"WM115 Cell:人黑色素瘤細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:黑色素瘤;女性
L-M(TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GB-1細胞、BALB/3T3細胞、KMM1細胞
JB6 [Mouse]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK49F細胞、CL1-5細胞、ST-2細胞
KLN205細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa S 3細胞、ES-2細胞、H9c2 (2-1)細胞
HC-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hca-F細胞、BT-483細胞、KATO 3細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
WM115 Cell:人黑色素瘤細胞系
細胞消化過程總結(jié):其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。
細胞培養(yǎng)實驗中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細胞后,應該注意什么?客戶收到細胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議受收細胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;收到細胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負責免費發(fā)送一株細胞。收到細胞時如無異常情況,請在顯微鏡下觀察細胞密度,如為貼壁細胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細胞后移回培養(yǎng)瓶。細胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細胞多久能到,是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細胞前請確認當?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細胞大都無法立即適應,造成細胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
CORL279細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MILE SVEN1細胞、SR細胞、U87 MG細胞
SPCA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-688A-T細胞、BC-020細胞、CAL62細胞
SHZ-88細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PF382細胞、NCIH1648細胞、Metastatic Variant 522細胞
L5178Y TK+/-3.7.2c細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293S細胞、A375mel細胞、H4IIEC3細胞
MDA-MB-157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A 172細胞、KGN細胞、LOUNH91細胞
細胞生長特性:貼壁
WM115 Cell:人黑色素瘤細胞系
細胞復蘇后貼壁細胞較少的問題分析:總結(jié)1:復蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細胞沒問題??偨Y(jié)2:首先應該懷疑凍存,實際上復蘇出問題的可能非常小,因為操作簡單,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細胞復蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復蘇的時候細胞已進入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴格,很多人容易忘卻這個事情,因為這個東西流程長。6、如果你細胞污染,你是否能很快看到,我比我的導師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細胞都污染一個細菌的話,這個細菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因為孵箱無論你如何處理都有大量的細菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當會事。
細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書
MSCs(mUCMSCs)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH64細胞、NIH:OVCAR4細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-231細胞
ARO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:2PK3細胞、MOLM-14細胞、A375.S2細胞
Jurkat E6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CLL-CII細胞、Colon-26細胞、HB 611細胞
NCIH128細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC3T3, E1 subgroup-4 clone細胞、EBTr (NBL-4)細胞、G361mel細胞
SKLMS-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA2D1細胞、ASPC1細胞、16-HBE14o細胞
Cloudman S91 melanoma細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 206細胞、CAL39細胞、NCI-522細胞
CCRF/CEM-C7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SLMT-1細胞、COLO206細胞、SCCVII/St細胞
WM115 Cell:人黑色素瘤細胞系
Cloudman S91 melanoma clone M-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:451Lu細胞、BNL CL.2細胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]細胞
OV 2008細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FOXNY細胞、HFF-1細胞、NCI-H78細胞
ME180細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PNT1-a細胞、L78細胞、Fetal Human Colon細胞
Mv1Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63-Ag8.653細胞、KU-812細胞、BIU-87細胞
CAL 27細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH:OVCAR-4細胞、OCI Ly19細胞、H1373細胞
UCW 100細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPTEC/TERT 1細胞、SW839細胞、TCam 2細胞
SKNEP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-138MG細胞、U14細胞、BIC1細胞
CESS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM-19細胞、B16 melanoma細胞、CaSki細胞
bEND.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ATDC5細胞、KP-N-NS細胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞
bEND.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ATDC5細胞、KP-N-NS細胞、HES [Human embryonic skin fibroblast]細胞
QGP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BALB 3T3 clone A31細胞、HSC-1細胞、JB6 Cl 30細胞
