"VCaP epithelioid cells人前列腺癌細胞系 細胞背景資料:1997從一位不受激素影響的前列腺癌患者脊椎轉(zhuǎn)移灶中建立了這株細胞。先在小鼠中進行異種移植傳代,隨后進行體外培養(yǎng)。體內(nèi)及體外都對雄性激素敏感。 細胞形態(tài):上皮細胞樣 正確的細胞復(fù)蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復(fù)蘇。那么,細胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應(yīng)在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復(fù)蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復(fù)蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復(fù)蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。 4T1.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHG-44細胞、143 B細胞、Colon26細胞 Duke University 4475細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-190PT細胞、EM3細胞、CMT64細胞 WSUDLCL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HPF-1細胞、TE 32細胞、LAN5細胞 細胞生長:貼壁 VCaP epithelioid cells人前列腺癌細胞系 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 為了防止因污染或技術(shù)原因使長期培養(yǎng)功虧一簣,考慮到培養(yǎng)細胞因傳代而遲早會出現(xiàn)變異,有時因寄贈、交換和購買,培養(yǎng)細胞從一個實驗室轉(zhuǎn)運到另一個實驗室,的策略是進行低溫保存。這對于維持一些特殊細胞株的遺傳特性極為重要?,F(xiàn)簡要介紹深低溫保存法(-70℃~-196℃)的特點。細胞深低溫保存的基本原理是:在-70℃以下時,細胞內(nèi)的酶活性均己停止,即代謝處于完全停止狀態(tài),故可以長期保存。細胞低溫保存的關(guān)鍵,在于通過0~20℃階段的處理過程。在此溫度范圍內(nèi),水晶呈針狀,極易招致細胞的嚴重損傷。凍存細胞的復(fù)蘇:凍存細胞較脆弱,要輕柔操作。凍存細胞要快速融化,并直接加入完全生長培養(yǎng)基中。若細胞對凍存劑(DMSO或甘油)敏感,離心去除凍存培養(yǎng)基,然后加入完全生長培養(yǎng)基中。直接鋪板方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;直接用完全生長培養(yǎng)基鋪板細胞。1ml凍存細胞使用10~20ml完全生長培養(yǎng)基。進行活細胞計數(shù),細胞接種應(yīng)該至少在3×10(5)活細胞/ml;培養(yǎng)細胞12到24小時,更換新鮮的完全生長培養(yǎng)基,去除凍存劑。離心方法:取出貯存細胞,37℃水浴中快速融化;把1到2ml凍存細胞加入到大約25ml完全生長培養(yǎng)基,輕輕混勻;以大約80x離心2到3分鐘;棄去上清。在完全生長培養(yǎng)基輕輕再次懸浮細胞,并且進行活細胞計數(shù)。細胞鋪板,細胞接種應(yīng)該至少為3×10(5)活細胞/ml。細胞的分化:一個成年人全身細胞總數(shù)約1012個,可以區(qū)分為200多種不同類型的細胞:形態(tài)結(jié)構(gòu),代謝,行為,功能等各不相同。追根溯源,這么多種細胞均來自一個受精卵細胞。所以,通常把發(fā)育過程中,細胞后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能上發(fā)生差異的過程稱為細胞分化。細胞分化發(fā)生在胚胎階段,也發(fā)生在胎兒出生以后,乃至成人階段。例如,人體血細胞的產(chǎn)生和分化,這個過程在人的一生中一直持續(xù)著。由旺盛生長不斷分裂的細胞,轉(zhuǎn)入分化,通常從細胞周期中G1期開始時一個確定的點G0點“逃逸”出細胞周期。旺盛生長分裂的細胞和各種分化了的細胞,它們的基因表達和代謝活動各不相同。 細胞傳代方法:消化3-5分鐘。1:2。3天內(nèi)可長滿。 Madin Darby Bovine Kidney細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LU65細胞、JB6 [Mouse]細胞、H1623細胞 MSF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2227細胞、U87-MG細胞、Panc 10.05細胞 OUMS23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA795細胞、WEHI-164細胞、Panc 03.27細胞 HS5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:huH 1細胞、PLB985細胞、COLO829細胞 H-2107細胞系相關(guān)產(chǎn)品:rUCMSCs細胞、HDQP1細胞、H-1688細胞 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 VCaP epithelioid cells人前列腺癌細胞系 細胞生長特性:貼壁生長 細胞形態(tài)特性:上皮細胞 常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導(dǎo)致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復(fù)蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應(yīng)待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。 HT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM35細胞、MIHA細胞、SNU1細胞 NMCG1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBVSMC細胞、SaOS-2細胞、HEK-EBNA細胞 HLEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:50.B1細胞、HEK293A細胞、KE-39細胞 KE37細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2107細胞、J111細胞、M14細胞 8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-15細胞、H-1930細胞、NCI H295R細胞 NCIH1623細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC5細胞、PLA801-95D細胞、HRA19細胞 OVCAR-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:R 1610細胞、Lieming Xu-2細胞、VSC4.1細胞 Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LIM 1215細胞、HMC-1細胞、HuH28細胞 NCI-H650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK 1細胞、COLO394細胞、Hs 600.T細胞 NCI-H2135細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DV90細胞、TGBC11T細胞、ISHI細胞 VCaP epithelioid cells人前列腺癌細胞系 KM-H2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMC-1細胞、CaSki細胞、KP-2細胞 F-36P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hepa 1-6細胞、NB9細胞、PLMVEC細胞 COR L279細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LAN-1細胞、BLO 11細胞、MDA-157細胞 B16BL-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MMQ細胞、Ca 9-22細胞、H1755細胞 SKML-28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CT26.CL25細胞、TE32細胞、PG13細胞 NSH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:THC-8307細胞、LA-N-6細胞、HEK 293 EBNA細胞 NSH細胞系相關(guān)產(chǎn)品:THC-8307細胞、LA-N-6細胞、HEK 293 EBNA細胞 