"NCI-H810 epithelioid cells人肺癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞,并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細(xì)胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中,細(xì)胞培增3~6次。細(xì)胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度,即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/100個細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細(xì)胞可達3~5%;細(xì)胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞,如果細(xì)胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細(xì)胞懸液。3.將細(xì)胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細(xì)胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進行傳代。 3T6 Swiss Albino細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D283-MED細(xì)胞、NCI H23細(xì)胞、TI-73細(xì)胞 SVEC4-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hx147細(xì)胞、CORL88細(xì)胞、Hs 729.T細(xì)胞 IMR-90細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC1細(xì)胞、WILL2細(xì)胞、MIN6細(xì)胞 細(xì)胞生長:貼壁 NCI-H810 epithelioid cells人肺癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享:支原體是一類缺乏細(xì)胞壁的原核細(xì)胞型微生物,大小一般在0.3-0.5um之間,呈高度多形性,有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細(xì)胞,也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色,用姬姆薩染色很淺,革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細(xì)胞培養(yǎng)中生長,營養(yǎng)要求比細(xì)菌高。細(xì)胞培養(yǎng)(特別是傳代細(xì)胞)被支原體污染是個世界性問題。在細(xì)胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到63%,支原體感染發(fā)生后能改變細(xì)胞的DNA,RNA及蛋白表達,又不能通過可視法對其進行檢測,而且它對細(xì)胞的生長率影響較小,不易引起注意。國內(nèi)外研究表明,95%以上是以下四種支原體:口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii),為牛源性。以上是最常見的污染細(xì)胞培養(yǎng)的支原體菌群,但能夠污染細(xì)胞的支原體種類是很多的,國外調(diào)查證明,大約有二十多種支原體能污染細(xì)胞,有的細(xì)胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細(xì)胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細(xì)胞的原始組織或器官的污染。組織細(xì)胞培養(yǎng)工作中,主要從以下幾個方面來預(yù)防支原體的污染:控制環(huán)境污染;嚴(yán)格實驗操作;細(xì)胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌;在細(xì)胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細(xì)胞后,特別是重要的細(xì)胞株,有必要清除支原體,常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細(xì)胞壁,一般來講,對作用于細(xì)胞壁生物合成的抗生素,如萬古霉素等完全不敏感;對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用,所以常不用來作為支原體感染的化學(xué)治療劑。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:6傳代,每周2-3次。 RT4P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep 3B2細(xì)胞、DMS153細(xì)胞、FRhK-4細(xì)胞 QG56細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EVSA/T細(xì)胞、U-343MG細(xì)胞、Neuro2a細(xì)胞 HT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM35細(xì)胞、MIHA細(xì)胞、SNU1細(xì)胞 3T3-L1 ad細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-283 Med細(xì)胞、Hs 819.T細(xì)胞、H2009細(xì)胞 NCIH1703細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-10A細(xì)胞、Hs 683細(xì)胞、A-172MG細(xì)胞 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 NCI-H810 epithelioid cells人肺癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長特性:貼壁生長 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣 細(xì)胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來選擇;3)將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 CT26.CL25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-435細(xì)胞、H-64細(xì)胞、H2122細(xì)胞 Pa14C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DLD 1細(xì)胞、HL7702細(xì)胞、RPMI no. 8226細(xì)胞 Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep-3B細(xì)胞、KM12 SM細(xì)胞、HEK293E細(xì)胞 Panc 8.13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-3H-1細(xì)胞、TOV-112D細(xì)胞、Medical Research Council cell strain-5細(xì)胞 NPC-TW 039細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Leghorn Male Hepatoma cell line細(xì)胞、LLC PK1細(xì)胞、CAL51細(xì)胞 MeT5A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCIAML5細(xì)胞、H2066細(xì)胞、Mouse Forestomach Carcinoma細(xì)胞 TE 85.