"hCMEC/D3 Cell:永生化人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁
細(xì)胞背景資料:腦微血管;內(nèi)皮細(xì)胞
MUM2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EL4細(xì)胞、H-187細(xì)胞、KP-N-RT-BM-1細(xì)胞
OCI-Ly19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T84細(xì)胞、K-1735細(xì)胞、TNC-1B12B4細(xì)胞
VB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H526細(xì)胞、H-2452細(xì)胞、CCC-HEH-2細(xì)胞
NUGC2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 1細(xì)胞、GM05887A細(xì)胞、P3/X63/Ag8.653細(xì)胞
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
hCMEC/D3 Cell:永生化人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞系
因?yàn)榧?xì)胞生長(zhǎng)的時(shí)候肯定是要相互聯(lián)系,大部分的細(xì)胞都是要成片生長(zhǎng)的,尤其是對(duì)于貼壁細(xì)胞,單個(gè)細(xì)胞貼壁之后長(zhǎng)著長(zhǎng)著就長(zhǎng)到一片去了。但是如果是成片的細(xì)胞抱團(tuán)的話,傳代后細(xì)胞是不能貼壁的,這樣抱團(tuán)的細(xì)胞就會(huì)死亡。所以,消化傳代的時(shí)候一定要將細(xì)胞消化成單個(gè)單個(gè)的獨(dú)立狀態(tài),這個(gè)啊是非??季磕愕墓Ψ虻?!細(xì)胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個(gè),因?yàn)樗麤]有受力點(diǎn)了。很難找到受力點(diǎn)讓你對(duì)他吹打的力分散開細(xì)胞。所以必須要在細(xì)胞未脫落之前將其吹打開,受力點(diǎn)就是細(xì)胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴(yán)格控制好消化的程度啊,這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來,又不能太過,一吹就整片脫落,要單個(gè)單個(gè)地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長(zhǎng)狀態(tài)貼壁程度的細(xì)胞能夠都維持在好的受力點(diǎn)分散開。這個(gè)是很重要的一點(diǎn)。尤其是對(duì)于某些細(xì)胞這一點(diǎn)就是他活去死的致命點(diǎn)。像Caco-2細(xì)胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點(diǎn)就是一定不能等到細(xì)胞長(zhǎng)滿的時(shí)候才去消化傳代。要在細(xì)胞長(zhǎng)到70%左右的時(shí)候就要傳代了,一旦發(fā)現(xiàn)細(xì)胞生長(zhǎng)中已經(jīng)有疊層生長(zhǎng)的時(shí)候就要立即進(jìn)行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時(shí)候洗瓶的問題。對(duì)于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)胞,你在洗的時(shí)候如果是用無血清1640去洗細(xì)胞在隨即后的幾次中會(huì)比用DMEM洗的長(zhǎng)的要好。同樣,用1640培養(yǎng)的也有這個(gè)現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話,可以用PBS來洗,洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的,對(duì)于有些細(xì)胞會(huì)更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清,防止它對(duì)胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先,是很關(guān)鍵的一點(diǎn)。先補(bǔ)充這么多,還會(huì)后續(xù)更新。再補(bǔ)充一點(diǎn):傳代時(shí)PBS洗是很重要的一步,最近發(fā)現(xiàn),用PBS就可以把細(xì)胞消化開來。加入PBS放置10-15分鐘,有些需要更長(zhǎng)的時(shí)間,等到細(xì)胞一個(gè)個(gè)分離開來的時(shí)候,就可以直接吹打下來,但是和胰酶消化一樣,要控制好時(shí)間,不能時(shí)間太過了,要不然損傷細(xì)胞,細(xì)胞不容易成活,狀態(tài)容易不好。這個(gè)方法對(duì)于某些細(xì)胞是很管用的。有些細(xì)胞用胰酶消化不容易消化成單個(gè)的時(shí)候,或者臨時(shí)沒有胰酶了,可以選用此方法。不過一定要試試,看是否適合你的細(xì)胞。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
造成實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞污染常見情況總結(jié):細(xì)胞培養(yǎng)中最常見污染的是細(xì)菌、真菌和支原體污染。細(xì)胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會(huì)造成細(xì)胞污染呢?我們根據(jù)常見細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時(shí)間,有人已經(jīng)用超凈臺(tái)四個(gè)多小時(shí),不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗(yàn);2)器材或者溶液很久沒用,未檢測(cè)是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺(tái)不點(diǎn)酒精燈;點(diǎn)了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗(yàn);4)不帶手套,徒手操作;5)細(xì)胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機(jī)、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實(shí)驗(yàn)服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細(xì)胞使用。培養(yǎng)細(xì)胞過程中使用的所有實(shí)驗(yàn)用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺(tái)和桌面,東西太多太亂:超凈臺(tái)不是儲(chǔ)物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺(tái)!