"SK-LU-1 epithelioid cells人低分化肺腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:該細(xì)胞系源于一位60歲的白人女性患者的肺腺癌組織。 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍,使瓶?jī)?nèi)沒有血清了,減少對(duì)胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細(xì)胞有些消化下來(lái)時(shí),拿著瓶口,運(yùn)用手腕的力量輕輕震蕩瓶?jī)?nèi)液體,這樣細(xì)胞很快就下來(lái)了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團(tuán)、絮狀:消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團(tuán)的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進(jìn)口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細(xì)胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話,一般不需要進(jìn)行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強(qiáng),用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時(shí)要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時(shí)胰酶活性最強(qiáng))至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來(lái)的趨勢(shì)),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實(shí)驗(yàn),則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無(wú)血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細(xì)胞聚集成團(tuán)塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細(xì)胞,收集全部的細(xì)胞到以無(wú)菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過程中會(huì)死亡脫落,在換液的時(shí)候可以清除掉! RPTC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES13細(xì)胞、293A細(xì)胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細(xì)胞 HT115細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-AML-5細(xì)胞、SNU5細(xì)胞、SKMEL3細(xì)胞 MPC11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GalK 1細(xì)胞、H1238細(xì)胞、CF-PAC1細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 SK-LU-1 epithelioid cells人低分化肺腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 血清必須貯存于–20~-70℃,若存放于4℃,請(qǐng)勿超過一個(gè)月。如果一次無(wú)法用完一瓶,可將40~45ml分裝于無(wú)菌50ml離心管中,由于血清結(jié)凍時(shí)體積會(huì)增加約10%,必須預(yù)留此膨脹體積之空間,否則易發(fā)生污染或容器凍裂之情形。一般廠商提供之血清為無(wú)菌,不需再無(wú)菌過濾。若發(fā)現(xiàn)血清有許多懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)基內(nèi)一起過濾,勿直接過濾血清。瓶裝(500ml)血清解凍步驟(逐步解凍法):-20℃或–70℃至4℃冰箱溶解一天,至室溫下全溶后再分裝,一般以50ml無(wú)菌離心管可分裝40~45ml。在溶解過程中須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沈淀的發(fā)生。勿直接由–20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沈淀。勿將血清置于37℃太久,若在37℃放置太久,血清會(huì)變得混濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定之成份亦會(huì)因此受到破壞,而影響血清之品質(zhì)。血清凝絮物:發(fā)生之原因有許多種,但普遍之原因是血清中之脂蛋白(lipoprotein) 變性及解凍后血清中存在之血纖維蛋白(fibrin) 造成,這些凝絮沈淀物不會(huì)影響血清本身之品質(zhì)。若欲減少這些凝絮沈淀物,可用離心3000rpm,5min去除,或離心后上清液可以加入培養(yǎng)基中一起過濾。不建議用過濾步驟去除這些凝絮沈淀物,因?yàn)闀?huì)阻塞過濾膜。顯微鏡下觀察之“小黑點(diǎn)”:通常經(jīng)過熱處理之血清,沈淀物的形成會(huì)顯著的增多。有些沈淀物在顯微鏡下觀察像是“小黑點(diǎn)”,常會(huì)誤認(rèn)為血清遭受污染,而將血清放在37℃中欲培養(yǎng)此“微生物”,但在37℃環(huán)境下,又會(huì)使此沈淀物增多,更會(huì)誤認(rèn)為微生物之增殖,但以培養(yǎng)細(xì)菌之培養(yǎng)基檢測(cè),又沒有污染。一般而言,此小黑點(diǎn)應(yīng)不會(huì)影響細(xì)胞之生長(zhǎng),但若懷疑此血清之品質(zhì),應(yīng)立即停用,更換另一批號(hào)的血清。 細(xì)胞傳代方法:1:2傳代;每周換液2次。 HCC827細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 148細(xì)胞、CHO-S細(xì)胞、NTERA-2/D1細(xì)胞 MOLT16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774A1細(xì)胞、NCIH292細(xì)胞、NeHepLxHT細(xì)胞 UWB1.289細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:118MG細(xì)胞、NCIH196細(xì)胞、FD-LSC-1細(xì)胞 P3X63 Ag8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2291細(xì)胞、FCCH1024細(xì)胞、SU-DHL6細(xì)胞 293E細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:INS-1E細(xì)胞、LS 174 T細(xì)胞、SHP77細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 SK-LU-1 epithelioid cells人低分化肺腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng) 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項(xiàng):1)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,而收到時(shí)呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請(qǐng)將懸浮的細(xì)胞即時(shí)離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時(shí)原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員會(huì)跟進(jìn)解決;2)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細(xì)胞生長(zhǎng)密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長(zhǎng)不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長(zhǎng),可將細(xì)胞進(jìn)行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。 Panc-08.13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4-I細(xì)胞、Normal Rat, August 3, 1983細(xì)胞、MCF 7細(xì)胞 KU19-19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEPa2細(xì)胞、GalK1細(xì)胞、PLB-985細(xì)胞 WRL-68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS411細(xì)胞、MeT-5A細(xì)胞、SUDHL-5細(xì)胞 Murine Thymic Epithelial Cell line 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-84細(xì)胞、Lilly Laboratories Cell-Porcine Kidney 1細(xì)胞、PA I細(xì)胞 Alexander細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPLB-SF-21-AE細(xì)胞、95D細(xì)胞、Sp2/0-Ag-14細(xì)胞 Y3Ag1.2.3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKLMS1細(xì)胞、SNU16細(xì)胞、MDA MB 361細(xì)胞 UM-UC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC1A細(xì)胞、H1299細(xì)胞、HD-LM-2細(xì)胞 AN-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U373MG細(xì)胞、COLO 320細(xì)胞、HCM細(xì)胞 Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-172MG細(xì)胞、Tu177細(xì)胞、HCC-1419細(xì)胞 Kasumi-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI-3B細(xì)胞、HS578細(xì)胞、OVCA 420細(xì)胞 SK-LU-1 epithelioid cells人低分化肺腺癌細(xì)胞系 KYSE 520細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2122細(xì)胞、RC-4B/C細(xì)胞、NCIH889細(xì)胞 TM3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRCEC細(xì)胞、NS653細(xì)胞、HSC-1細(xì)胞 SKOV-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT 3細(xì)胞、MADB-106細(xì)胞、G-292細(xì)胞 NCI-H508細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-H細(xì)胞、NCI660細(xì)胞、JVM3細(xì)胞 SUD6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1623細(xì)胞、RCS細(xì)胞、Walker-256-TC細(xì)胞 2PK-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OC-3-VGH細(xì)胞、MLA 144細(xì)胞、A 2780 CP細(xì)胞 2PK-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OC-3-VGH細(xì)胞、MLA 144細(xì)胞、A 2780 CP細(xì)胞 HCT/FU細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 27細(xì)胞、Panc-1-P細(xì)胞、HUVSMC細(xì)胞 Panc02細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P815細(xì)胞、KTA-7細(xì)胞、CHOS細(xì)胞 WEHI-279細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P31FUJ細(xì)胞、LICCF細(xì)胞、PC14細(xì)胞 MA-c細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H69/P細(xì)胞、UMUC-3細(xì)胞、Alexander cells細(xì)胞 HCC1359細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL2細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞、LL/2 (LLC1)細(xì)胞 JB6 Cl 30-7b細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-ALL-1細(xì)胞、Jurkat-77細(xì)胞、NCI-H2030細(xì)胞 SNU878細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L cell細(xì)胞、CMECs細(xì)胞、A-875細(xì)胞 YD15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs940T細(xì)胞、Emory University-2細(xì)胞、SKNO-1細(xì)胞 OVCAR-420細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LICR-HN-6細(xì)胞、MDA435細(xì)胞、SNU-216細(xì)胞 H-1299細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T98G細(xì)胞、P116細(xì)胞、MFE 296細(xì)胞 SK-N-BE(1)n細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NSC34細(xì)胞、H-2023細(xì)胞、EAHY-926細(xì)胞 RIN m5F細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2141細(xì)胞、ROS-17/2.8細(xì)胞、SF 295細(xì)胞 PIG3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 29細(xì)胞、786-O RCC細(xì)胞、JURKAT E-61細(xì)胞 LY-R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EJ1細(xì)胞、A498細(xì)胞、Colon-26細(xì)胞 Hs888 Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NE-4C細(xì)胞、NTERA-2 cl.D1細(xì)胞、Ca9-22細(xì)胞 SF 763細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM2131細(xì)胞、RD細(xì)胞、HT-29細(xì)胞 Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AGS細(xì)胞、P388.D1細(xì)胞、P3X63 AG8-653細(xì)胞 GOS-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-837細(xì)胞、8305C_1細(xì)胞、OV-90細(xì)胞 HS 683T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H522細(xì)胞、U266細(xì)胞、3T3-Swiss細(xì)胞 PLA801C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MBT-2細(xì)胞、CCD-19Lu細(xì)胞、Experimental Mammary Tumour-6細(xì)胞 COLO-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 766T細(xì)胞、OACP4 C細(xì)胞、Hs-675-T細(xì)胞 MEC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF-I細(xì)胞、HCC-2935細(xì)胞、NCI-H889細(xì)胞 B16 BL6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KOSC2細(xì)胞、HeLa/S3細(xì)胞、Jurkat-77細(xì)胞 AZ521細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T6 Swiss Albino細(xì)胞、X63Ag8-653細(xì)胞、Uhth-74細(xì)胞 NHRF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-341 Med細(xì)胞、MB 157細(xì)胞、IOSE 29細(xì)胞 H-220細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cor L51細(xì)胞、SV-HUC-1細(xì)胞、PK 15細(xì)胞 A253細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPE-hTERT細(xì)胞、ME16C細(xì)胞、LED-WiDr細(xì)胞 GRSL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Granta519細(xì)胞、DBTRG-05MG細(xì)胞、NCI-H1836細(xì)胞 TC-1[JHU-1]細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML5細(xì)胞、BEL/FU細(xì)胞、MLA 144細(xì)胞 OCILY-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-X63-Ag8-653細(xì)胞、WM 239A細(xì)胞、Cor L51細(xì)胞 293 HEK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FAO-1細(xì)胞、Huh 7.5細(xì)胞、Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞 293 HEK細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FAO-1細(xì)胞、Huh 7.5細(xì)胞、Sp 2/0-Ag 14細(xì)胞 293GP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT.549細(xì)胞、H-23細(xì)胞、R3/1細(xì)胞 HEYA8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs675T細(xì)胞、SJRH30細(xì)胞、FET細(xì)胞 MCMEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IB-RS2細(xì)胞、HUT28細(xì)胞、PC-3/M細(xì)胞 SNU5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-C2B細(xì)胞、Hela-Ap-1細(xì)胞、HEK 293-EBNA細(xì)胞 LC1/Sq細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 822.T細(xì)胞、Be-Wo細(xì)胞、HCC-1806細(xì)胞 AG 9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos-RA1細(xì)胞、IAR20細(xì)胞、NCIH345細(xì)胞 MKN 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCAEC細(xì)胞、COR-L279細(xì)胞、JEG-3細(xì)胞 H1688細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T/G HA 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