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE(2)M17細(xì)胞、RPTEC/TERT1細(xì)胞、GA-10 (Clone 4)細(xì)胞 MCAEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM15452細(xì)胞、293T細(xì)胞、McA-RH 7777細(xì)胞 SW900細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H510細(xì)胞、HCA7細(xì)胞、BxPC-3細(xì)胞 SHP-77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NG108-15細(xì)胞、COLO-679細(xì)胞、Hs-27細(xì)胞 NCI-H810 epithelioid cells人肺癌細(xì)胞系 HOS/MNNG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2347細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-51細(xì)胞、JROECL19細(xì)胞 OV3121細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCP-1細(xì)胞、NCI-BL1339細(xì)胞、Hs294細(xì)胞 SKO3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:143 B細(xì)胞、NCIH460細(xì)胞、CV-1 in Origin Simian-7細(xì)胞 Hs 832(C).T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2085細(xì)胞、NW38細(xì)胞、HCC-202細(xì)胞 NCI-H226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Doubling time: ~50 hours (ATCC).細(xì)胞、H820細(xì)胞、RA細(xì)胞 LIM 1215細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87細(xì)胞、DF1細(xì)胞、H1573細(xì)胞 LIM 1215細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87細(xì)胞、DF1細(xì)胞、H1573細(xì)胞 J-111細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero 76 clone E6細(xì)胞、LAD2細(xì)胞、HT-22細(xì)胞 PANC-03-27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:hTERT-HME-1細(xì)胞、G 401細(xì)胞、HEK.EBNA細(xì)胞 UO31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHH-CALL-2細(xì)胞、MV-4:11細(xì)胞、293 HEK細(xì)胞 COS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pa14C細(xì)胞、H-1373細(xì)胞、YT細(xì)胞 CHP 212細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1806細(xì)胞、H-1155細(xì)胞、KMS-11細(xì)胞 MS1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1522細(xì)胞、MS-751細(xì)胞、YES-2細(xì)胞 RDES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC-4B/C細(xì)胞、CD 18細(xì)胞、BT 549細(xì)胞 SF 763細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM2131細(xì)胞、RD細(xì)胞、HT-29細(xì)胞 MEF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OKAC1細(xì)胞、SNT-8細(xì)胞、C8-D1A細(xì)胞 H1770細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-209細(xì)胞、HuH1細(xì)胞、Ku812細(xì)胞 H-1672細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3M細(xì)胞、Calu-3細(xì)胞、SK MEL 28細(xì)胞 EPC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M059J細(xì)胞、SPCA1細(xì)胞、HCC1419細(xì)胞 H-220細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cor L51細(xì)胞、SV-HUC-1細(xì)胞、PK 15細(xì)胞 HDQP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tissue Culture-1細(xì)胞、HuP-T4細(xì)胞、Ect1/E6E7細(xì)胞 NCI-SNU-668細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16-BL6細(xì)胞、PATU-S細(xì)胞、L2細(xì)胞 Hs 821.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RH-35細(xì)胞、SK Mel 24細(xì)胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細(xì)胞 P36細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGSMC細(xì)胞、NCIH2227細(xì)胞、NHDF細(xì)胞 3T3(A31)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN-1細(xì)胞、H-548細(xì)胞、PL-11細(xì)胞 COLO824細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U87MG細(xì)胞、G422細(xì)胞、H146細(xì)胞 GA10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-322細(xì)胞、HCT116/L細(xì)胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞 LTEPa2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-484細(xì)胞、PTK-1細(xì)胞、MADB106細(xì)胞 HCC-366細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2591細(xì)胞、A 549細(xì)胞、LC-1細(xì)胞 INS-1E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AA-Mel細(xì)胞、Ramos (RA)細(xì)胞、PL-45細(xì)胞 MM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit225細(xì)胞、Rabbit Kidney 13細(xì)胞、C3A細(xì)胞 MDAMB175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FCCH1018細(xì)胞、Reuber H-35細(xì)胞、H292細(xì)胞 SR786細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOR-10細(xì)胞、NCIH1944細(xì)胞、639-V細(xì)胞 Renal Carcinoma細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP subline 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