"Kasumi-6 Cell:急性髓系細(xì)胞白血病細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):淋巴母細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng):懸浮
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
FHs74 Int細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRC-99細(xì)胞、Med 283細(xì)胞、LO2細(xì)胞
CAL-62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:mRMEC細(xì)胞、KYSE180細(xì)胞、HS766T細(xì)胞
C4-2 B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR41P細(xì)胞、EB-3細(xì)胞、Panc-813細(xì)胞
MC3T3-E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-RC-42細(xì)胞、LNCaP細(xì)胞、FLC7細(xì)胞
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
Kasumi-6 Cell:急性髓系細(xì)胞白血病細(xì)胞系
細(xì)胞消化過程總結(jié):其實(shí)絕大部分細(xì)胞消化的時(shí)候是只要用胰酶潤(rùn)洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細(xì)胞(絕大部分1min不到)。對(duì)于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞,連續(xù)這樣傳代,對(duì)細(xì)胞傷害很大。簡(jiǎn)單的程序是PBS潤(rùn)洗吸去,胰酶潤(rùn)洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層,只要能移動(dòng)了,多半呈沙壯移動(dòng),其實(shí)已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞,這是沒有必要的。一般能移動(dòng)了,說明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細(xì)胞就是完全成單個(gè)細(xì)胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會(huì)聚集,這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性,無論死活的細(xì)胞都是如此,你可以嘗試,準(zhǔn)備100%的單個(gè)細(xì)胞懸液,貼壁后觀察細(xì)胞,仍然是幾個(gè)幾個(gè)細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個(gè)小時(shí)就拿出來吹打成單細(xì)胞懸液(不要笑,這個(gè)是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯(cuò)誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個(gè)一個(gè)分開)。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個(gè)時(shí)候即使是成片的(比如Calu-3細(xì)胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個(gè)細(xì)胞左右),是正常的,不要試圖再去延長(zhǎng)消化時(shí)間,或者像有的同學(xué)那樣吹打1h,等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細(xì)胞(潤(rùn)洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細(xì)胞,一般不超過5min,即可見細(xì)胞成片移動(dòng),就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候,比如tsDC細(xì)胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:每周2-3次。
為什么培養(yǎng)的細(xì)胞要及時(shí)傳代?體外培養(yǎng)的細(xì)胞大多具有生長(zhǎng)接觸抑制的特性,也就是說當(dāng)一個(gè)細(xì)胞被其他細(xì)胞包圍的時(shí)候,它就會(huì)停止生長(zhǎng),及時(shí)傳代后,細(xì)胞的生長(zhǎng)得以繼續(xù)。培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細(xì)胞生長(zhǎng)必需成分如谷眈肢或生長(zhǎng)因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細(xì)菌或真菌污染;試劑保存不當(dāng);比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細(xì)胞濃度;讓細(xì)胞逐漸適應(yīng)新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補(bǔ)加谷酷肢或生長(zhǎng)因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內(nèi)用完;分離培養(yǎng)物,檢測(cè)支原體。冷凍管應(yīng)如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內(nèi)大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺(tái)操作細(xì)胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí),必須注意安全,預(yù)防冷凍管爆裂。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系
B4G12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUM2B細(xì)胞、PCI:SG231細(xì)胞、Hs-578Bst細(xì)胞
MG63細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1271細(xì)胞、VP 229細(xì)胞、SW 13細(xì)胞
C33A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1770細(xì)胞、HCC2157細(xì)胞、Chinese Hamster Ovary細(xì)胞
LK2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H3396細(xì)胞、PaTu 8988 S細(xì)胞、PC-3M 2B4細(xì)胞
MV-522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 102細(xì)胞、451-LU細(xì)胞、Caki2細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:懸浮生長(zhǎng)
Kasumi-6 Cell:急性髓系細(xì)胞白血病細(xì)胞系
