)血清培養(yǎng)基內(nèi)生長(zhǎng)24小時(shí))內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標(biāo)記好細(xì)胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每?jī)龃婀懿怀^(guò)1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒(méi)有足夠的空間記錄細(xì)胞的詳細(xì)信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個(gè)最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細(xì)胞,以免其中的一個(gè)液氮罐出現(xiàn)問(wèn)題!細(xì)胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點(diǎn):當(dāng)從液氮罐內(nèi)取出細(xì)胞時(shí),有可能會(huì)出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護(hù)面罩和防護(hù)服十分必要;其實(shí),細(xì)胞復(fù)蘇只是一個(gè)簡(jiǎn)單的實(shí)驗(yàn),不過(guò)這其中卻不可避免有一些需要注意的細(xì)節(jié),不然,也不一定會(huì)盡如人意。例如說(shuō),人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護(hù)目鏡;盡量降低DMSO對(duì)細(xì)胞的損傷等等。
CCC-HHM-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL40細(xì)胞、NCIH2171細(xì)胞、CCD19-Lu細(xì)胞
SNU119細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA1386細(xì)胞、MUTZ-3細(xì)胞、CL1-0細(xì)胞
Colon38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H125細(xì)胞、RC13細(xì)胞、JF305細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
L-132 epithelioid cells人胚胎肺上皮細(xì)胞系
細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞復(fù)蘇基本方法:1.從液氮罐中取出安剖;有時(shí)因安剖未封嚴(yán),浸入了液氮,取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應(yīng)帶有防護(hù)眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時(shí)搖動(dòng),盡快解凍。3.剪開紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺(tái)上打開蓋,用吸管吸出細(xì)胞懸液,裝入離心管中,再補(bǔ)加10ml培養(yǎng)液,吹打使細(xì)胞懸浮。4.低速離心(500~1000轉(zhuǎn)/分)5分鐘,取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。5.加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T25 flask細(xì)胞時(shí),處理方式為:在寄送過(guò)程中,為避免起泡造成細(xì)胞脫落死亡,T25 flask均加滿培養(yǎng)基。請(qǐng)檢查flask外觀,并于顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀況和有無(wú)污染現(xiàn)象,若有任何問(wèn)題,不要打開蓋子,請(qǐng)立即通知細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室。將原封之T25 flask靜置于37°C,5%CO2培養(yǎng)箱中,使細(xì)胞回溫至37°C,并讓運(yùn)送過(guò)程中少數(shù)脫落的細(xì)胞可再附著生長(zhǎng)。隔天后,于無(wú)菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml培養(yǎng)基于flask內(nèi),依一般培養(yǎng)方式再將細(xì)胞置入培養(yǎng)箱中,或細(xì)胞已長(zhǎng)滿盤,則將細(xì)胞做傳代培養(yǎng)。
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
HUT 125細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP a2細(xì)胞、TPC1細(xì)胞、SW260細(xì)胞
RA.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TT細(xì)胞、H-1092細(xì)胞、COLO 680N細(xì)胞
KMS18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS20-Y細(xì)胞、UCLA NPA-87-1細(xì)胞、JHH-7細(xì)胞
A431/P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2135細(xì)胞、MCF12F細(xì)胞、LMTK-細(xì)胞
H-1694細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL 92.1.7細(xì)胞、526-mel細(xì)胞、SKMEL-2細(xì)胞
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
L-132 epithelioid cells人胚胎肺上皮細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書
常見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)中一些問(wèn)題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個(gè)極為重要的營(yíng)養(yǎng)來(lái)源,所以血清的含量多少會(huì)對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)會(huì)產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過(guò)20%,因?yàn)楹窟^(guò)低會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞營(yíng)養(yǎng)不足,過(guò)高則會(huì)破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時(shí)須更換培養(yǎng)基?視細(xì)胞生長(zhǎng)密度而定,或遵照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時(shí)間,按時(shí)更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進(jìn)行更換;3)購(gòu)買的復(fù)蘇細(xì)胞,為何會(huì)有脫落?因?yàn)檫\(yùn)輸?shù)倪^(guò)程中不可避免的會(huì)有震蕩,收到后可以離心收集;4)購(gòu)買的細(xì)胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會(huì)發(fā)生細(xì)胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細(xì)胞之培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)細(xì)胞數(shù)目太少,大都是因?yàn)殡x心過(guò)程操作上的失誤,造成細(xì)胞的物理性損傷,以及細(xì)胞流失。