"H22-H8D8 Cell:小鼠肝癌細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：肝癌
NCI-H209細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RA.1細胞、H1693細胞、KBM-7細胞
AGS細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Glioma 261細胞、B 95.8細胞、H-596細胞
HCC0044細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C-4 I細胞、Hs 852.T細胞、VERO76細胞
L cell line細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IBMF-7細胞、Hs839T細胞、SUM102PT細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
H22-H8D8 Cell:小鼠肝癌細胞系
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系，大部分的細胞都是要成片生長的，尤其是對于貼壁細胞，單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話，傳代后細胞是不能貼壁的，這樣抱團的細胞就會死亡。所以，消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài)，這個啊是非?？季磕愕墓Ψ虻?！細胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個，因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開，受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊，這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來，又不能太過，一吹就整片脫落，要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-２細胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到７０%左右的時候就要傳代了，一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞，你在洗的時候如果是用無血清１６４０去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣，用１６４０培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話，可以用PBS來洗，洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的，對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清，防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先，是很關(guān)鍵的一點。先補充這么多，還會后續(xù)更新。再補充一點：傳代時PBS洗是很重要的一步，最近發(fā)現(xiàn)，用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置１０-１５分鐘，有些需要更長的時間，等到細胞一個個分離開來的時候，就可以直接吹打下來，但是和胰酶消化一樣，要控制好時間，不能時間太過了，要不然損傷細胞，細胞不容易成活，狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候，或者臨時沒有胰酶了，可以選用此方法。不過一定要試試，看是否適合你的細胞。
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散；３)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細胞密度達到８０%以后重復１項操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
NCIH1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LS 1034細胞、IEC18細胞、Opossum Kidney細胞
CHP-212細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RGM-1細胞、NCl-H157細胞、P3-X63-Ag8-6-5-3細胞
PL12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：16HBE140細胞、PA-TU-8988S細胞、HIBEpiC細胞
Panc_03_27細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780/Taxol細胞、Strain KB細胞、GP293細胞
SK HEP 01細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HcaF細胞、Wien-133細胞、CAMA-1細胞
細胞生長特性：半貼壁
H22-H8D8 Cell:小鼠肝癌細胞系
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的細胞先脫落，對腫瘤細胞來說，這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點，直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積１/１０v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細胞！
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
COV434細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SRS-82細胞、NWA細胞、FL83B細胞
373MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：624 MEL細胞、ARPE19細胞、HMEL細胞
A 375細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs 746T細胞、MCF-7/ADR細胞、451Lu細胞
SMMC7721細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTLA4Ig-24細胞、C-6細胞、GM07404細胞
F-81細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BIC細胞、WM266細胞、X63細胞
HCC-366細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH2591細胞、A 549細胞、LC-1細胞
MES-SA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF-12A細胞、SUNE 1細胞、6-10B細胞
H22-H8D8 Cell:小鼠肝癌細胞系
alphaTC clone 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L細胞、PK(15)細胞、Hs 683.T細胞
MFD-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LAPC-4細胞、JHH-7細胞、MC3T3-E1 Subclone 24細胞
CL1-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuH-1細胞、HEp-2細胞、SW 626細胞
H-889細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1930細胞、NS-I/1細胞、SCL-1細胞
SNU668細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Malme-3M細胞、H-446細胞、DU 4475細胞
MGC803細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A2780-CP細胞、SK-GT-4細胞、CEM細胞
RPMI-1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs940.T細胞、NCI-HUT-125細胞、HUASMC細胞
AMO1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO-AS-45-1細胞、MHCC 97-L細胞、OPM2細胞
HSF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H10T1/2 clone8細胞、MGECs細胞、NCIH2106細胞
HSF細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C3H10T1/2 clone8細胞、MGECs細胞、NCIH2106細胞
