"MLE-12 epithelioid cells小鼠肺上皮細(xì)胞系
細(xì)胞背景資料：肺；上皮細(xì)胞；SV４０轉(zhuǎn)化；FVB/N
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng)：１.取細(xì)胞的過(guò)程中注意帶好防凍手套，護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要，細(xì)胞凍存管可能漏入液氮，解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問(wèn)題：凍存液的配置已是常識(shí)，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對(duì)細(xì)胞不是完全無(wú)毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會(huì)造成細(xì)胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。４.離心問(wèn)題：目前主要有兩種見(jiàn)解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)，第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè)，去除DMSO，去除死細(xì)胞，這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對(duì)一般人來(lái)說(shuō)，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間，轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少，細(xì)胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過(guò)了活細(xì)胞會(huì)受壓過(guò)大，死亡。此外在操作過(guò)程中容易污染，所以不推薦。另一種說(shuō)法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇，結(jié)果無(wú)異常。５.細(xì)胞貼壁少的問(wèn)題：教科書中說(shuō)明凍存細(xì)胞解凍時(shí)１ml細(xì)胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問(wèn)題：試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇１管細(xì)胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過(guò)多，細(xì)胞濃度過(guò)低，不利于細(xì)胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問(wèn)題：這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問(wèn)題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會(huì)比較大，就會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng)，從以前的資料來(lái)看，DMSO的濃度在小于０.５%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒(méi)有什么影響，還有一個(gè)說(shuō)法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無(wú)害濃度。
MDA-MB415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VMCUB-1細(xì)胞、CAL 85-1細(xì)胞、Y-1細(xì)胞
MHCC 97細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：LL2細(xì)胞、EL-4細(xì)胞、MDA-kb2細(xì)胞
NCI-H-128細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 8226/S細(xì)胞、NRK-49F細(xì)胞、C-127細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁
MLE-12 epithelioid cells小鼠肺上皮細(xì)胞系
細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源
細(xì)胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。如果一次無(wú)法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無(wú)菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時(shí)體積會(huì)增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無(wú)菌，不需再無(wú)菌過(guò)濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過(guò)濾，勿直接過(guò)濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無(wú)菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過(guò)程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會(huì)變得混濁，同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會(huì)因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會(huì)影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過(guò)濾。不建議用過(guò)濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因?yàn)闀?huì)阻塞過(guò)濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點(diǎn)”：通常經(jīng)過(guò)熱處理之血清，沈淀物的形成會(huì)顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點(diǎn)”，常會(huì)誤認(rèn)為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會(huì)使此沈淀物增多，更會(huì)誤認(rèn)為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測(cè)，又沒(méi)有污染。一般而言，此小黑點(diǎn)應(yīng)不會(huì)影響細(xì)胞之生長(zhǎng)，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號(hào)的血清。
細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
GCT0404細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HS766T細(xì)胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細(xì)胞、SL1細(xì)胞
TE353.SK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Calu-3細(xì)胞、P3/NSI/1-AG4-1細(xì)胞、BC-021細(xì)胞
SK-GT-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：6-10B細(xì)胞、H1963細(xì)胞、M2-10B4細(xì)胞
H2172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：alphaTC clone 6細(xì)胞、Med 341細(xì)胞、MKN74細(xì)胞
