"A-704 epithelioid cells人腎癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:詳見(jiàn)相關(guān)文獻(xiàn)介紹 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 貼壁細(xì)胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時(shí)不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時(shí),從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和,對(duì)細(xì)胞損傷較小,但是,價(jià)格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì),對(duì)細(xì)胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時(shí)應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來(lái)的細(xì)胞要洗一遍。4、商品化的無(wú)酶消化液。個(gè)人的使用經(jīng)常覺(jué)得對(duì)細(xì)胞的損傷比較大,但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實(shí)比較強(qiáng)。5、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來(lái)。6、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時(shí)。無(wú)法使組織上的細(xì)胞脫落下來(lái)。本方法的原理,我想是因細(xì)胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來(lái)。優(yōu)點(diǎn)是:對(duì)細(xì)胞損傷小,不需要中止或洗細(xì)胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過(guò)程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺(tái)上,很快細(xì)胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細(xì)胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。 TOV112D細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN7細(xì)胞、EB1細(xì)胞、HIC細(xì)胞 MPC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-HSR細(xì)胞、CCRF.CEM細(xì)胞、H-2052細(xì)胞 CHO-ori細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FL 62891細(xì)胞、X63-Ag 8.6.5.3細(xì)胞、HCASMC細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 A-704 epithelioid cells人腎癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞的衰老:體外細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)證明:成纖維細(xì)胞:來(lái)自胎兒傳代50次后衰老死亡,來(lái)自成人傳代20次后衰老死亡(與具體年齡有關(guān);來(lái)自小鼠傳代14--28次后衰老死亡,來(lái)自烏龜傳代90--125次后衰老死亡。細(xì)胞衰老過(guò)程中會(huì)發(fā)生一系列的變化,包括:蛋白質(zhì)合成速度降低,已有蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)變化,特異蛋白質(zhì)成份出現(xiàn);同時(shí),細(xì)胞核,線粒體,膜系統(tǒng)、骨架系統(tǒng)等都有結(jié)構(gòu)、功能的改變。細(xì)胞衰老原因,尚無(wú)定論,出現(xiàn)過(guò)好幾種理論與假說(shuō),其中得到較廣泛認(rèn)可的是“自由基損傷假說(shuō)”。細(xì)胞凋亡:細(xì)胞的死亡是個(gè)體存活的正?,F(xiàn)象,常見(jiàn)的細(xì)胞死亡形式有3種:壞死、凋亡和細(xì)胞毒性。多細(xì)胞生物的生命活動(dòng)中,因?yàn)榄h(huán)境因素的突然變化或病原物的入侵,導(dǎo)致一部分細(xì)胞死去,稱為細(xì)胞的病理死亡,或細(xì)胞壞死。壞死是細(xì)胞暴露于嚴(yán)重的物理或化學(xué)刺激時(shí)導(dǎo)致的細(xì)胞死亡;細(xì)胞毒性是由細(xì)胞或者化學(xué)物質(zhì)引起的單純的細(xì)胞殺傷事件,不依賴于其它兩種細(xì)胞死亡機(jī)理,如殺傷T細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用。還有一種情況,一部分細(xì)胞的死亡是生物個(gè)體正常生命活動(dòng)(代謝、生長(zhǎng)、發(fā)育、分化)的一個(gè)必要部分;似乎帶有“犧牲局部,保全整體”的意味。這種情況下的細(xì)胞死亡,明顯地受遺傳控制,稱為細(xì)胞凋亡。凋亡(Apoptosis)則是程序性的、正常的細(xì)胞死亡,是機(jī)體清除無(wú)用的或者不想要的細(xì)胞的手段。它與細(xì)胞壞死是兩個(gè)截然不同的過(guò)程,無(wú)論從形態(tài)學(xué)、生物學(xué)還是生化的特征來(lái)說(shuō),都有明顯的區(qū)別。細(xì)胞凋亡現(xiàn)象普遍存在于生物界。細(xì)胞凋亡與細(xì)胞增殖、分化和衰老起著互補(bǔ)與平衡的作用,在多細(xì)胞動(dòng)物的發(fā)育、形態(tài)建成與維持中扮演至關(guān)重要的角色。作為細(xì)胞的一種基本生命現(xiàn)象,凋亡失控的結(jié)果將是可怕的:凋亡不足時(shí),易發(fā)生癌變、病毒性疾病和自身免疫疾病;而凋亡過(guò)量則可能產(chǎn)生獲得性免疫缺陷綜合征(HIV)、重癥肝炎與退行性神經(jīng)疾病,如老年性癡呆癥(Alzheimer""s disease)、帕金森氏癥(Parkinson""s disease)。因此研究細(xì)胞凋亡及其機(jī)理具有重要的理論和實(shí)踐意義。 細(xì)胞傳代方法:1:3—1:4傳代,每周換液2-3次 WTRL1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AAV-293細(xì)胞、H-920細(xì)胞、DanG細(xì)胞 GM03190細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1092細(xì)胞、H69細(xì)胞、WiDr/S細(xì)胞 HPDEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO_320DM細(xì)胞、Jurkat Clone E6-1細(xì)胞、HRGEC細(xì)胞 AML-EOL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSAS1細(xì)胞、FAK+/+細(xì)胞、NCI-H2009細(xì)胞 NuTu 19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGE細(xì)胞、PT-K75細(xì)胞、HB611細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 A-704 epithelioid cells人腎癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng) 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞樣 造成實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞污染常見(jiàn)情況總結(jié):細(xì)胞培養(yǎng)中最常見(jiàn)污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會(huì)造成細(xì)胞污染呢?