建議細(xì)胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細(xì)胞生長(zhǎng)隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購(gòu)買的細(xì)胞死亡或細(xì)胞存活率不佳可能原因?研究人員在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)出現(xiàn)存活率不佳,常見(jiàn)原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯(cuò)誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯(cuò)誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過(guò)程錯(cuò)誤。冷凍細(xì)胞解凍后,加以洗滌細(xì)胞和離心。懸浮細(xì)胞誤認(rèn)為死細(xì)胞。培養(yǎng)溫度使用錯(cuò)誤。細(xì)胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí),均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。
PC-3M IE8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vertebral Cancer of the Prostate細(xì)胞、MRC-V細(xì)胞、AML-12細(xì)胞
HEL-299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EoL-1細(xì)胞、TE3A細(xì)胞、NCIH810細(xì)胞
Hca-F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARO81細(xì)胞、RASMCs細(xì)胞、SK Mel 2細(xì)胞
SW-954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HB 611細(xì)胞、KG1細(xì)胞、PC 12細(xì)胞
COLO320DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC-1spg細(xì)胞、HFF細(xì)胞、HEL 92.1.7細(xì)胞
MDCC MSB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MLA-144細(xì)胞、DoTc2-4510細(xì)胞、Porcine Kidney-13細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-12T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 134VI細(xì)胞、HOS細(xì)胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細(xì)胞
LADMAC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TO175T細(xì)胞、MRC 5細(xì)胞、FHCRC subclone 11細(xì)胞
UCLA-RO 81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-14細(xì)胞、HTori:3細(xì)胞、MDA.MB.231細(xì)胞
VK2/E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ESC細(xì)胞、H660細(xì)胞、C17細(xì)胞
L-132 epithelioid cells人胚胎肺上皮細(xì)胞系
CFPAC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PJ34細(xì)胞、143B TK-細(xì)胞、G-402細(xì)胞
Molm 14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-O7e細(xì)胞、HCO細(xì)胞、38C-13細(xì)胞
TB1 Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK_HEP1細(xì)胞、P3HR-1細(xì)胞、LA-N-1細(xì)胞
DR2R1610細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:253J細(xì)胞、50.B1細(xì)胞、Tregs細(xì)胞
Anip973細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WI-38細(xì)胞、COLO-320-DM細(xì)胞、MDCKII細(xì)胞
SW-954細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HB 611細(xì)胞、KG1細(xì)胞、PC 12細(xì)胞
SW620細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Granta 519細(xì)胞、MD Anderson-Metastatic Breast-436細(xì)胞、Vero-76細(xì)胞
WI-38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RD細(xì)胞、LMTK-細(xì)胞、OCI-AML3細(xì)胞
MRC 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE2-C細(xì)胞、PE CA PJ34細(xì)胞、RC-4B細(xì)胞
SCC 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JTC-39細(xì)胞、RSC96細(xì)胞、Z-138細(xì)胞
CTV-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3/NS1/Ag4-1細(xì)胞、T-98G細(xì)胞、FLS細(xì)胞
Mono Mac 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BHP-10細(xì)胞、KE 37細(xì)胞、Leukemia 1210細(xì)胞
Hepatoma-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI.H522細(xì)胞、Colo320細(xì)胞、B-104細(xì)胞
NTERA2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-4細(xì)胞、NK-92 MI細(xì)胞、SW 1353細(xì)胞
NCI-H660細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL5細(xì)胞、GM03573細(xì)胞、LS 1034細(xì)胞
SUM-102PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MZCRC1細(xì)胞、UWB1289細(xì)胞、D283細(xì)胞
Natural Killer-92細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BrCL15細(xì)胞、BEL7405細(xì)胞、H-865細(xì)胞
WEHI 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H292細(xì)胞、Hs27F細(xì)胞、Clone 15 HL-60細(xì)胞
32D clone3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A9細(xì)胞、4T1-A細(xì)胞、PANC-02-03細(xì)胞
