"F-36P epithelioid cells骨髓增生異常綜合征細胞系 細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 正確的細胞復蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復蘇。那么,細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。 NT2D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GAK細胞、NL20SV細胞、D10細胞 WM115mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc203細胞、HTori-3.1細胞、UCLA RO-81A-1細胞 D-283 Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KALS1細胞、HCC1954 BL細胞、RA-FLSs細胞 細胞生長:貼壁 F-36P epithelioid cells骨髓增生異常綜合征細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 最近在培養(yǎng)細胞時,發(fā)現(xiàn)其狀態(tài)不是很好,很容易扎堆生長,用胰酶消化的時候也是一團一團地被消化下來,很難把它們吹散成一個一個細胞。而且長得也挺快也挺不均勻的,傳代的第二天,有些地方就長得滿滿的了。想請教一下這是為什么呢?你好,我養(yǎng)的細胞和你一樣,消化下來也是一團的,但吹打以后就沒有這樣的情況了。建議你分皿前還是要吹勻,分皿后在鏡下看一看,移動培養(yǎng)皿的時候盡量動作輕,避免晃動。細胞生長挺快,那么細胞的增殖能力應(yīng)該較強。胰酶消化成團的問題我覺得有以下幾種可能:一、細胞消化后吹打不均勻,造成細胞成團生長:二、細胞細化太過,細胞成片脫落,吹打時沒有受力點,細胞聚團生長。解決辦法:根據(jù)細胞生長的情況進行多次消化,將同次消化下來的細胞放在一個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)。貼壁細胞傳代培養(yǎng):一般步驟為:真空泵吸走培養(yǎng)基,1XPBS漂洗兩次,加入1mlEDTA-Tripsin(100mm皿為例),37度放置數(shù)分鐘,輕拍培養(yǎng)瓶使細胞自瓶壁脫落,加入適量血清,以吸管上下吸放數(shù)次以打散細胞團塊,離心后加入新鮮培養(yǎng)基,按比例轉(zhuǎn)移至新皿。細胞的傳代最重要的是胰酶處理時間,若胰酶處理太久,容易造成細胞貼壁不緊,顯微鏡下觀察立體感不強,嚴重的時候甚至會造成細胞死亡。我談?wù)剛€人經(jīng)驗:HepG-2、A549、Hela、SGC-7901幾種癌細胞處理時間可適當放長,一般處理5-6min,C2C12、COS-7、NIH-3T3比較容易脫落,2min足矣,P19Cl6和293細胞貼壁不緊,可在PBS漂洗后,直接換新鮮培養(yǎng)基打散。 細胞傳代方法:每周2次換液 PLC/PRF5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 510細胞、SUPB15細胞、LC1sq細胞 MDA-MB 231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT 116細胞、UM-UC-1細胞、HCC1806細胞 Hs852細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FDCP1細胞、OCI-AML4細胞、PC-3M細胞 CCD-19Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTh74細胞、Pt K1 (NBL-3)細胞、H358細胞 RASMCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U2932細胞、JIMT1細胞、SKNBE2C細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 F-36P epithelioid cells骨髓增生異常綜合征細胞系 細胞生長特性:貼壁或懸浮,詳見細胞說明書部分 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。 GA10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-322細胞、HCT116/L細胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細胞 OCI-Ly7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK 49F細胞、HFT 8810細胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞 LC-1/sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 10.05細胞、Scott細胞、EC-GI細胞 Hs 729T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA175細胞、3T3-F442A細胞、SW1463細胞 HEK293FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87-MG細胞、251MG細胞、B16F10細胞 NT2-D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Lewis Lung細胞、SK-MES細胞、A253細胞 RDES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC-4B/C細胞、CD 18細胞、BT 549細胞 NCI-H650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK 1細胞、COLO394細胞、Hs 600.T細胞 CL-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞、MGH-U3 (RN)細胞、RC13細胞 RTMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL 45細胞、J-111細胞、KMH-2細胞 F-36P epithelioid cells骨髓增生異常綜合征細胞系 H647細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS-273細胞、FRhK4細胞、Reuber-H-35 hepatoma細胞 H-1436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PNT1/A細胞、SUM-52-PE細胞、Hca-F細胞 MDA-MB436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-795細胞、X63Ag8.653細胞、Colon 38細胞 Pro-5WgaRI3C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-423細胞、NCIH69細胞、Hs 934.T細胞 PT-67細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sp 2/0-Ag 14細胞、C666-1細胞、NCI-SNU-620細胞 EMT6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NT-2細胞、OVCAR 4細胞、P3-X63-Ag 8.653細胞 P3.times.63 Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE-520細胞、NCI.H460細胞、MM1-S細胞 MEL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS411細胞、QGP1細胞、TE 85 ClF-5細胞 KY-50細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL MC/9細胞、NCI-SNU-407細胞、Hs 606細胞 HEC-251細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM17346細胞、SV40-MES13細胞、MDA-MB361細胞 SKMEL-31細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOMO1細胞、EST81細胞、b.End3細胞 OUMS-23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:210RCY3-Ag1.2.3細胞、SF 763細胞、COLO206F細胞 C17.