我們根據(jù)常見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時(shí)間,有人已經(jīng)用超凈臺(tái)四個(gè)多小時(shí),不開(kāi)紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開(kāi)始試驗(yàn);2)器材或者溶液很久沒(méi)用,未檢測(cè)是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺(tái)不點(diǎn)酒精燈;點(diǎn)了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗(yàn);4)不帶手套,徒手操作;5)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實(shí)驗(yàn)服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過(guò)程中使用的所有實(shí)驗(yàn)用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺(tái)和桌面,東西太多太亂:超凈臺(tái)不是儲(chǔ)物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺(tái)!這樣就會(huì)有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來(lái)后全部堆在傳代細(xì)胞!一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里,細(xì)胞就會(huì)養(yǎng)的不好,啥時(shí)候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒(méi)清潔】細(xì)胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個(gè)恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染,如果有而且好幾個(gè)板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個(gè)大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒(méi)了要記得加,還得記得十天半個(gè)月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔?xì)胞人多口雜,難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗(yàn)在無(wú)菌條件下操作。出入試驗(yàn)室,實(shí)驗(yàn)服當(dāng)風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細(xì)胞污染;超凈臺(tái)做實(shí)驗(yàn)時(shí),喜歡說(shuō)話聊著做試驗(yàn),要是還不帶口罩,里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢! HCT8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3 NS1 Ag4細(xì)胞、G361mel細(xì)胞、MDA MB231細(xì)胞 KYSE520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-85細(xì)胞、Lewis lung carcinoma細(xì)胞、LC-2 ad細(xì)胞 GM04678細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P388細(xì)胞、L cells (TK-)細(xì)胞、GCT細(xì)胞 JROECL 19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BI-Mel細(xì)胞、KRC Y細(xì)胞、HBSMC細(xì)胞 IBRS-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lewis Lung Cancer細(xì)胞、OV2008細(xì)胞、NCIH1092細(xì)胞 STTG1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY 7701細(xì)胞、LNCaP-Clone-FGC細(xì)胞、SKRC20細(xì)胞 TE3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1376細(xì)胞、NCI-H1650細(xì)胞、GL-261細(xì)胞 ME180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PNT1-a細(xì)胞、L78細(xì)胞、Fetal Human Colon細(xì)胞 CaSki細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSF2細(xì)胞、EL 4細(xì)胞、KMS26細(xì)胞 NCIH1373細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H774細(xì)胞、BAR-T細(xì)胞、OVTOKO細(xì)胞 A-704 epithelioid cells人腎癌細(xì)胞系 SU-DHL2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCoEpiC細(xì)胞、Oka-C1細(xì)胞、TMD8細(xì)胞 Kupffer細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-729-T細(xì)胞、HN 4細(xì)胞、SUM 190PT細(xì)胞 C12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DLM8細(xì)胞、TE13細(xì)胞、RPMI-8226細(xì)胞 DLD-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1419細(xì)胞、BGC-823細(xì)胞、LS1034細(xì)胞 WC00079細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A549ATCC細(xì)胞、MKN74細(xì)胞、D 407細(xì)胞 RBL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBVEC細(xì)胞、Hs 604.T細(xì)胞、GM00215細(xì)胞 RBL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBVEC細(xì)胞、Hs 604.T細(xì)胞、GM00215細(xì)胞 SUM 102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss-3T3細(xì)胞、ID8/MOSEC細(xì)胞、NFS60細(xì)胞 LAN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCE細(xì)胞、SKG-IIIa細(xì)胞、Mac-1細(xì)胞 HHFK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEMCSS細(xì)胞、MDA-MB-134細(xì)胞、Michigan Cancer Foundation-10A細(xì)胞 MV-522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 102細(xì)胞、451-LU細(xì)胞、Caki2細(xì)胞 BNL 1ME A.7R.