"BDCM Cell:急性髓系細胞白血病細胞系
細胞形態(tài):淋巴母細胞樣
細胞生長:懸浮
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
Cloudman S91 melanoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 206細胞、CAL39細胞、NCI-522細胞
NCIH2591細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KS-SLK細胞、Mouse Colon 38細胞、Meat Animal Research Center-145細胞
ROS 17/2.8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLFa細胞、293 Ad5細胞、UMNSAH-DF 1細胞
HuP-T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-CO-1細胞、SMMC-7721細胞、HCT-116細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
BDCM Cell:急性髓系細胞白血病細胞系
細胞的凍存:目前,細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×10(6)~1×10(7)/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤?,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:每周2-3次。
培養(yǎng)細胞真的不難,最關(guān)鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數(shù),傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
A-172細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Mel 2細胞、HPAF-2細胞、KALS-1細胞
H-1944細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNB.19細胞、H-35細胞、Rat 2細胞
Walker/LLC-WRC256細胞系相關(guān)產(chǎn)品:INS1-E細胞、CL1-0細胞、Vero 76 clone E-6細胞
MC3T3-E1 Subclone 24細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1666_DA細胞、526mel細胞、Lung cancer-1/squamous細胞
MLE12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KATO 3細胞、Hs 606.T細胞、SK-ES1細胞
細胞生長特性:懸浮生長
BDCM Cell:急性髓系細胞白血病細胞系
細胞復蘇相關(guān)注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間,轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇,結(jié)果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞形態(tài)特性:淋巴母細胞
H9c2(2-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFE296細胞、PLCPRF5細胞、HCC0044細胞
KASUMI1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:9L細胞、Tca-8113細胞、NCI-H295R細胞
T-CAM2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-52PE細胞、Clone Y1細胞、H1993細胞
Dx5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-UMC-11細胞、Saos2細胞、GT39細胞
CPA 47細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1954-BL細胞、CEM T4細胞、FHL-124細胞
8305-C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CDC/EU.HMEC-1細胞、TGHAVSMC細胞、MCF12F細胞
SupB15W細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU387細胞、EOMA細胞、COLO-16細胞
BDCM Cell:急性髓系細胞白血病細胞系
NCIH322細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-1116細胞、H-865細胞、Henrietta Lacks cells細胞
HT clone H9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AsPC-1細胞、KU-19-19細胞、NCI-H2081細胞
SUDHL-10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCC-MSB-1細胞、HPAC細胞、MDA-MB415細胞
3 LL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:UM-UC14細胞、NCI-H1954細胞、GM03671細胞
P30 OHK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly1細胞、M-1細胞、SK-MEL-31細胞
HPaSteC(HPSC)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C3H-10T1/2細胞、MyLa 2059細胞、HEL-92細胞
W256細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUC細胞、SNU-739細胞、SKMES1細胞
LLC-MK2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞、PC3細胞、L-M (TK-)細胞
Calu-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GTL-16細胞、SW-13細胞、GM06141細胞
AR-42J細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC4細胞、RAEC細胞、RCC_7860細胞
IAR20細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1222細胞、WIL2-S細胞、NCIH1573細胞
Eca-109細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL1細胞、F-36P細胞、HCMEC(BL12-H)細胞
TCCPAN2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEC細胞、QGP-1細胞、OP9細胞
Neuro-2a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBSMC細胞、IOSE80細胞、Madin Darby Bovine Kidney細胞
RN-c細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BSC-1細胞、X63細胞、NTERA-2細胞
CMT64細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN382細胞、Ramos(RA1)細胞、LMH細胞
Reuber H35細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TC-1[JHU-1]細胞、M-1 myeloid leukemia細胞、JM細胞
T8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lu-65細胞、SK-SH-SY5Y細胞、RCC23細胞
LC-2-Ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKRC 39細胞、HLFa細胞、WB-F344細胞
RT-112細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C32-mel細胞、HeLa/DDP細胞、RCC10細胞
RAMOS2G64C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:McCoy細胞、MADB106細胞、U-87MG細胞
EJ1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL2細胞、OVCA 433細胞、SW-1463細胞
BT 549細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU4475細胞、HS-729細胞、Mouse podocyte細胞
CCD18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-98G細胞、IM9細胞、NCI-H2110細胞
Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NFHIOSE-29細胞、A 2058細胞、H-2347細胞
HOC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIXC-002細胞、H1092細胞、OVCA420細胞
EL-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHDF細胞、16HBE14o-細胞、MHCC-97細胞
MHHCALL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-24細胞、Mouse Forestomach Carcinoma細胞、WM35細胞
SHEE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO320/DM細胞、SBC5細胞、Jurkat (clone E6-1)細胞
NCIH1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUP-T1細胞、E.L.4細胞、Panc 2.03細胞
B16-F1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh7.5.1細胞、PAN 02細胞、143B TK-細胞
NIH:OVCAR-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63-Ag8.653細胞、QBI-HEK 293A細胞、IEC-6細胞
3T3 Swiss Albino細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVTOKO細胞、BNL CL2細胞、CCK81細胞
Panc 2.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CC-LP-1細胞、SNU-368細胞、SKML-28細胞
HUVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1436細胞、H2081細胞、SKMEL-1細胞
KYSE0520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Caki-1細胞、RM-1細胞、S16細胞
H-187細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs27F細胞、MDA-MB468細胞、JTC-39細胞
H676細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC38細胞、SKMES-1細胞、BC-025細胞
VMCUB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-508細胞、CEMC1細胞、PANC0403細胞
SHZ-88細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PF382細胞、NCIH1648細胞、Metastatic Variant 522細胞
alpha TC1-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Namalva細胞、H-1688細胞、NCIH2228細胞
SR-786細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML-4細胞、EFM-192B細胞、SK-RC-52細胞
LS 180細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-1080細胞、MODE-K細胞、H-661細胞
BDCM Cell:急性髓系細胞白血病細胞系
SNU1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K-1735細胞、SNU449細胞、MM-1S細胞
Line 697細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT 226細胞、L-cells細胞、HeLa-S3細胞
SCL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-175-VII細胞、SO-RB50細胞、NCI-H1581細胞
Hepa-RG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 763細胞、DHL4細胞、NCIH1373細胞
IPEC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE2C細胞、hFOB細胞、Mel526細胞
NMC-G1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB157細胞、HLCL9B10細胞、PanC1細胞
ZYM-DIEC02細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPaSteC(HPSC)細胞、RPPVEC細胞、NL20SV細胞
LS 180細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT-1080細胞、MODE-K細胞、H-661細胞
SK Mel28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:USMC細胞、KU 812F細胞、RWPE-2細胞
PANC 203細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE4細胞、WEHI-3細胞、L-WRN細胞
FaDu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Farage細胞、D-407細胞、SK-MES-1細胞
PK13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MIA PaCa-2細胞、Helacyton gartleri細胞、PL-45細胞
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