這樣就會(huì)有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細(xì)胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標(biāo)簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細(xì)胞!一不小心“飄”進(jìn)你的細(xì)胞培養(yǎng)板里,細(xì)胞就會(huì)養(yǎng)的不好,啥時(shí)候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細(xì)胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個(gè)恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細(xì)胞是否污染,如果有而且好幾個(gè)板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個(gè)大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個(gè)月的就用酒精擦擦托盤。【傳代細(xì)胞人多口雜,難管理】在傳代細(xì)胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗(yàn)在無菌條件下操作。出入試驗(yàn)室,實(shí)驗(yàn)服當(dāng)風(fēng)衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細(xì)胞污染;超凈臺(tái)做實(shí)驗(yàn)時(shí),喜歡說話聊著做試驗(yàn),要是還不帶口罩,里面就有很多細(xì)菌等著去攻擊你的細(xì)胞呢!
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
RA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T47D細(xì)胞、NCIH2291細(xì)胞、MV522細(xì)胞
KYSE-70細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK/293細(xì)胞、NCI-H82細(xì)胞、Nthy-ori 3.1細(xì)胞
3D4/21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:32D CL3細(xì)胞、MNNG/HOS Cl #5細(xì)胞、TFH細(xì)胞
MIMVEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780細(xì)胞、CCLP1細(xì)胞、SW-780細(xì)胞
alpha-TC1.6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Line 522細(xì)胞、MV 4;11細(xì)胞、Leydig細(xì)胞
細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁
hCMEC/D3 Cell:永生化人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞系
貼壁細(xì)胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時(shí)間根據(jù)細(xì)胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細(xì)胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細(xì)胞間。配制時(shí)不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時(shí),從組織消化下細(xì)胞。這種方法作用溫和,對(duì)細(xì)胞損傷較小,但是,價(jià)格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細(xì)胞與間質(zhì),對(duì)細(xì)胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時(shí)應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細(xì)胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個(gè)人的使用經(jīng)常覺得對(duì)細(xì)胞的損傷比較大,但是分離成單細(xì)胞懸液的能力確實(shí)比較強(qiáng)。5、物理法。直接吹打或用細(xì)胞刮子將細(xì)胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細(xì)胞傳代時(shí)。無法使組織上的細(xì)胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細(xì)胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點(diǎn)是:對(duì)細(xì)胞損傷小,不需要中止或洗細(xì)胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細(xì)胞。不足是細(xì)胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導(dǎo)致大量細(xì)胞死亡操作的間充質(zhì)干細(xì)胞、DC細(xì)胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細(xì)胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺(tái)上,很快細(xì)胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細(xì)胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。
細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書
JROECL19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC1/Sq細(xì)胞、U118細(xì)胞、BT483細(xì)胞
REC 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-4006細(xì)胞、U266B1細(xì)胞、HOS (TE85, Clone F5)細(xì)胞
OCI-LY-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tb1Lu細(xì)胞、OAW 42細(xì)胞、Tn-5細(xì)胞
NTera 2/cl.D1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1155細(xì)胞、OVCAR432細(xì)胞、ssMCF-7細(xì)胞