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U 138 MG細胞、Eca109細胞、U266S細胞 HFL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF-SB細胞、RCC10RGB細胞、H196細胞 RMG-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMCB細胞、C3H-10T1/2細胞、293T/17細胞 GS9L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mouse INsulinoma 6細胞、RAMOS2G64C10細胞、RGE細胞 CFPAC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PJ34細胞、143B TK-細胞、G-402細胞 JF305細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT115細胞、HT22細胞、HTh74細胞 NCI-H498細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPE1-hTERT細胞、B16 subline B78細胞、22Rv-1細胞 CAL 78細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-387細胞、U138-MG細胞、MB49細胞 NCI-747細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos-2G6-4C10細胞、CHG5細胞、FRO81-2細胞 TGW-I-nu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOK細胞、N1E-115細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞 OCIAML5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Leukemia 1210細胞、HS-294細胞、HEL-92-1-7細胞 LA-N-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP-62細胞、B16F10細胞、CHG-5細胞 HCC-95細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit-225細胞、HDQ-P1細胞、DMS-273細胞 HFT 8810細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-85-1細胞、MPC 11細胞、HEC-151細胞 I90細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES 13細胞、SW1463細胞、INS-1細胞 HEYA8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs675T細胞、SJRH30細胞、FET細胞 HOC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC 25細胞、Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞、H-2023細胞 LICR-LON-HN6-R細胞系相關(guān)產(chǎn)品:751細胞、VM-CUB-1細胞、IGR.OV1細胞 COLO684細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GP5d細胞、MDA134細胞、SNUC1細胞 Hs 819.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPVECs細胞、NU-GC-3細胞、M3 Clone M-3細胞 H-676B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCCLM3細胞、MN-9D細胞、NT2-D1細胞 LOU-NH91細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-33細胞、MDA-MB-468細胞、RINm-5F細胞 NCIH2452細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-3細胞、NMCG1細胞、HPMEC細胞 SK-Mel 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GMK,BSC-1細胞、YAC細胞、Tb 1 Lu細胞 Calu-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GTL-16細胞、SW-13細胞、GM06141細胞 MDCC-MSB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA10細胞、CHO Lec1細胞、KE-37細胞 KCL-22細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Central Adrenergic TH-expressing a細胞、MKN28細胞、SaOS細胞 OCI AML4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF細胞、H-1770細胞、T-HEECs細胞 RBL-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PFSK1細胞、B16細胞、Institute for Medical Research-32細胞 H28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1618細胞、HOK細胞、V79-GalK1細胞 COLO-684細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 273細胞、NCI-SNU-668細胞、Hs852細胞 NS653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1869細胞、LAPC-4細胞、PLA-802細胞 H1770細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-209細胞、HuH1細胞、Ku812細胞 SUM102PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-920細胞、TE 354.T細胞、Chang liver細胞 NIH3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGH-U1細胞、266 Bl細胞、TE-4細胞 H9c2(2-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFE296細胞、PLCPRF5細胞、HCC0044細胞 Medical University of Graz-Chordoma 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEH2細胞、CA46細胞、B95-8細胞 CG-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 4.03細胞、K562/ADP細胞、H647ell細胞 R 1610細胞系相關(guān)產(chǎn)品:E0771細胞、PA1細胞、MLE12細胞 F-36P epithelioid cells骨髓增生異常綜合征細胞系 LN229細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 870.T細胞、H647ell細胞、Swiss3T3細胞 Malme3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1993細胞、HT clone H9細胞、C17.2細胞 A549/DDP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2029細胞、G361細胞、Z310細胞 LC-1/sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 10.05細胞、JEG-3細胞、alpha TC1 clone 6細胞 "
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