R1800[RA]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EFM-192A細(xì)胞、NCI H716細(xì)胞、NCI-SNU-398細(xì)胞
細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
MLE-12 epithelioid cells小鼠肺上皮細(xì)胞系
細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)特性：詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書
培養(yǎng)細(xì)胞真的不難，最關(guān)鍵幾點(diǎn)：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的，真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞；２)動(dòng)作要快，胰酶消化，換液什么，細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時(shí)間，所謂的細(xì)胞狀態(tài)差，很多時(shí)候是傳代的原因；３)有時(shí)間的話，需要細(xì)胞計(jì)數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線，不會(huì)臨時(shí)要處理，手足無(wú)措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時(shí)間，傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行，可以節(jié)省很多時(shí)間，也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn)；５)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人，避免相互干擾。每天對(duì)待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無(wú)菌操作，多噴噴酒精，要是對(duì)滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測(cè)；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤里的水也會(huì)很臟，勤換(滅菌水加進(jìn)去)；５)晚上離開的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外，超凈臺(tái)是用完就開；６)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。
MCF-7/ADR-RES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：PT67細(xì)胞、B16-F0細(xì)胞、MDAMB-231細(xì)胞
CAL851細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CPA 47細(xì)胞、SNU216細(xì)胞、hTERT-RPE-1細(xì)胞
MNNG-HOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-3細(xì)胞、GB1細(xì)胞、TMD-8細(xì)胞
Hep-3B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs445細(xì)胞、T24細(xì)胞、HOS/MNNG細(xì)胞
RGM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC_7860細(xì)胞、MDA436細(xì)胞、HCC-1143細(xì)胞
Eca-109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKMEL1細(xì)胞、F-36P細(xì)胞、HCMEC(BL12-H)細(xì)胞
SW900細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H510細(xì)胞、HCA7細(xì)胞、BxPC-3細(xì)胞
Rat-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KMS18細(xì)胞、Kit225-K6細(xì)胞、526細(xì)胞
D-341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHA細(xì)胞、COLO684細(xì)胞、BE2-M17細(xì)胞
H22-H8D8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CHL1細(xì)胞、NCI-H69C細(xì)胞、HS-294-T細(xì)胞
MLE-12 epithelioid cells小鼠肺上皮細(xì)胞系
COR-L88細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FLC-7細(xì)胞、JCA1細(xì)胞、H-1385細(xì)胞
SKRC-52細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：VA-ES-BJ細(xì)胞、Ly19細(xì)胞、Sci-1細(xì)胞
A-172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Mel 2細(xì)胞、HPAF-2細(xì)胞、KALS-1細(xì)胞
P30 OHK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly1細(xì)胞、M-1細(xì)胞、SK-MEL-31細(xì)胞
HA1800細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUSMC細(xì)胞、SUDHL-10細(xì)胞、K7M2-WT細(xì)胞
HCS2/8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUSM-1細(xì)胞、CHP126細(xì)胞、H-2227細(xì)胞
HCS2/8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SUSM-1細(xì)胞、CHP126細(xì)胞、H-2227細(xì)胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MeWo細(xì)胞、HCC-9724細(xì)胞、H-520細(xì)胞
H3255細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：RCC-4細(xì)胞、KP4細(xì)胞、KU-812F細(xì)胞
NCI-SNU-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-78細(xì)胞、MGSMC細(xì)胞、MH7A細(xì)胞
HECV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD 19Lu細(xì)胞、NCTC 3960細(xì)胞、PANC-28細(xì)胞
H1672細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIHA細(xì)胞、H-1437細(xì)胞、HS-695T細(xì)胞
Panc2_03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1836細(xì)胞、D 407細(xì)胞、UCLA SO M21細(xì)胞
Molm14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL78細(xì)胞、HCE-2 [50.B1]細(xì)胞、HS 445T細(xì)胞
H1581細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HSC-6細(xì)胞、L 132細(xì)胞、SPDC-CCL141細(xì)胞
Kit 225細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCC-IT細(xì)胞、MC3T3-L1細(xì)胞、NFHIOSE-29細(xì)胞
SNU-869細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：P 3 HR 1細(xì)胞、Uhth-74細(xì)胞、T-98細(xì)胞