HEL 299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2085細胞、MM.1S細胞、L-5178-Y細胞
CTLL2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa-S3細胞、CCRF SB細胞、NCI-H125細胞
DLD1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AgC11x3A細胞、Roswell Park Memorial Institute 1846細胞、Mahlavu細胞
IGROV 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HDF-a細胞、NCI-Hut 125細胞、OLN-93細胞
MRC-V細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Pancreatic Duct Epithelial細胞、HSC 3細胞、HO8910細胞
H-1915細胞系相關(guān)產(chǎn)品：S180細胞、NPC-TW039細胞、Pt-K2細胞
MDA-MB-468-RED細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM346細胞、Medical Research Council cell strain-5細胞、Me Wo細胞
SU8686細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BRL3A細胞、PANC-28細胞、LuCL4細胞
HT(H9)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Jurkat E6-1細胞、PLA-801C細胞、CG-4細胞
TE4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKO_AS45細胞、SNB-19細胞、BrCL18細胞
Dami細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1954細胞、SK-NMC細胞、U-138MG細胞
Hs 578.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OUMS-23細胞、CT26WT細胞、UMUC-14細胞
H211細胞系相關(guān)產(chǎn)品：UCLA-SO-M21細胞、HCa/16A3-F細胞、HGE細胞
T98 G細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Colon38細胞、MMQ細胞、32D.cl3細胞
Y1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CaSki細胞、28SC細胞、LS-123細胞
TE8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RASMC細胞、NKM-1細胞、PLA-801D細胞
COLO 824細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KY-270細胞、NP-69細胞、HEK293-EBNA細胞
CEM-C7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL120細胞、NOMO-1細胞、Farage OL細胞
EOMA細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/NSI/1-AG4-1細胞、OB2細胞、H-548細胞
HMO6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NG 108-15細胞、CNE2Z細胞、H-378細胞
293c18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH23細胞、UO31細胞、BC-023細胞
MHCC-97細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-343細胞、LL2細胞、PTK-1細胞
H1385細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM.1S細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞、HeLa229細胞
beta-TC6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BCPAP細胞、TE3細胞、Normal Rat Kidney-52E細胞
H1385細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MM.1S細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-175-VIII細胞、HeLa229細胞
H-2330細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Soleus clone 8細胞、RL-952細胞、HEK293FT細胞
MCF10-A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME-1 [Human leukemia]細胞、SNU387細胞、SNU251細胞
H-660細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3X63細胞、WM266mel細胞、Y3-Ag123細胞
A2780CP70細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3 NS1 Ag4/1細胞、THLE2細胞、B16 melanoma細胞
NCIH1568細胞系相關(guān)產(chǎn)品：THEECs細胞、118 MG細胞、RPMC細胞
NCIH1568細胞系相關(guān)產(chǎn)品：THEECs細胞、118 MG細胞、RPMC細胞
Mono Mac6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：138 MG細胞、KATOIII細胞、SCC-9細胞
HCe-8693細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM-16細胞、UACC893細胞、OCIAML5細胞
H22-H8D8 Cell:小鼠肝癌細胞系
HCASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NR-8383細胞、J-774細胞、MA-104細胞
Human Embryonic Kidney 293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：My-La 2059細胞、NKL細胞、NKL細胞
L-M(TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GB-1細胞、BALB/3T3細胞、KMM1細胞
KP-N-RT-BM-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCIAML3細胞、KAT5細胞、578T細胞
H711細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IMCD-3細胞、SW 982細胞、MGHU3細胞
Ramos(RA1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPEC-J2細胞、SK-Mel 2細胞、COLO320/DM細胞
OCILY3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Madison細胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細胞、HEK AD293細胞
D341細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hFOB1.19細胞、CAL-120細胞、KASUMI6細胞
CA922細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLT4細胞、Mv.1.Lu細胞、SK-N-SH細胞
2V6.11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：IPLB-Sf21AE細胞、NCIH1299細胞、WC00044細胞
CF PAC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WSU-DLCL(2)細胞、NCI-H841細胞、TE12細胞
CAKI 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCI Ly10細胞、Microbiological Associates-104細胞、HuTu 80細胞
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