"YH-13 epithelioid cells人腦膠質母細胞瘤細胞系 細胞背景資料:詳見相關文獻介紹 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞復蘇相關注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內使凍存液完全融化。如果復蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉速和時間,轉的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復蘇,結果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結為復蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候對一般細胞沒有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。 HCC44細胞系相關產品:NCIH358細胞、SF295細胞、ME1細胞 HUT125細胞系相關產品:MLE 12細胞、P3X63Ag8653細胞、32D clone3細胞 Duck embryo細胞系相關產品:ECC12細胞、SCLC21H細胞、Sp 2817細胞 細胞生長:貼壁 YH-13 epithelioid cells人腦膠質母細胞瘤細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞復蘇基本方法:1.從液氮罐中取出安剖;有時因安剖未封嚴,浸入了液氮,取出后因安剖內液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應帶有防護眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時搖動,盡快解凍。3.剪開紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺上打開蓋,用吸管吸出細胞懸液,裝入離心管中,再補加10ml培養(yǎng)液,吹打使細胞懸浮。4.低速離心(500~1000轉/分)5分鐘,取上清后再重復用培養(yǎng)液漂洗、離心。5.加入培養(yǎng)液適當稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T25 flask細胞時,處理方式為:在寄送過程中,為避免起泡造成細胞脫落死亡,T25 flask均加滿培養(yǎng)基。請檢查flask外觀,并于顯微鏡下觀察細胞生長狀況和有無污染現(xiàn)象,若有任何問題,不要打開蓋子,請立即通知細胞實驗室。將原封之T25 flask靜置于37°C,5%CO2培養(yǎng)箱中,使細胞回溫至37°C,并讓運送過程中少數(shù)脫落的細胞可再附著生長。隔天后,于無菌操作箱內取出flask內之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml培養(yǎng)基于flask內,依一般培養(yǎng)方式再將細胞置入培養(yǎng)箱中,或細胞已長滿盤,則將細胞做傳代培養(yǎng)。 細胞傳代方法:1:2傳代 MARC 145細胞系相關產品:CoCL2細胞、CP70細胞、T-T細胞 COLO679細胞系相關產品:EPC細胞、Hs-940細胞、SCH細胞 MDA157細胞系相關產品:Mink Lung細胞、T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞、UCLA NPA-87-1細胞 CL1-5細胞系相關產品:HuH-1細胞、HEp-2細胞、SW 626細胞 OCI/AML3細胞系相關產品:hRMECs細胞、Fetal Bovine Heart Endothelial細胞、PC.3細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 YH-13 epithelioid cells人腦膠質母細胞瘤細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:上皮細胞 培養(yǎng)細胞真的不難,最關鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數(shù),傳相應數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。 NCI-441細胞系相關產品:SGC-996細胞、HCC-1569細胞、A 253細胞 KMS26細胞系相關產品:Kuramochi細胞、NCI-441細胞、3T3 Swiss Albino細胞 HR1K細胞系相關產品:JB6 Cl 30-7b細胞、TM-4細胞、IB-RS2細胞 RPMI-7951細胞系相關產品:HDQP1細胞、SBC-3細胞、TC-1 [Mouse lung]細胞 Fetal Rhesus Kidney-4細胞系相關產品:IGR-OV1細胞、HOS TE85細胞、LAN-6細胞 H-1651細胞系相關產品:A431/P細胞、SC1細胞、LTEP-sm細胞 Hs 766.T細胞系相關產品:NCIH838細胞、HPMC細胞、HT 1376.T細胞 P3-NS1/1Ag 4.1細胞系相關產品:SIRC細胞、VERO C 1008細胞、H-2122細胞 BE(2)-C細胞系相關產品:NCI-H209細胞、MESSA/Dx5細胞、COLO679細胞 P815細胞系相關產品:SKMEL2細胞、NPA'87細胞、hFOB 1.19細胞 YH-13 epithelioid cells人腦膠質母細胞瘤細胞系 