"SK-MES-1 epithelioid cells人肺鱗癌細胞系
細胞背景資料：源于一位６５歲患有肺鱗狀細胞癌的白人男性，自轉(zhuǎn)移性胸腔積液分離而來。
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
EU-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE-11細胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細胞、NCI-H1404細胞
KRC-Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Foreskin Fibroblast細胞、EAC細胞、Y3M細胞
OVCAR.4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF/CEM細胞、BeWo細胞、MDCC MSB1細胞
細胞生長：貼壁
SK-MES-1 epithelioid cells人肺鱗癌細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
血清必須貯存于–２０～-７０℃，若存放于４℃，請勿超過一個月。如果一次無法用完一瓶，可將４０～４５ml分裝于無菌５０ml離心管中，由于血清結(jié)凍時體積會增加約１０%，必須預(yù)留此膨脹體積之空間，否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無菌，不需再無菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物，則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾，勿直接過濾血清。瓶裝(５００ml)血清解凍步驟(逐步解凍法)：-２０℃或–７０℃至４℃冰箱溶解一天，至室溫下全溶后再分裝，一般以５０ml無菌離心管可分裝４０～４５ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡)，使溫度與成分均一，減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解凍，因溫度改變太大，容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于３７℃太久，若在３７℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會因此受到破壞，而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物：發(fā)生之原因有許多種，但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成，這些凝絮沈淀物不會影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物，可用離心３０００rpm，５min去除，或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物，因為會阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點”：通常經(jīng)過熱處理之血清，沈淀物的形成會顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點”，常會誤認為血清遭受污染，而將血清放在３７℃中欲培養(yǎng)此“微生物”，但在３７℃環(huán)境下，又會使此沈淀物增多，更會誤認為微生物之增殖，但以培養(yǎng)細菌之培養(yǎng)基檢測，又沒有污染。一般而言，此小黑點應(yīng)不會影響細胞之生長，但若懷疑此血清之品質(zhì)，應(yīng)立即停用，更換另一批號的血清。
細胞傳代方法：１：２傳代
SUM-190PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-F1細胞、Calu-1細胞、CWR22-R1細胞
IPAM-WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Mink細胞、Hs 822.T細胞、BEND細胞
EC-109細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HRIF細胞、P3-X63Ag8.653細胞、SUDHL-1細胞
LS 174 T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WILL2細胞、HepG2-luc細胞、MPP89細胞
RD 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SACCLM細胞、PANC-10-05細胞、COLO-HSR細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
SK-MES-1 epithelioid cells人肺鱗癌細胞系
細胞生長特性：貼壁生長
細胞形態(tài)特性：上皮樣
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴(yán)格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
NCI-H1650細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P30/0HK細胞、Normal fibroblast-10細胞、SKRC-42細胞
CL-34細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA134細胞、IOSE-29細胞、Hep 3B細胞
BC3 H1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-27細胞、Los Angeles Prostate Cancer-4細胞、LAC細胞
FL62891細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI-SG231細胞、SNU-601細胞、SNU-668細胞
PLC8024細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS-174T細胞、KYSE30細胞、Panc3_27細胞
F81細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UPCI-SCC-90細胞、Natural Killer-92細胞、BHK21細胞
X63Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT144mel細胞、Leydig細胞、SW-962細胞
B104 [Rat neuroblastoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C57/B6-L細胞、HHL5細胞、C166細胞
Hs27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K299細胞、OS-732細胞、HCC-44細胞
HCC 94細胞系相關(guān)產(chǎn)品：624mel細胞、SK-MEL 28細胞、hTERT RPE-1細胞
SK-MES-1 epithelioid cells人肺鱗癌細胞系
T-ALL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H716細胞、NCIH2342細胞、ReNcell CX細胞
High 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC 327細胞、MA104細胞、MKN7細胞
EU-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FUOV1細胞、ZYM-DIEC02細胞、HEK-293F細胞
BV-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKG IIIa細胞、INS1-E細胞、Mo7e細胞
BS-C-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U87-MG細胞、RCC-4細胞、H-1693細胞
HCC-2935細胞系相關(guān)產(chǎn)品：746T細胞、MOLT4細胞、253JBV細胞
hRPTC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC0504細胞、Medical Research Council cell strain-9細胞、KCL-22細胞
L-929細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SN12PM6細胞、HANK-1細胞、Hs.27細胞
KP-N-YN細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SW-954細胞、Bovine ENDometrial cells細胞、COV504細胞
NCIH187細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J774.A1細胞、CMT.64細胞、HMEC1細胞