X63-Ag8-653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CemT4細胞、C-4-I細胞、NCIH1155細胞
JVM-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T3-L1 ad細胞、Caco-2 BBe細胞、SaOS-2細胞
LX-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-435S細胞、OVCA433_Bast細胞、GM04678細胞
Instituto Biologico-Rim Suino-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SSP-25細胞、H6c7細胞、HANK細胞
U-2932細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 839.T細胞、P3HR1細胞、NRK52E細胞
Sp 2817細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI1846細胞、OUMS27細胞、NCI-BL6細胞
NCI-H522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SJCRH30細胞、RIN-m 14B細胞、H2170細胞
NCIH2170細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Karpas-422細胞、Roswell Park Memorial Institute 8226細胞、OCILY7細胞
SK-MEL3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D283MED細胞、MDA-MB231細胞、PaTu 8988s細胞
IPLB-SF 21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HITT15細胞、RIN Cl-5F細胞、CLL-CII細胞
Tadarida brasiliensis 1 lung細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JCA-1細胞、SCC15細胞、P30/OHK細胞
NCI.H460細胞系相關(guān)產(chǎn)品:THP-1(ATCC)細胞、P3J HR-1細胞、NS-I/1細胞
H-1954細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV 1063細胞、ZR75_1細胞、C-Lu65細胞
U-87-MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MFHL-2細胞、A375細胞、T98 G細胞
DHBE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW900細胞、Suzhou Human Glioma-44細胞、Hep 3B2_1-7細胞
H-1755細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2342細胞、COLO-680N細胞、OCI-AML-3細胞
Leukemic 1210細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2108細胞、H-1693細胞、Co320細胞
Liver-02細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-4細胞、GM00637F細胞、Ca-Ski細胞
MiaPaca.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGHU1細胞、L-428細胞、MDA-MB-330細胞
BEAS 2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NTERA-2細胞、MM1.S細胞、NCI-HUT-125細胞
hA549細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLT16細胞、OVCA420細胞、Hs863T細胞
SR786細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOR-10細胞、NCIH1944細胞、639-V細胞
HOS/MNNG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2347細胞、Centre Antoine Lacassagne-51細胞、JROECL19細胞
SK.OV.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HME1細胞、NUGC2細胞、Emory University-2細胞
S37細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBE135-E6E7細胞、Jurkat, Clone E6-1細胞、NCIH716細胞
D10.G4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHP-126細胞、QGY-7703細胞、MDA-MB157細胞
MUTZ-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1915細胞、NCIH1734細胞、DV-90細胞
Hep II細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1581細胞、Anglne細胞、MHCCLM3細胞
SVOG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-1-P細胞、HCC94細胞、B10BR細胞
GM03671C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JTC-28細胞、MCF7ADR細胞、U-118 MG細胞
BJAB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF767細胞、SkMel31細胞、Hs739T細胞
W133細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HN 4細胞、UPCISCC090細胞、Sp2/0細胞
WM115 Cell:人黑色素瘤細胞系
DU-4475細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1359細胞、CCD 841 CoTr細胞、HSKMC細胞
AR4-IP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:S3 HeLa細胞、Scott and White No. 13細胞、Rat Fetal Lung-6細胞
SW1417細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B-16細胞、Kuramochi細胞、L細胞
NCIH1105細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ST 486細胞、CT26.WT細胞、H-1299細胞
STO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1092細胞、WEHI3B細胞、H-146細胞
OVCAR 432細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ME16C細胞、Sarcoma OSteogenic-2細胞、HEI193細胞
LNCaP-Clone-FGC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1954細胞、3T6 Swiss Albino細胞、Tj-905細胞
HB611細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR8/SVneo細胞、Human Kidney-2細胞、HCFB(HCF)細胞
H-1436細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PNT1/A細胞、SUM-52-PE細胞、Hca-F細胞
BEL7405細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GDM1細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-361細胞、CAL33細胞
HCC0078細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT144細胞、OVCAR-4細胞、HRCEC細胞
HT1376細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RH30SJ細胞、THPI細胞、ChaGo K-1細胞
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