B-cell with DC Morphology細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCL2細(xì)胞、Caco-2/ATCC細(xì)胞、CA46細(xì)胞
Kelly細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OSC19細(xì)胞、CHL-IU細(xì)胞、CCD-1095Sk細(xì)胞
2V6.11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-Sf21AE細(xì)胞、NCIH1299細(xì)胞、WC00044細(xì)胞
NEC8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB3 [Human Burkitt lymphoma]細(xì)胞、Rca-B細(xì)胞、KYSE410細(xì)胞
CAL 85-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Epithelioid Cell line No. 18細(xì)胞、HIBEpiC細(xì)胞、SCC-7細(xì)胞
MDA-415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUVEC細(xì)胞、Mouse INsulinoma 6細(xì)胞、C22 (Clara)細(xì)胞
HEC1-B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HConEpic細(xì)胞、HT 1376.T細(xì)胞、GDM-1細(xì)胞
MB231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN 45細(xì)胞、KNS-81細(xì)胞、NRK 49F細(xì)胞
SKMEL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tca-83細(xì)胞、SW1353細(xì)胞、GM04679細(xì)胞
SNU-354細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK RC 20細(xì)胞、Ketr-3細(xì)胞、NCTC-1469細(xì)胞
RTE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC-1細(xì)胞、UACC 893細(xì)胞、H-250細(xì)胞
NCI-H676細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKN-SH細(xì)胞、OCILY-3細(xì)胞、BC-027細(xì)胞
Mouse podocyte細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC 813細(xì)胞、MEC-1細(xì)胞、L5178Y-R細(xì)胞
Hepa1-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Dx5細(xì)胞、CATH-a細(xì)胞、SAS細(xì)胞
CATHa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMB17細(xì)胞、GM 637細(xì)胞、GM 637細(xì)胞
PC3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BMSC/hBMSCs細(xì)胞、KM12SM細(xì)胞、PNT-1A細(xì)胞
SNU251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS 513細(xì)胞、L-Wnt-3A細(xì)胞、AN3-CA細(xì)胞
MDCK (NBL-2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMS-26細(xì)胞、As-PC1細(xì)胞、NCI-H69C細(xì)胞
EVSAT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB49細(xì)胞、HCC0044細(xì)胞、PVEC細(xì)胞
X63Ag8-653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCMEC(BL12-H)細(xì)胞、HCCLM3細(xì)胞、GNM細(xì)胞
BHK21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC97細(xì)胞、H2135細(xì)胞、SU 86.86細(xì)胞
KBM5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMM-1細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細(xì)胞、NW38細(xì)胞
P3JHR-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SV40-MES13細(xì)胞、NCI-H920細(xì)胞、SKNBE細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MESSA細(xì)胞、IHC-ST1細(xì)胞、CEM-CCRF (CAMR)細(xì)胞
Bac1 2F5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63Ag8.653細(xì)胞、PanC1細(xì)胞、Hu-P-T4細(xì)胞
KM-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T8細(xì)胞、MZCRC1細(xì)胞、U-251 MG細(xì)胞
WSUDLCL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HPF-1細(xì)胞、TE 32細(xì)胞、LAN5細(xì)胞
H2330細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MeT-5A細(xì)胞、OEC19細(xì)胞、hTERTHME1細(xì)胞
Capan1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC-20細(xì)胞、UWB1-289細(xì)胞、HRMC細(xì)胞
Emory University-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ME 180細(xì)胞、MDA-MB-157細(xì)胞、HIT clone T15細(xì)胞
NCI-H209細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RA.1細(xì)胞、H1693細(xì)胞、KBM-7細(xì)胞
Chinese Hamster Ovary細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs934T細(xì)胞、SKBR-3細(xì)胞、MGC-803細(xì)胞
L-132 epithelioid cells人胚胎肺上皮細(xì)胞系
BNL.1ME A.7R.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H740細(xì)胞、NCI-SNU-C1細(xì)胞、3T3-Swiss albino細(xì)胞
B16-F10-BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR.4細(xì)胞、WB-F344細(xì)胞、ATC241細(xì)胞
SK-ES1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-5細(xì)胞、GM2132細(xì)胞、SU-DHL-5細(xì)胞
HCAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH522細(xì)胞、BALB 3T3 clone A31細(xì)胞、Wien133細(xì)胞
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