MES-23.5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3J.HR1K細(xì)胞、TMD-8細(xì)胞、RT4細(xì)胞
MDA435細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC-3細(xì)胞、MFE280細(xì)胞、JEG3細(xì)胞
H345細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPC-TW039細(xì)胞、UMR106細(xì)胞、P3-X63-Ag8細(xì)胞
hCMEC/D3 Cell:永生化人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞系
TEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL.CL2細(xì)胞、SK Mel 2細(xì)胞、LM3細(xì)胞
MLA 144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ATDC-5細(xì)胞、CAL 51細(xì)胞、NCI-H1650細(xì)胞
WIL2 Secreting細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-441細(xì)胞、SNU-1細(xì)胞、Human fetal lung fibroblast 1細(xì)胞
PLA-802細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-025細(xì)胞、H1930細(xì)胞、SK-ChA1細(xì)胞
PSN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVEC4-10細(xì)胞、TOV21G細(xì)胞、DiFi細(xì)胞
Plaepi 34細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA PCa 2b細(xì)胞、NBL_S細(xì)胞、CA922細(xì)胞
PL12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:16HBE140細(xì)胞、PA-TU-8988S細(xì)胞、HIBEpiC細(xì)胞
KNS81細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-J2細(xì)胞、LS-513細(xì)胞、LUDLU 1細(xì)胞
BALB 3T3 clone A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MG-63細(xì)胞、PL45細(xì)胞、TM-3細(xì)胞
BALB 3T3 clone A31細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MG-63細(xì)胞、PL45細(xì)胞、TM-3細(xì)胞
HFLS細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPC11細(xì)胞、HCC-9204細(xì)胞、HEM細(xì)胞
SW1271細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT325細(xì)胞、P3X63 AG8-653細(xì)胞、3T3L1細(xì)胞
JB-6 Cl 30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-343 MG細(xì)胞、EC-109細(xì)胞、V79細(xì)胞
Bac12F5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RERF-LCMS細(xì)胞、WEHI 164細(xì)胞、H-28細(xì)胞
IOSE 29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-EBNA1細(xì)胞、F442A細(xì)胞、Hx147細(xì)胞
Hs 852.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IR 983F細(xì)胞、HS852.T細(xì)胞、NTC-200細(xì)胞
MDA-MB468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 453細(xì)胞、A375S2細(xì)胞、U-343MG細(xì)胞
TKB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Embryo Lung-1細(xì)胞、AMC-HN-8細(xì)胞、KYSE270細(xì)胞
PLC8024細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-174T細(xì)胞、KYSE30細(xì)胞、Panc3_27細(xì)胞
Malme-3 M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KNS-62細(xì)胞、NS1-Ag 4/1細(xì)胞、SRS-82細(xì)胞
LTEPsm細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H596細(xì)胞、ONS76細(xì)胞、LC-1/sq細(xì)胞
Jurkat 77細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:QBI-293A細(xì)胞、M.D. Anderson-Prostate Cancer-2b細(xì)胞、Kupffer細(xì)胞
Centre Antoine Lacassagne-85-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP-212細(xì)胞、Caco2BBe細(xì)胞、MDA330細(xì)胞
CWR22R細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EAhy926細(xì)胞、A72細(xì)胞、SK_N_BE2C細(xì)胞
UM-UC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEC1A細(xì)胞、H1299細(xì)胞、HD-LM-2細(xì)胞
MDA-157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJ-RH30細(xì)胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細(xì)胞、NCIH820細(xì)胞
MEF (CF-1)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPDE6c7細(xì)胞、RMG-I細(xì)胞、1301細(xì)胞
rHSC-99細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:624細(xì)胞、Onda 11細(xì)胞、Panc327細(xì)胞
TE-85 clone 5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE6細(xì)胞、MRC-5細(xì)胞、FT-293細(xì)胞
