"NCI-H2291 epithelioid cells人肺癌細胞系 細胞背景資料:詳見相關文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結1:復蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題。總結2:首先應該懷疑凍存,實際上復蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力,表現為先貼后死,原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。 Bat lung細胞系相關產品:LTEP-sm細胞、SHI1細胞、H-187細胞 L-1210細胞系相關產品:Cattle chondrocytes細胞、3T3J2細胞、MJ細胞 J774.A1細胞系相關產品:DMS114細胞、UMR 106細胞、RGC-6細胞 細胞生長:貼壁 NCI-H2291 epithelioid cells人肺癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞的衰老:體外細胞培養(yǎng)實驗證明:成纖維細胞:來自胎兒傳代50次后衰老死亡,來自成人傳代20次后衰老死亡(與具體年齡有關;來自小鼠傳代14--28次后衰老死亡,來自烏龜傳代90--125次后衰老死亡。細胞衰老過程中會發(fā)生一系列的變化,包括:蛋白質合成速度降低,已有蛋白質結構變化,特異蛋白質成份出現;同時,細胞核,線粒體,膜系統、骨架系統等都有結構、功能的改變。細胞衰老原因,尚無定論,出現過好幾種理論與假說,其中得到較廣泛認可的是“自由基損傷假說”。細胞凋亡:細胞的死亡是個體存活的正?,F象,常見的細胞死亡形式有3種:壞死、凋亡和細胞毒性。多細胞生物的生命活動中,因為環(huán)境因素的突然變化或病原物的入侵,導致一部分細胞死去,稱為細胞的病理死亡,或細胞壞死。壞死是細胞暴露于嚴重的物理或化學刺激時導致的細胞死亡;細胞毒性是由細胞或者化學物質引起的單純的細胞殺傷事件,不依賴于其它兩種細胞死亡機理,如殺傷T細胞的細胞毒性作用。還有一種情況,一部分細胞的死亡是生物個體正常生命活動(代謝、生長、發(fā)育、分化)的一個必要部分;似乎帶有“犧牲局部,保全整體”的意味。這種情況下的細胞死亡,明顯地受遺傳控制,稱為細胞凋亡。凋亡(Apoptosis)則是程序性的、正常的細胞死亡,是機體清除無用的或者不想要的細胞的手段。它與細胞壞死是兩個截然不同的過程,無論從形態(tài)學、生物學還是生化的特征來說,都有明顯的區(qū)別。細胞凋亡現象普遍存在于生物界。細胞凋亡與細胞增殖、分化和衰老起著互補與平衡的作用,在多細胞動物的發(fā)育、形態(tài)建成與維持中扮演至關重要的角色。作為細胞的一種基本生命現象,凋亡失控的結果將是可怕的:凋亡不足時,易發(fā)生癌變、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡過量則可能產生獲得性免疫缺陷綜合征(HIV)、重癥肝炎與退行性神經疾病,如老年性癡呆癥(Alzheimer""s disease)、帕金森氏癥(Parkinson""s disease)。因此研究細胞凋亡及其機理具有重要的理論和實踐意義。 細胞傳代方法:1:3-1:4傳代;每周換液2-3次。 SVOG細胞系相關產品:Panc-1-P細胞、HCC94細胞、B10BR細胞 SK-MEL-MeWo細胞系相關產品:SP2-0-Ag14細胞、Ly8細胞、NEC細胞 OVCAR433細胞系相關產品:BEL/FU細胞、HBZY-1細胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細胞 P388-D1細胞系相關產品:SCL-I細胞、SU8686細胞、CoCL3細胞 hTERT-RPE-1細胞系相關產品:SAS細胞、MASMC細胞、TE32細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數國外著名大學建系 NCI-H2291 epithelioid cells人肺癌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣 細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結:1)一般客戶拿到細胞后,應該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當地溫度,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。 NCI-HUT-520細胞系相關產品:P3J HR-1細胞、RS(4;11)細胞、MF2059細胞 MDA-MB-134-VI細胞系相關產品:MDA-MB436細胞、TGW-nu細胞、RAOEC細胞 HEM-L細胞系相關產品:Z310細胞、SU.86.86細胞、ECC-12細胞 RMa-bm細胞系相關產品:CT26WT細胞、HEL-92.1.7細胞、HCC2218細胞 HOS-143B細胞系相關產品:DSL6A/C1細胞、SK_N_FI細胞、RCCJF細胞 GM03569D細胞系相關產品:MSTO-211H細胞、MDA MB 175 VII細胞、HL-60 clone15細胞 J774細胞系相關產品:LuCL4細胞、SKM1細胞、H-2066細胞 CT26.WT細胞系相關產品:NCIH1341細胞、SCC-25細胞、SN-12C細胞 KTCTL140細胞系相關產品:H-2009細胞、Evsa-T細胞、COLO 678細胞 MAVER細胞系相關產品:HuH 6細胞、FL-83B細胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細胞 NCI-H2291 epithelioid cells人肺癌細胞系 TN5B14細胞系相關產品:MV4;11細胞、SKES-1細胞、F56 [Human neoplasm]細胞 HBVSMC細胞系相關產品:CAL-27細胞、Kelly細胞、OCI