細(xì)胞凍存復(fù)蘇材料與方法步驟:常用的細(xì)胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時(shí)要注意以下幾點(diǎn):(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個(gè)月充氮一次。液氮溫度達(dá)-196℃,使用時(shí)注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結(jié)構(gòu),中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應(yīng)防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時(shí),要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導(dǎo),使液氮直達(dá)瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時(shí)更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細(xì)胞凍存時(shí)常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或?qū)S眉?xì)胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時(shí),再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時(shí),再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時(shí),最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞形態(tài)特性:成髓細(xì)胞
Madison 109細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-BL2141細(xì)胞、SK RC 52細(xì)胞、H510細(xì)胞
GC-2spd(ts)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細(xì)胞、TMD8細(xì)胞、SKNBE-1細(xì)胞
L1210細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCA-7細(xì)胞、SVG p12細(xì)胞、TE9細(xì)胞
B104 [Rat neuroblastoma]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C57/B6-L細(xì)胞、HHL5細(xì)胞、C166細(xì)胞
T/G HA VSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:10T1/2細(xì)胞、AsPC-1細(xì)胞、HARAB細(xì)胞
L428細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 2650細(xì)胞、MCF-7/AdrR細(xì)胞、H82細(xì)胞
C4-2 Bone metastatic細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-82細(xì)胞、SW-527細(xì)胞、NBL-7細(xì)胞
Kasumi-6 Cell:急性髓系細(xì)胞白血病細(xì)胞系
KYSE0030細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hOMF細(xì)胞、P31/Fujioka細(xì)胞、Human Epithelioma-2細(xì)胞
H-378細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW839細(xì)胞、NCI-H87細(xì)胞、Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞
GB1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 680N細(xì)胞、HL1細(xì)胞、rUCMSCs細(xì)胞
293EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM-3573細(xì)胞、A375-MEL細(xì)胞、Hs-281-T細(xì)胞
PLA802細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CaES-17細(xì)胞、HS-5細(xì)胞、CCD-19Lu細(xì)胞
Karpas 422細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WC00059細(xì)胞、NS-1細(xì)胞、TC7細(xì)胞
Bac12F5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RERF-LCMS細(xì)胞、WEHI 164細(xì)胞、H-28細(xì)胞
KS-SLK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-668細(xì)胞、Mink Lung細(xì)胞、Nthy-ori 3-1細(xì)胞
WIL2S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGW細(xì)胞、HOC細(xì)胞、SF-539細(xì)胞
L-cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCI-SCC-090細(xì)胞、HCT 116細(xì)胞、Hopkins-92細(xì)胞
JIMT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TFK1細(xì)胞、H-1568細(xì)胞、BJA-B細(xì)胞
NCIH2347細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-48細(xì)胞、MFE296細(xì)胞、KOPN8細(xì)胞
NCIH1915細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW260細(xì)胞、293細(xì)胞、MDA 435細(xì)胞
WIL2S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGW細(xì)胞、HOC細(xì)胞、SF-539細(xì)胞
Walker/LLC-WRC 256細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM05384細(xì)胞、Panc8.13細(xì)胞、HCT 8細(xì)胞
U-373-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC 3T3-E1細(xì)胞、WSU-DLCL-2細(xì)胞、PANC0327細(xì)胞
RK13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCLP1細(xì)胞、AMJ2C8細(xì)胞、H-2444細(xì)胞
MOLP2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA231細(xì)胞、Panc2.03細(xì)胞、PTK1細(xì)胞
EOC20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COV-434細(xì)胞、AgC11x3A細(xì)胞、Madin-Darby Canine Kidney細(xì)胞
CHO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MT-2細(xì)胞、EVSAT細(xì)胞、HECCL-1細(xì)胞
TC-1 [Mouse lung]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 274細(xì)胞、HuH-28細(xì)胞、NCIH2023細(xì)胞
