"WM115 Cell|人黑色素瘤細(xì)胞

細(xì)胞背景資料：黑色素瘤；女性

細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣

傳代培養(yǎng)及其操作步驟：原代細(xì)胞培養(yǎng)成功以后，需要進(jìn)行分離培養(yǎng)，否則細(xì)胞會(huì)因生存空間不足或密度過(guò)大，營(yíng)養(yǎng)障礙，影響細(xì)胞生長(zhǎng)。細(xì)胞由原培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)分離稀釋后傳到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)的過(guò)程稱之為傳代培養(yǎng)。傳代細(xì)胞允許培養(yǎng)的細(xì)胞擴(kuò)增(形成細(xì)胞株)，可以進(jìn)行細(xì)胞克隆，易于保存，但可能喪失一些殊的細(xì)胞和分化征。傳代細(xì)胞形成細(xì)胞株的Zui大利處在于提供了大量持久的實(shí)驗(yàn)材料，便于實(shí)驗(yàn)?！静僮鞑襟E】１)吸掉或倒掉培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液；２)向瓶?jī)?nèi)加入胰蛋白酶液和EDTA混合液少量。以能覆蓋培養(yǎng)瓶底為宜；３)置３７℃孵箱或室溫(２５℃溫度)下進(jìn)行消化，２~５min后把培養(yǎng)瓶放在倒置顯微鏡下進(jìn)行觀察，當(dāng)發(fā)現(xiàn)胞質(zhì)回縮、細(xì)胞間隙增大后，應(yīng)立即中止消化；４)吸出消化液，向瓶?jī)?nèi)加入Hanks液少量，輕輕轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶，把殘留消化液沖掉，然后再加培養(yǎng)液。如果僅使用胰蛋白酶消化，在吸除胰蛋白液后，可直接加入少量含血清的培養(yǎng)液，終止消化；５)使用彎頭吸管，吸取瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)液，按順序反復(fù)輕輕吹打瓶壁細(xì)胞，使之從瓶壁脫離形成細(xì)胞懸液。吹打時(shí)動(dòng)作要輕柔，以防用力過(guò)猛損傷細(xì)胞；６)用計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)后，分別接種于新的培養(yǎng)瓶中，置CO２培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)；７)細(xì)胞培養(yǎng)換液時(shí)間應(yīng)根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài)和實(shí)驗(yàn)要求來(lái)確定。一般２～３d后應(yīng)換一次生長(zhǎng)液。待細(xì)胞鋪滿器皿底面，即可使用；也可繼續(xù)傳代擴(kuò)大培養(yǎng)或換成維持液?！咀⒁馐马?xiàng)】１)掌握HAO細(xì)胞消化的時(shí)間，消化時(shí)間過(guò)短時(shí)，細(xì)胞不宜從瓶壁脫落，過(guò)長(zhǎng)的消化會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞脫落、損傷；２)掌握HAO消化濃度，當(dāng)消化液濃度過(guò)GAO時(shí)，消化時(shí)間應(yīng)縮短，過(guò)低時(shí)細(xì)胞消化時(shí)間相對(duì)延長(zhǎng)。

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁

hFOB 1.19細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HTR8細(xì)胞、MiaPaCa2細(xì)胞、THP-1(ATCC)細(xì)胞

LM-TK-細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RPTC細(xì)胞、LLC-WRC 256細(xì)胞、GM03573A細(xì)胞

LN229細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Hs 870.T細(xì)胞、L363細(xì)胞、NCIH1385細(xì)胞

U266 B1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCIH727細(xì)胞、HT-1197細(xì)胞、H9細(xì)胞

H378細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：IR 983F細(xì)胞、RD 2細(xì)胞、CEM-CCRF細(xì)胞

細(xì)胞物種來(lái)源：人源或鼠源等其它物種來(lái)源

WM115 Cell|人黑色素瘤細(xì)胞

[細(xì)胞產(chǎn)品包裝]鮮活細(xì)胞：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存細(xì)胞：１ml凍存管(兩支)