AML4細胞 COLO206F細胞系相關產品:TC7細胞、INS1細胞、MonoMac6細胞 OAC-P4C細胞系相關產品:Hut292細胞、Karpas 422細胞、AG06814-M細胞 HPDEC細胞系相關產品:COLO_320DM細胞、Jurkat Clone E6-1細胞、HRGEC細胞 SK-ES1細胞系相關產品:HS-5細胞、PSN1細胞、PFSK1細胞 SK-ES1細胞系相關產品:HS-5細胞、PSN1細胞、PFSK1細胞 HCEC細胞系相關產品:HARAB細胞、VSC4.1細胞、B104 [Rat neuroblastoma]細胞 KM12-SM細胞系相關產品:143B TK-細胞、Potorous tridactylus Kidney 2細胞、HLFa細胞 NKM-1細胞系相關產品:ZYM-SVEC01細胞、SCL-1細胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細胞 MGC-803細胞系相關產品:NMC-G1細胞、Leukemic 1210細胞、SKMEL-24細胞 Roswell Park Memorial Institute 8402細胞系相關產品:Centre Antoine Lacassagne-39細胞、NCI-H378細胞、CAL-33細胞 A427細胞系相關產品:CCD 841 CoN細胞、SW 954細胞、RH-35細胞 MM1細胞系相關產品:MV 4;11細胞、Tregs細胞、NIH-3T3細胞 Panc04.03細胞系相關產品:NK92細胞、NF639細胞、Rabbit Kidney 13細胞 SKOV-433細胞系相關產品:H1703細胞、Hs 729.T細胞、MC-26細胞 CCRF-CEM細胞系相關產品:SNU-601細胞、ZR-75-1細胞、OCLY8細胞 H-460細胞系相關產品:GLC-82細胞、RT-4細胞、B16F0細胞 SKNBE-2細胞系相關產品:Laboratory of Allergic Diseases 2細胞、IMCD3細胞、SCL I細胞 PLB-985細胞系相關產品:NCI-H676細胞、CAL 12細胞、KMH2細胞 N-87細胞系相關產品:108CC15細胞、Hs 895 T細胞、KYSE 520細胞 Kelly細胞系相關產品:OSC19細胞、CHL-IU細胞、CCD-1095Sk細胞 Human Embryonic Skin細胞系相關產品:BeWo細胞、UMUC3細胞、SUDHL1細胞 NK-92MI細胞系相關產品:SLMT1細胞、SUPB-15細胞、NCI-SNU-407細胞 U-2932細胞系相關產品:Hs 839.T細胞、P3HR1細胞、NRK52E細胞 H1963細胞系相關產品:SK Col 1細胞、GA-10 clone 4細胞、MCF-7/ADR細胞 Anip-973細胞系相關產品:D 407細胞、HR-8348細胞、RKOE6細胞 HEK-293-FT細胞系相關產品:NP-69細胞、32D:cl3細胞、C3H/10T1/2-clone8細胞 SW579細胞系相關產品:Human ErythroLeukemia細胞、HS766T細胞、Ej138細胞 Hs888 Lu細胞系相關產品:NE-4C細胞、NTERA-2 cl.D1細胞、Ca9-22細胞 Normal Rat Kidney細胞系相關產品:526 mel細胞、HVSMC細胞、Hepa-RG細胞 HFLS-OA細胞系相關產品:HFF-1細胞、L5178-R細胞、COV 434細胞 HEL-1細胞系相關產品:SCC 4細胞、Adeno-293細胞、H2052細胞 HS578T細胞系相關產品:MDA-468細胞、EAhy 926細胞、LA-N-6(OAN)細胞 Panc203細胞系相關產品:SCH細胞、HCASMC細胞、Human podocyte細胞 A2780S細胞系相關產品:OE-33細胞、3T3 clone A31細胞、WSU-DLCL2細胞 SK-N-BE(2)細胞系相關產品:H2023細胞、NEC8細胞、CALU 1細胞 Mc Coy細胞系相關產品:FHs74 Int細胞、526細胞、KASUMI1細胞 LN 229細胞系相關產品:RBMVEC細胞、SUM 52PE細胞、COLO-679細胞 CL11細胞系相關產品:HuH6細胞、P3-X63.Ag8.653細胞、HL7702細胞 D341MD細胞系相關產品:SHI-1細胞、Verda reno細胞、COLO-320-HSR細胞 Panc-05.04細胞系相關產品:SW 1353細胞、WEHI164細胞、EVSA/T細胞 GalK1細胞系相關產品:CaEs17細胞、T/G HA VSMC細胞、MB-49細胞 CWR22R細胞系相關產品:EAhy926細胞、A72細胞、SK_N_BE2C細胞 Raji細胞系相關產品:VAESBJ細胞、Hs737T細胞、HGC-27細胞 NCI-H69C細胞系相關產品:SK.MEL.28細胞、KNS42細胞、HEK;293細胞 RKO-AS45-1細胞系相關產品:HCC0827細胞、MDA-MB-468-RED細胞、OCI Ly19細胞 NOMO-1細胞系相關產品:786-O細胞、CII細胞、HEK293T/17細胞 U-251_MG細胞系相關產品:SKGT4細胞、MDA-MB-134VI細胞、A673細胞 CAL 27細胞系相關產品:NIH:OVCAR-4細胞、OCI Ly19細胞、H1373細胞 NSI/1-Ag4-1細胞系相關產品:NCI-H2066細胞、Nthy-ori 3.1細胞、alpha TC1 clone 6細胞 NCI-H2291 epithelioid cells人肺癌細胞系 WEHI164細胞系相關產品:RMS 13細胞、BL2141細胞、HCC0202細胞 OVCA 433細胞系相關產品:Japanese Tissue Culture-28細胞、MLE-12細胞、BIU87細胞 KYSE510細胞系相關產品:Eph4 1424細胞、SHIN3細胞、BS-C-1細胞 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