D10.G4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP-126細胞、QGY-7703細胞、MDA-MB157細胞 BE2_C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJRH30細胞、HN4細胞、AE1201細胞 U-2 OS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL 1-0細胞、HSAS3細胞、MMQ細胞 SW-839細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY19細胞、H-87細胞、Hi5細胞 NCIH596細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tu-212細胞、NCIH2066細胞、CL1細胞 H22-H8D8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL1細胞、NCI-H69C細胞、HS-294-T細胞 CCRF SB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1355細胞、KTCTL-140細胞、A101D細胞 CTV1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Epithelioid Cell line No. 6細胞、NEC細胞、PANC.1細胞 PC-3M 2B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE510細胞、Reuber-H-35 hepatoma細胞、Transformed Human Liver Epithelial-2細胞 LAPC-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MESSA Dx5細胞、COR-L51細胞、B95.8細胞 BC-019細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR 8細胞、VMRC-RCZ細胞、Jurkat細胞 TFK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ID8細胞、H520細胞、HCC1143細胞 TFK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ID8細胞、H520細胞、HCC1143細胞 RPTEC/TERT 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RFL6細胞、NCIH1568細胞、Psi2 DAP細胞 MCF7-CTRL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK HEP-1細胞、RS411細胞、Caco-2細胞 Mouse podocyte細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC 813細胞、MEC-1細胞、L5178Y-R細胞 RBL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBVEC細胞、Hs 604.T細胞、GM00215細胞 OKa-C-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-1788細胞、C33細胞、N-87細胞 NCI-H1836細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GRSL細胞、WM 266-4細胞、Jurkat 77細胞 CCRF-CEM C7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:1301細胞、Colon 26細胞、Alexander細胞 Ra No. 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 852.T細胞、Li-7細胞、TCC-SUP細胞 PSN-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJ1細胞、NB-19細胞、293E細胞 NCI-H1781細胞系相關(guān)產(chǎn)品:253JBV細胞、NHEK細胞、ESC-410細胞 LN299細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat1細胞、ROS 17/28細胞、EB-1細胞 UK Pan-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPMEC細胞、DAN-G細胞、RBE4細胞 KBM-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KY-50細胞、GS-9L細胞、SK-N-MC細胞 8305C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MKN28細胞、NCI-H719細胞、SK-MEL2細胞 A 253細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P31 FUJ細胞、HFLS-RA細胞、FOXNY細胞 Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:QGY7701細胞、CNE-2細胞、PK (15)細胞 H3255細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC-4細胞、KP4細胞、KU-812F細胞 Tregs細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Epstein-Barr-3細胞、SCC9細胞、SKNBE2細胞 AsPC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF12A細胞、HCT-8/V細胞、LSECs細胞 NPC-TW039細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madison lung細胞、HCC-1954細胞、Ramos (RA)細胞 Malme3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1993細胞、MDCK2細胞、HEP3B2細胞 293 F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Huh-7.5.1細胞、RS4-11細胞、U87細胞 Hs832T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PA I細胞、SCL I細胞、mIMCD-3細胞 LU165細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WIL2-S細胞、hMSC-BM細胞、HCT 116細胞 Panc_02_03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-19細胞、HCC1954-BL細胞、KU1919細胞 M-NFS-60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACC-2細胞、EOL1細胞、Caco-2 BBe細胞 RCSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR.8細胞、H-2073細胞、LAN-5細胞 HCC-1569細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WSUDLCL2細胞、AN3 CA細胞、Hs606T細胞 Lu-99A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63 Ag8細胞、HPAF II細胞、CHO K1細胞 JAR細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SkChA-1細胞、BL1339細胞、HEL-92.1.7細胞 A-375細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H647ell細胞、A.704細胞、Hs683T細胞 VCaP epithelioid cells人前列腺癌細胞系 HFLS-OA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFF-1細胞、L5178-R細胞、COV 434細胞 Human Melanoma Cell Bowes細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jeko1細胞、J-774A.1細胞、SNU-520細胞 SK-RC-52細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SC細胞、CNE1-LUC細胞、NCIH209細胞 HLEC-SRA 01/04細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs675細胞、RS4:11細胞、IGROV1細胞 "
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