Hepatoma-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI.H522細(xì)胞、Colo320細(xì)胞、B-104細(xì)胞
A-427細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D407細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-62細(xì)胞、SL-1細(xì)胞
MDAPCa-2b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TOV-112D細(xì)胞、U-373MG細(xì)胞、HS-683細(xì)胞
U-226AR1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1417細(xì)胞、U-937細(xì)胞、WML2細(xì)胞
HCC2218細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 819.T細(xì)胞、rHSC-99細(xì)胞、HCC-78細(xì)胞
SBC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-M[TK-]細(xì)胞、RPE1細(xì)胞、WERI Rb-1細(xì)胞
U118-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SV-HUC細(xì)胞、brain-derived Endothelial cells.3細(xì)胞、GH 3細(xì)胞
CCRF/CEM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-1細(xì)胞、PL 5細(xì)胞、DHBE細(xì)胞
Kasumi-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1623細(xì)胞、HL-60 Clone 15細(xì)胞、NCI-H1155細(xì)胞
Farage細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK clone 52E細(xì)胞、NTera2/D1細(xì)胞、H-1522細(xì)胞
MJ細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RN細(xì)胞、NCI-SNU-119細(xì)胞、Jurkat-FHCRC細(xì)胞
RT4-D6-P2T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAKI.1細(xì)胞、H-2196細(xì)胞、AR-42J細(xì)胞
Anip 973細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OE21細(xì)胞、CCD-966SK細(xì)胞、Co 115細(xì)胞
Human Intestinal Epithelial Cell-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY7701細(xì)胞、CNE-2細(xì)胞、PK (15)細(xì)胞
H-1694細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL 92.1.7細(xì)胞、526-mel細(xì)胞、SKMEL-2細(xì)胞
HEK293E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-7951細(xì)胞、H920細(xì)胞、Tn-5B1-4細(xì)胞
HEL 299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2085細(xì)胞、MM.1S細(xì)胞、L-5178-Y細(xì)胞
LU-65M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OE19細(xì)胞、LL/2細(xì)胞、NCIH1436細(xì)胞
NCIH2591細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KS-SLK細(xì)胞、Mouse Colon 38細(xì)胞、Meat Animal Research Center-145細(xì)胞
DMS 53細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF-CEM C7細(xì)胞、VB細(xì)胞、Eca 109細(xì)胞
RSC-364細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H-128細(xì)胞、KMBC細(xì)胞、MES-SA細(xì)胞
RMG-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:V79-GalK1細(xì)胞、LOU-NH-91細(xì)胞、OSC-19細(xì)胞
Kasumi-6 Cell:急性髓系細(xì)胞白血病細(xì)胞系
Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs822T細(xì)胞、SNU-449細(xì)胞、U266 B1細(xì)胞
RenCa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIE 115細(xì)胞、SVOG細(xì)胞、MT-2細(xì)胞
DB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGB細(xì)胞、NBL-3細(xì)胞、HEL299細(xì)胞
SK-MEL24細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGROV 1細(xì)胞、EFM192B細(xì)胞、COLO-1細(xì)胞
Hs 739.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U138-MG細(xì)胞、HUVSMC細(xì)胞、OVCA 432細(xì)胞
AML-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL 299細(xì)胞、H1672細(xì)胞、CEF細(xì)胞
H-2444細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL85-1細(xì)胞、PA-1細(xì)胞、NCI-H1341細(xì)胞
COLO-320DM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H510A細(xì)胞、L-cell細(xì)胞、PK-15細(xì)胞
ME1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE9細(xì)胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細(xì)胞、NCI-H2228細(xì)胞
Human Embryo Lung-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1437細(xì)胞、SKNBE(1)細(xì)胞、TKB-1細(xì)胞
ME 180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細(xì)胞、RD 2細(xì)胞、IR 983F細(xì)胞
IEC 18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H865細(xì)胞、DMS273細(xì)胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細(xì)胞
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