HuNS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HHFK細胞、MPASMC細胞、ACHN細胞
H1573細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HUT 125細胞、OSK-1細胞、NK-10A細胞
WERI-Rb-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDLM-2細胞、RT112細胞、UM-UC-1細胞
CAL33細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI-1846細胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-1細胞、F-81細胞
H2106細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIMEC細胞、SW 403細胞、RCC-10RGB細胞
H-508細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLCPK1細胞、NCIH727細胞、University of Arizona Cell Culture-812細胞
B16-F10--RED細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3(A31)細胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞、HO-8910PM細胞
LS 180細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HT-1080細胞、MODE-K細胞、H-661細胞
293AD細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AHH-1細胞、GC-1spg細胞、UCLA-SO-14細胞
CHAGOK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Caov-3細胞、NCIH1417細胞、H322T細胞
VMRC-LCD細胞系相關(guān)產(chǎn)品：M059K細胞、NBL-S細胞、NCI-H1522細胞
OCI-LY-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MEC-1細胞、SKml2細胞、HIT細胞
HEK (AD293)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WI 38細胞、HT 1197細胞、BAEC細胞
NCM460細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Metastatic Variant 522細胞、Panc-02細胞、NCI-H774細胞
SW527細胞系相關(guān)產(chǎn)品：R3/1細胞、P3/NS-1細胞、RCM-1 [Human rectum adenocarcinoma]細胞
CAL851細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CPA 47細胞、SNU216細胞、hTERT-RPE-1細胞
PLB-985細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H676細胞、CAL 12細胞、KMH2細胞
H-747細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPC-Y5細胞、H727細胞、VMRC-LCD細胞
Walker 256細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-85-1細胞、GBC-SD細胞、BHP 10-3細胞
NCI-H522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SJCRH30細胞、RIN-m 14B細胞、H2170細胞
P3-NS1/1-Ag4-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NHLF細胞、NCI-H524細胞、Caco 2細胞
SKLMS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NTERA2D1細胞、ASPC1細胞、16-HBE14o細胞
HuH-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CEM-C7細胞、4-1st細胞、M-1 myeloid leukemia細胞
U266-B1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC0403細胞、SK-MEL-5細胞、Super Tube細胞
WM 239-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCP1細胞、H-2106細胞、TE353.SK細胞
V79-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM96L細胞、Capan1細胞、HEY-A8細胞
IPLB-Sf21AE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H378細胞、NCI-SNU-520細胞、hFOB細胞
KATO 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WTRL1細胞、L929細胞、HCC1438細胞
DLD-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC1419細胞、BGC-823細胞、LS1034細胞
SW1271細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BT325細胞、P3X63 AG8-653細胞、3T3L1細胞
TE-85 clone 5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TE6細胞、MRC-5細胞、FT-293細胞
OVCA-420細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RIN-m5F細胞、Fetal Rhesus Kidney-4細胞、Pa14C細胞
CHO-ori細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FL 62891細胞、X63-Ag 8.6.5.3細胞、HCASMC細胞
PK 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCC-MSB1細胞、HCC95細胞、Panc 3.27細胞
MLOY4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PC615.3細胞、GM346細胞、GM00346細胞
OVCAR3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BLO-11細胞、SNB.19細胞、NCI-H711細胞
SKRC-52細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VA-ES-BJ細胞、Ly19細胞、Sci-1細胞
MCF 7B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：J-111細胞、CCD 1112SK細胞、Hep 2細胞
SW 780細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-695-T細胞、H82sclc細胞、H-1734細胞
AE 1201細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ly10細胞、L-5178-Y細胞、SNU-1040細胞
CEM clone 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NKM-1細胞、BTI-TN5B1-4細胞、SW-620細胞
SK-MES-1 epithelioid cells人肺鱗癌細胞系
HCC-1438細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LN229細胞、PA I細胞、BpRcl細胞
NCI.H522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PG-4 (S+L-)細胞、TE32細胞、KYSE 140細胞
J-774細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMR 90細胞、ACC3細胞、SUIT-2細胞
BC3 H1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs-27細胞、COLO-679細胞、L2細胞
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關(guān)鍵字： SK-MES-1 epithelioid cells人肺鱗癌細胞系
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