C-28/I2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-32細(xì)胞、L-5178-Y-R細(xì)胞、BNCL-2細(xì)胞
P19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE140細(xì)胞、LN-18細(xì)胞、L 363細(xì)胞
L cells (TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Karpas 422細(xì)胞、H1882細(xì)胞、OV-CA 432細(xì)胞
BC-028細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：FHC細(xì)胞、H446細(xì)胞、IAR20細(xì)胞
L540細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-SA/Dx5細(xì)胞、P31 FUJ細(xì)胞、RS(4;11)細(xì)胞
HEK-293H細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC7901/DDP細(xì)胞、H1650_CO細(xì)胞、10T1/2細(xì)胞
N-87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：108CC15細(xì)胞、Hs 895 T細(xì)胞、KYSE 520細(xì)胞
A875細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU182細(xì)胞、U2932細(xì)胞、H820細(xì)胞
WC00079細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549ATCC細(xì)胞、MKN74細(xì)胞、D 407細(xì)胞
2E8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCT 8細(xì)胞、U-87細(xì)胞、SKUT1細(xì)胞
GT38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOG細(xì)胞、CoCL3細(xì)胞、Mv 1 Lu細(xì)胞
Malme-3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H920細(xì)胞、HEK-EBNA細(xì)胞、Hs 343.T細(xì)胞
P3X63Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293A細(xì)胞、SCC-7細(xì)胞、SNU407細(xì)胞
SNU475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH661細(xì)胞、BEL7402細(xì)胞、SJRH30細(xì)胞
MES 23.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：C2A細(xì)胞、Mono Mac6細(xì)胞、P3/ag細(xì)胞
JVM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-761細(xì)胞、MDA-MB-231細(xì)胞、SH-SY5Y細(xì)胞
FLC7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00346B細(xì)胞、OVCAR8細(xì)胞、Nb2細(xì)胞
OVCA432_Bast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-A549細(xì)胞、130-T細(xì)胞、SW-1271細(xì)胞
GT38細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：TOG細(xì)胞、CoCL3細(xì)胞、Mv 1 Lu細(xì)胞
KOSC-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OAW42細(xì)胞、Mel-MeWo細(xì)胞、T-ALL-1細(xì)胞
MEF (CF-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPDE6c7細(xì)胞、RMG-I細(xì)胞、1301細(xì)胞
5637細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：2T細(xì)胞、H292細(xì)胞、SUP T1細(xì)胞
H-747細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPC-Y5細(xì)胞、H727細(xì)胞、VMRC-LCD細(xì)胞
H23細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：EC-GI細(xì)胞、HUSMC細(xì)胞、2T細(xì)胞
Medical University of Graz-Chordoma 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEH2細(xì)胞、CA46細(xì)胞、B95-8細(xì)胞
Strain V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NeHepLxHT細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-4細(xì)胞、SUDHL6細(xì)胞
Leukemia L1210細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Normal Rat, August 3, 1983細(xì)胞、NCI.H226細(xì)胞、HCGC細(xì)胞
ssMCF7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mc Coy細(xì)胞、NCI-H2106細(xì)胞、BEL/FU細(xì)胞
U251細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細(xì)胞、H-2444細(xì)胞、B16-F10-BL6細(xì)胞
A-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Co-115細(xì)胞、CF-PAC1細(xì)胞、SJ-RH30細(xì)胞
B10BR細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H838細(xì)胞、OVCA5細(xì)胞、IPEC-1細(xì)胞
NCI-H1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCD19-Lu細(xì)胞、CNE1-LUC細(xì)胞、Scott細(xì)胞
Blotchy fibroblast-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mevo細(xì)胞、OCI-AML-3細(xì)胞、UMC11細(xì)胞
CAL 33細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：HO1-N1細(xì)胞、HOP 92細(xì)胞、KM932細(xì)胞
MLE-12 epithelioid cells小鼠肺上皮細(xì)胞系
AG06814-M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774 A.1細(xì)胞、SNU-761細(xì)胞、Walker/LLC-WRC256細(xì)胞
Mono-Mac-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：ssMCF7細(xì)胞、Epstein-Barr-2細(xì)胞、NCIH2227細(xì)胞
Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-87 MG細(xì)胞、SR細(xì)胞、SKLU-1細(xì)胞
MNNG-HOS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI-LY-3細(xì)胞、SKNDZ細(xì)胞、NCTC 3960細(xì)胞
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