MDCKII-WT細胞系相關產品:MMAc-SF細胞、HRGEC細胞、JVM2細胞 EJ1細胞系相關產品:SUDHL2細胞、OVCA 433細胞、SW-1463細胞 SNB-19細胞系相關產品:LP1細胞、CCD18細胞、SKOV3細胞 SV40-MES13細胞系相關產品:KRC Y細胞、G519細胞、149 PT細胞 NCIH2085細胞系相關產品:Hs840T細胞、Mino細胞、IEC6細胞 P3HRI細胞系相關產品:SCL I細胞、CCF-STTG1細胞、MDST8細胞 HT1080細胞系相關產品:PK-13細胞、PANC.1細胞、OS-732細胞 TK 10細胞系相關產品:MC-116細胞、AG06814-N細胞、CAL851細胞 TFH細胞系相關產品:RAW 264.7細胞、NU-GC-2細胞、OCILY-10細胞 KMS11細胞系相關產品:B 95-8細胞、HCA-7細胞、RBMEC細胞 GC-1細胞系相關產品:Normal Rat Kidney-52E細胞、Hs 695T細胞、GM05372E細胞 Hs895.T細胞系相關產品:BMU-S1細胞、D10細胞、H1395細胞 CFPAC細胞系相關產品:NCIH524細胞、HEL9217細胞、DMS-153細胞 H-1581細胞系相關產品:NCI-H841細胞、HLE細胞、YH細胞 TE-3A細胞系相關產品:COLO 741細胞、GM06141B細胞、SuperTube細胞 NKM-1細胞系相關產品:ZYM-SVEC01細胞、SCL-1細胞、Roswell Park Memorial Institute 1788細胞 NCIH747細胞系相關產品:SK Mel 1細胞、RFL-6細胞、U266BL細胞 H-1563細胞系相關產品:NCI-H2023細胞、MIN6細胞、NCIH1568細胞 H1734細胞系相關產品:H-250細胞、211H細胞、BE2C細胞 GB1細胞系相關產品:COLO 680N細胞、HL1細胞、rUCMSCs細胞 SW 527細胞系相關產品:UMUC-3細胞、H1435細胞、A375-S2細胞 MCF 10A細胞系相關產品:OCI-Ly01細胞、HBdSMC細胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞 KYSE 450細胞系相關產品:Med 283細胞、WM239細胞、SNU354細胞 TE 671細胞系相關產品:SCC15細胞、RT4細胞、SACCLM細胞 H-2029細胞系相關產品:NCTC-929細胞、UM-UC3細胞、SK MES 1細胞 SUDHL-6細胞系相關產品:MCF-10 Attached細胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞、RGC-5細胞 SNU620細胞系相關產品:NCI-H196細胞、NCI-H1838細胞、DU-145細胞 Mouse INsulinoma 6細胞系相關產品:U251MG細胞、H1436細胞、WI38細胞 TE-12細胞系相關產品:SKNBE細胞、U2-OS細胞、SuDHL 1細胞 NIT-1細胞系相關產品:NPA 87細胞、Co-115細胞、HCC202細胞 H-2009細胞系相關產品:NTera 2細胞、SJSA-1細胞、Caco2-BBE細胞 MDA-MB453細胞系相關產品:CCD966SK細胞、NCI-H1734細胞、NCIH2135細胞 hTERT RPE1細胞系相關產品:RPMI-8226細胞、MHCC97-H細胞、H-2108細胞 HEK293S細胞系相關產品:Michigan Cancer Foundation-12A細胞、SUM149PT細胞、LNCaP.FGC細胞 GOTO細胞系相關產品:MTC-TT細胞、OV 1063細胞、KRC-Y細胞 SK-OV-3細胞系相關產品:WM-239-A細胞、TCMK1細胞、NCIH2405細胞 MLFC細胞系相關產品:Murine Carcinoma-38細胞、Karpas422細胞、MM1細胞 MCF 10A細胞系相關產品:OCI-Ly01細胞、HBdSMC細胞、University of Michigan-Renal Carcinoma-2細胞 TR 146細胞系相關產品:SW1222細胞、SNB19細胞、KM H-2細胞 H2172細胞系相關產品:alphaTC clone 6細胞、Med 341細胞、MKN74細胞 L-02細胞系相關產品:H4IIE細胞、H-2330細胞、ECC 12細胞 Wien133細胞系相關產品:CHL-CL-11細胞、BALL1細胞、LTEP-a2細胞 ID8細胞系相關產品:IPI-2I細胞、RA 1細胞、FHs 74 Int細胞 NP-69細胞系相關產品:H-4-II-E細胞、Huh7.5細胞、NCIH1105細胞 LNCaP clone FGC細胞系相關產品:Centre Antoine Lacassagne-51細胞、H2330細胞、JKT-1細胞 Hos TE-85細胞系相關產品:MS1細胞、H650細胞、ACC3細胞 BC-3H-1細胞系相關產品:H766T細胞、BALB/3T3 (clone A31)細胞、MCA 205細胞 BJA-B細胞系相關產品:Y3Ag1.2.3細胞、NE-1細胞、BC-020細胞 hUC-MSC細胞系相關產品:NCIH378細胞、CHO-ori細胞、MXI細胞 OCI-Ly1細胞系相關產品:THPI細胞、Mahlavu細胞、HCC1500細胞 BLO-11細胞系相關產品:3T3-Swiss細胞、MCF 7B細胞、16HBE細胞 YH-13 epithelioid cells人腦膠質母細胞瘤細胞系 Vero 76細胞系相關產品:SK-N-BE(1)細胞、HM細胞、PG-4 S+L-細胞 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