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2218細(xì)胞、SW 1573細(xì)胞、COLO 684細(xì)胞 VeroE6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HANK細(xì)胞、SF 767細(xì)胞、A-20細(xì)胞 Ca9-22細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C643細(xì)胞、MV-4-11細(xì)胞、NCIH128細(xì)胞 AHH-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Be Wo細(xì)胞、3T6-Swiss albino細(xì)胞、WEHI231細(xì)胞 L-428細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBLS細(xì)胞、SKGIIIA細(xì)胞、SNU-638細(xì)胞 IEC18細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB231細(xì)胞、SU-DHL1細(xì)胞、QBC-939細(xì)胞 NTERA2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NBL-4細(xì)胞、NK-92 MI細(xì)胞、SW 1353細(xì)胞 LS123細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-68細(xì)胞、A-172 MG細(xì)胞、HSMC細(xì)胞 RPMI 7666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 53細(xì)胞、SR-786細(xì)胞、SN12C-PM6細(xì)胞 HHL-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL 5細(xì)胞、NCI-H1963細(xì)胞、LAD2細(xì)胞 NCI-H2452細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL28細(xì)胞、L1210細(xì)胞、SCC-4細(xì)胞 OVHM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV-522細(xì)胞、NCIH1963細(xì)胞、H9c2(2-1)細(xì)胞 H2073細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:253J B-V細(xì)胞、CSQT-2細(xì)胞、McA-RH8994細(xì)胞 EJ-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Functional Liver Cell-7細(xì)胞、FHCRC subclone 11細(xì)胞、Cor L88細(xì)胞 UMR 106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 1990細(xì)胞、BSC1細(xì)胞、PC-3M-IE8細(xì)胞 Epstein-Barr-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HK2細(xì)胞、MLTC-1細(xì)胞、SKMES細(xì)胞 SK-NMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Swiss 3T6細(xì)胞、PAI細(xì)胞、MAEC細(xì)胞 HSC-T6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs742T細(xì)胞、MM6細(xì)胞、HOC-1細(xì)胞 HO1-N1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-8細(xì)胞、Dakiki細(xì)胞、YH-13細(xì)胞 MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM TK negative細(xì)胞、MDAMB175細(xì)胞、OVCAR 5細(xì)胞 H-2110細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC 786-O細(xì)胞、Hs-729-T細(xì)胞、WC00079細(xì)胞 GM01232E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3.times.63 Ag8.653細(xì)胞、CATH.a細(xì)胞、RS 4;11細(xì)胞 Karpas-299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCM細(xì)胞、SHIN-3細(xì)胞、Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞 SW1463細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H69細(xì)胞、SF539細(xì)胞、TE1細(xì)胞 SLK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-52-PE細(xì)胞、SK_N_BE2C細(xì)胞、CAMA細(xì)胞 H2106細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RIMEC細(xì)胞、SW 403細(xì)胞、RCC-10RGB細(xì)胞 THLE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:7860細(xì)胞、SCC90細(xì)胞、SNK-6細(xì)胞 THLE2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:7860細(xì)胞、SCC90細(xì)胞、SNK-6細(xì)胞 HA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS/MNNG細(xì)胞、UCW 100細(xì)胞、SCC VII細(xì)胞 Blotchy fibroblast-11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mevo細(xì)胞、OCI-AML-3細(xì)胞、UMC11細(xì)胞 T98-G細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-28細(xì)胞、D341 Med細(xì)胞、OV1/P細(xì)胞 Immortalized Human Hepatocytes細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-7721細(xì)胞、H-774細(xì)胞、CaES-17細(xì)胞 MDA2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WC00079細(xì)胞、LC1/Sq細(xì)胞、NCTC clone 1469細(xì)胞 ZR75-30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1522細(xì)胞、SCC VII細(xì)胞、HEC1-B細(xì)胞 MX1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BXPC3細(xì)胞、ASH-3細(xì)胞、Lu-65細(xì)胞 MB39細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mc Ardle 7777細(xì)胞、JROECL 19細(xì)胞、NIH-3T3-L1細(xì)胞 APRE-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuTu-80細(xì)胞、RAW2647細(xì)胞、OCI-LY-1細(xì)胞 ssMCF7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mc Coy細(xì)胞、NCI-H2106細(xì)胞、BEL/FU細(xì)胞 HCC-1806細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D324 Med細(xì)胞、RBL 2H3細(xì)胞、HCS2/8細(xì)胞 OV1-P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H740細(xì)胞、SK-ChA-1細(xì)胞、UPCI:SCC154細(xì)胞 A-704 epithelioid cells人腎癌細(xì)胞系 NCIH1838細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:High Five細(xì)胞、A-20細(xì)胞、RMS 1598細(xì)胞 L 132細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 8226細(xì)胞、H510細(xì)胞、NCIH2291細(xì)胞 MGc80-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hep 3B細(xì)胞、IOSE-29細(xì)胞、Vero-E6細(xì)胞 GM04671細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HONE-1細(xì)胞、C8D1A細(xì)胞、DR2R 1610細(xì)胞 "
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