"MLE-12 Cell:小鼠肺上皮細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：肺；上皮細胞；SV４０轉(zhuǎn)化；FVB/N
HDLM-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC-97細胞、D407細胞、H2106細胞
THLE-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞、EBC-1細胞、NPC-TW039細胞
HEK-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos 2G6.4C10細胞、OCI-Ly19細胞、NPA'87細胞
MM1.S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TKB1細胞、LM8細胞、V-79細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
MLE-12 Cell:小鼠肺上皮細胞系
細胞的凍存：目前，細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法，主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。主要操作步驟為：(１)選擇處于對數(shù)生長期的細胞，在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉，用０.２５%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶，加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞，使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(１０００r/min，１０分鐘)。(２)去上清液，加入含２０%小牛血清的完全培養(yǎng)基，于４℃預(yù)冷１５分鐘后，逐滴加入已無菌的DMSO或甘油，用吸管輕輕吹打使細胞均勻，細胞濃度為３×１０(６)～１×１０(７)/mL之間。(３)將上述細胞分裝于安瓿或?qū)Ｓ美鋬鏊芰瞎苤?，安瓿裝１～１.５mL在火焰噴燈上封口，封口處要完全封閉，圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊，并標(biāo)記好細胞名稱和凍存日期，同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(４)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜，次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟：先將安瓿置入４℃冰箱中２～３小時，再移至冰箱冷凍室內(nèi)３～４小時，再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放２小時，最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存，但為妥善起見，凍存半年后，取出一只安瓿細胞復(fù)蘇培養(yǎng)，觀察生長情況，然后再繼續(xù)凍存。
細胞產(chǎn)品包裝：復(fù)蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
培養(yǎng)細胞真的不難，最關(guān)鍵幾點：１)所有的東西使用，如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的，真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞；２)動作要快，胰酶消化，換液什么，細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外，要掌握好胰酶消化時間，所謂的細胞狀態(tài)差，很多時候是傳代的原因；３)有時間的話，需要細胞計數(shù)，傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中，可以大致清楚細胞的生長曲線，不會臨時要處理，手足無措；４)要做什么心里要非常清楚，合理安排時間，傳代細胞的實驗穿插進行，可以節(jié)省很多時間，也不會耽誤別人的實驗；５)個人的實驗器具自己收一套，不要和別人混用，最近換了什么新的東西稍微記一下，試劑一旦懷疑污染，馬上丟；６)傳代細胞不能進去太多人，避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心，那真是捧在手里怕碎了，含在嘴里怕化了，看在眼里怕丟了，培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?１)嚴格無菌操作，多噴噴酒精，要是對滅菌的東西不放心，自己包自己送自己烘干；２)不要和別人共用試劑耗材，自己準(zhǔn)備一套；３)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測；４)水浴鍋很臟，生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟，勤換(滅菌水加進去)；５)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外，超凈臺是用完就開；６)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
C3H-10T1/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUTZ-3細胞、ATN1細胞、Hs 281.T細胞
NUGC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-735細胞、MOLT 16細胞、HTR-8/SV neo細胞
UACC893細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-841細胞、HEK-293FT細胞、CCRF-CEM/S細胞
MOLT.4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H295細胞、A2780S細胞、DCS細胞
Human Fetal Thymocyte-8810細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HCC-1569細胞、H-69細胞、KATO III細胞
細胞生長特性：貼壁
MLE-12 Cell:小鼠肺上皮細胞系
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項：１.取細胞的過程中注意帶好防凍手套，護目鏡。此項尤為重要，細胞凍存管可能漏入液氮，解凍時凍存管中的氣溫急劇上升，可導(dǎo)致爆炸。２.凍存液的問題：凍存液的配置已是常識，在這里不作詳述，但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用，在常溫下，二甲基亞砜對細胞的毒副作較大，因此，必須在１-２min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢，會造成細胞的損傷，二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。３.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高，注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度，以減少對細胞的損傷。４.離心問題：目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng)，第二天換液。因為離心的目的是兩個，去除DMSO，去除死細胞，這個是標(biāo)準(zhǔn)流程，但對一般人來說，把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間，轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少，細胞就全被扔掉了，轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大，死亡。此外在操作過程中容易污染，所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO)，DMSO對細胞有一定的毒副作用，所以須將離心后的液體前倒凈，且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇，結(jié)果無異常。５.細胞貼壁少的問題：教科書中說明凍存細胞解凍時１ml細胞液要加１０ml-１５ml培養(yǎng)液，而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。６.復(fù)蘇細胞分裝的問題：試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇１管細胞一般可分裝到１-２只培養(yǎng)瓶中，分裝過多，細胞濃度過低，不利于細胞的貼壁。７.加培養(yǎng)基的量放入問題：這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度，從如果你加培養(yǎng)基的太少，那么DMSO的濃度就會比較大，就會影響細胞生長，從以前的資料來看，DMSO的濃度在小于０.５%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響，還有一個說法是１%。所以如果你的凍存液的濃度是１０%DMSO的話那么加１０ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
TOV-21G細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H22-H8D8細胞、H865細胞、SNU-251細胞
OVCAR-432細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-N-BE細胞、SKMEL24細胞、Human Embryonic Kidney 293細胞
HEL 299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2085細胞、MM.1S細胞、L-5178-Y細胞
NCI-H1618細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3396細胞、H-1417細胞、SNU-1細胞
HCC9204細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BEL 7402細胞、RKO_AS45細胞、Roswell Park Memorial Institute 7666細胞
Primary Liver Carcinoma/Poliomyelitis Research Foundation/5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM04671細胞、RKOE6細胞、CW2細胞