Hs 578.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OUMS-23細(xì)胞、CT26WT細(xì)胞、UMUC-14細(xì)胞
BMF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TK10細(xì)胞、SW 1990細(xì)胞、N9細(xì)胞
H-220細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Cor L51細(xì)胞、SV-HUC-1細(xì)胞、PK 15細(xì)胞
RSC-364細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H-128細(xì)胞、KMBC細(xì)胞、MES-SA細(xì)胞
OVCA-432細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC-5細(xì)胞、NCI-H209細(xì)胞、SCC90細(xì)胞
Verda reno細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Roswell Park Memorial Institute 1788細(xì)胞、H9c2(2-1)細(xì)胞、KG1A細(xì)胞
RM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ChaGo K-1細(xì)胞、HOP-92細(xì)胞、159PT細(xì)胞
MPC 11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KLE細(xì)胞、H1105細(xì)胞、SEG-1細(xì)胞
Hi-five細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTh-74細(xì)胞、CAL851細(xì)胞、NCIH211細(xì)胞
SU-DHL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DU-145細(xì)胞、H28細(xì)胞、A375-MEL細(xì)胞
Panc02-H0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC-08-13細(xì)胞、Y-1細(xì)胞、VA-ES-BJ細(xì)胞
KMS11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B 95-8細(xì)胞、HCA-7細(xì)胞、RBMEC細(xì)胞
C2BBe1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3-M細(xì)胞、GT39細(xì)胞、HPAF2細(xì)胞
OVISE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1954BL細(xì)胞、H2087細(xì)胞、HM細(xì)胞
hCMEC/D3 Cell:永生化人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞系
Emory University-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ME 180細(xì)胞、MDA-MB-157細(xì)胞、HIT clone T15細(xì)胞
RPMI 7666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 53細(xì)胞、SR-786細(xì)胞、SN12C-PM6細(xì)胞
LM8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECV 304細(xì)胞、PK-13細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-62細(xì)胞
SUDHL5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T98-G細(xì)胞、NEC-8細(xì)胞、KP 4細(xì)胞
HEK 293-EBNA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT clone T15細(xì)胞、NCIH211細(xì)胞、SUM-52-PE細(xì)胞
NGP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM-C1細(xì)胞、K299細(xì)胞、MRC-9細(xì)胞
COLO-741細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF2細(xì)胞、Swiss/3T3細(xì)胞、MDA-435細(xì)胞
COLO 357細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MB-49細(xì)胞、PC 61-5-3細(xì)胞、AR42J細(xì)胞
LM6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NFS 60細(xì)胞、NCI-H735細(xì)胞、P30-OHKUBO細(xì)胞
MCF.10A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEP-3B2細(xì)胞、P1-Raji細(xì)胞、F442A細(xì)胞
Hela-Ap-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-2/ad細(xì)胞、HSKMC細(xì)胞、MKN1細(xì)胞
MBdSMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH810細(xì)胞、HFF-1細(xì)胞、CHO-ori細(xì)胞
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上海賓穗生物科技有限公司 是一家集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售與服務(wù)于一體的專業(yè)生物制品和化學(xué)品供應(yīng)商。公司總部位于上海市莘莊工業(yè)區(qū),擁有現(xiàn)代化辦公大樓、標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室與生產(chǎn)廠房。上海賓穗生物科技有限公司擁有一支由教授和博士為核心的技術(shù)團(tuán)隊(duì),提供超過100000的生物、化學(xué)產(chǎn)品,產(chǎn)品涵蓋化學(xué)、醫(yī)藥、材料、能源、生物等科研領(lǐng)域。公司秉承“客戶至上、服務(wù)一流”的發(fā)展理念,致力于將優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和服務(wù)提供給客戶。上海賓穗生物科技有限公司整合眾多的優(yōu)勢(shì)市場(chǎng)資源,以匠心服務(wù)廣大客戶,我們可以為客戶提供Binsui、TCI等國內(nèi)外各種品牌的高品質(zhì)試劑產(chǎn)品,充分滿足客戶的試劑需求。