RPMI no 8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH82細胞、KYSE-450細胞、ARH77細胞
MLE-12 Cell:小鼠肺上皮細胞系
T-98細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKml2細胞、MKN-28細胞、MDCK Type II細胞
VMCUB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-508細胞、CEMC1細胞、PANC0403細胞
MEG-01細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H165細胞、CAL 33細胞、LOU-NH91細胞
HEK (AD293)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：WI 38細胞、HT 1197細胞、BAEC細胞
MDA-MB-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KYSE70細胞、MLA-144細胞、CTX TNA2細胞
Ly10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-LU-1細胞、NRK 52E細胞、HT 144細胞
BMSC/hBMSCs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-SNU-398細胞、H-820細胞、251MG細胞
SUM 52細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA415細胞、SU86-86細胞、SKRC-20細胞
H3396細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1693細胞、KYSE 410細胞、WSU-DLCL(2)細胞
H3396細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H1693細胞、KYSE 410細胞、WSU-DLCL(2)細胞
MPP89細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HNEpC細胞、MBdSMC細胞、KS-SLK細胞
LA-N-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOP-62細胞、B16F10細胞、CHG-5細胞
SKLU-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-Mel1細胞、WEHI 3細胞、D283-MED細胞
Super Tube細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCCVII/St細胞、COR-L23/P細胞、TE5細胞
AML193細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH146細胞、MOLP2細胞、GM01232E細胞
NEC8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EB3 [Human Burkitt lymphoma]細胞、Rca-B細胞、KYSE410細胞
WEHI-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2170細胞、CCC-HPF-1細胞、SW-900細胞
P388.D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKHEP1細胞、BT 549細胞、U-87MG ATCC細胞
C6661細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLP-8細胞、THLE-3細胞、NS1細胞
SKBR-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 1846細胞、NCIH2085細胞、RT-BM-1細胞
UMR-106細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NK 10a細胞、T8細胞、HOS-TE85細胞
LS411細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2195細胞、NCI-H1668細胞、HCC1954細胞
IHH4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC929細胞、NCI-H1836細胞、VP267細胞
H719細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL-78細胞、MV411細胞、HuT 78細胞
UMRC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBL細胞、NCI-H740細胞、CMT-93細胞
DMS153細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PL-9細胞、NCI-H1819細胞、SK-Mel1細胞
Panc_04_03細胞系相關(guān)產(chǎn)品：YD38細胞、J 111細胞、SNU-739細胞
HFB細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SNU484細胞、SUSM-1細胞、BA/F3細胞
hRPTC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PANC0504細胞、Medical Research Council cell strain-9細胞、KCL-22細胞
H-2171細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2030細胞、MO59J細胞、HIT T-15細胞
Factor Dependent Continuous-Paterson 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Capan-1細胞、HIT.T15細胞、MB 157細胞
NCI-H1155細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-146細胞、MDCK-II細胞、RSMC細胞
MDA-MB435細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BHK-21細胞、Me-Wo細胞、NCI-H1238細胞
E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：FRhK-4細胞、293 c18細胞、143 B細胞
Human Liver-7702細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JiyoyeP-2003細胞、ATDC5細胞、LICR-HN-6細胞
PC-9S1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TK 10細胞、MDA-MB436細胞、RMG-I細胞
H-1563細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2023細胞、MIN6細胞、NCIH1568細胞
GM03571細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Fetal Rhesus Kidney-4細胞、HCC-1395細胞、SU86.86細胞
WM-266-mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2066細胞、SK-RC-39細胞、SPC-A1細胞
Suzhou Human Glioma-44細胞系相關(guān)產(chǎn)品：52PE細胞、H-157細胞、B16 melanoma F10細胞
Suzhou Human Glioma-44細胞系相關(guān)產(chǎn)品：52PE細胞、H-157細胞、B16 melanoma F10細胞
22Rv-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC7901細胞、HCC-70細胞、Monomac-1細胞
EoL-1 cell細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hs746-T細胞、NGP細胞、143BTK-細胞
MLE-12 Cell:小鼠肺上皮細胞系
OV-90細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3JHR-1細胞、RK-13細胞、OK-WT細胞
OVCA433_Bast細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AE 1201細胞、Bat lung細胞、T1-73細胞
NCI-SNU-387細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Scott and White No. 13細胞、SK-BR-3細胞、Y1細胞
BEAS2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：JOSK-M細胞、MCA 38細胞、WM-239-A細胞
PANC.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK293T/17細胞、Kupffer細胞、SCC 9細胞
HPB-ALL細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Eca 109細胞、H3396細胞、PCI-4.2細胞
NCI-H460細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK Mel28細胞、NCI-H1793細胞、SW 480細胞
CCD-1112sk細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Renal Carcinoma細胞、Vertebral Cancer of the Prostate細胞、H727細胞
HCEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HARAB細胞、VSC4.1細胞、B104 [Rat neuroblastoma]細胞
PG-LH7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RSMC細胞、T/GHA-VSMC細胞、CAL 78細胞
ACC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCIH226細胞、U373 MG細胞、Pt K1 (NBL-3)細胞
LNCaP C4-2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：EB1細胞、H-847細胞、MRC-5細胞
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