細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，總是會(huì)出現(xiàn)各種意想不到的問(wèn)題，一不留神就會(huì)全盤(pán)皆輸。所謂細(xì)胞虐我千百遍，我待細(xì)胞如初戀。下面是貼壁細(xì)胞的保藏方法，希望對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)初學(xué)操作者有所幫助：1)觀察細(xì)胞狀態(tài)：貼壁細(xì)胞密度達(dá)到85-90%，即可以細(xì)胞凍存形式進(jìn)行保藏，拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)；2)細(xì)胞清洗：培養(yǎng)皿表面消毒后，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，去除培養(yǎng)皿中培養(yǎng)液，加入12mlPBS，輕輕搖晃培養(yǎng)皿清洗細(xì)胞，隨后吸除PBS清洗液；3)細(xì)胞消化：將2ml胰酶加入培養(yǎng)皿中，完全覆蓋細(xì)胞，置于顯微鏡下觀察（期間禁止搖晃培養(yǎng)皿），當(dāng)細(xì)胞剛開(kāi)始脫落時(shí)，立即轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，除去大部分胰酶，剩余約0.5ml胰酶，轉(zhuǎn)移至培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)消化，每30秒肉眼觀察細(xì)胞狀態(tài)，至細(xì)胞成流沙狀完全脫落，轉(zhuǎn)移至生物安全柜中，加入12ml完全培養(yǎng)基，終止消化；4)細(xì)胞離心：將終止消化后的細(xì)胞懸液吹打均勻，吸取至15ml離心管中，1000r/min（110g），離心3min；5)細(xì)胞凍存：離心后去除細(xì)胞上清液，按照凍存細(xì)胞量5*10^5/ml，吸取凍存液重懸細(xì)胞沉淀，吹打均勻后分裝至相應(yīng)的凍存管中，進(jìn)行凍存；6)細(xì)胞保藏：凍存管做HAO標(biāo)記，放至程序降溫盒中，于4℃冰箱放置30min，轉(zhuǎn)移至-80℃超低溫冰箱過(guò)夜，將過(guò)夜后的凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)移至液氮中保藏。

GM07404A細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SNU407細(xì)胞、HTori-3細(xì)胞、CTLL(2)細(xì)胞

Dx5細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCI-UMC-11細(xì)胞、Saos2細(xì)胞、GT39細(xì)胞

HCC1359細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SU-DHL2細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞、LL/2 (LLC1)細(xì)胞

CCD-112 CoN細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：266 Bl細(xì)胞、H211細(xì)胞、Panc-02細(xì)胞

細(xì)胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。

細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明：來(lái)源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名細(xì)胞庫(kù)

GM07404A細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SNU407細(xì)胞、HTori-3細(xì)胞、CTLL(2)細(xì)胞

Dx5細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCI-UMC-11細(xì)胞、Saos2細(xì)胞、GT39細(xì)胞

HCC1359細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SU-DHL2細(xì)胞、MC3T3-E1 Subclone 24細(xì)胞、LL/2 (LLC1)細(xì)胞

CCD-112 CoN細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：266 Bl細(xì)胞、H211細(xì)胞、Panc-02細(xì)胞

細(xì)胞生長(zhǎng)特性：貼壁

經(jīng)過(guò)40-50次分裂的渡過(guò)第二次死亡危機(jī)的細(xì)胞，稱之為細(xì)胞系。如細(xì)胞系的生存期有限，則稱之為有限細(xì)胞系（FiniteCellLine）；已獲無(wú)限繁殖能力的細(xì)胞系，稱連續(xù)或無(wú)限細(xì)胞系（InfiniteCellLine）。無(wú)限細(xì)胞系大多已發(fā)生異倍化，具異倍體核型，可能成為惡性細(xì)胞，因此本質(zhì)上已是發(fā)生轉(zhuǎn)化的細(xì)胞系。無(wú)限細(xì)胞系有永生性（不死性），但仍保留接觸抑制和無(wú)異體接種致死；有的有永生性，異體接種有致瘤性，說(shuō)明已惡性化。由某一細(xì)胞系分離出來(lái)的、在性狀上與原細(xì)胞系不同的細(xì)胞系，稱亞系（Subline）。這是現(xiàn)有細(xì)胞系中多的一類(lèi)，中國(guó)已建細(xì)胞系主要為這類(lèi)細(xì)胞。腫瘤細(xì)胞系多由癌瘤建成，多呈類(lèi)上皮型細(xì)胞，常已傳幾十代或百代以上，并具有不死性和異體接種致瘤性，喪失接觸抑制能力。對(duì)已建成的各種細(xì)胞系或細(xì)胞株習(xí)慣上都給以名稱；細(xì)胞的命名無(wú)嚴(yán)格統(tǒng)一規(guī)定，大多采用有一定意義縮寫(xiě)字或代號(hào)表示。但不論什么形式，均不宜太長(zhǎng)，以便記憶和了解。

P3/NS1/1-Ag4.1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H2444細(xì)胞、IR 983F細(xì)胞、LC1細(xì)胞

JHH-7細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：GM03671細(xì)胞、Hs_578t細(xì)胞、HBE 135-E6E7細(xì)胞

SBC5細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCI-SNU-C2A細(xì)胞、KLE細(xì)胞、RD細(xì)胞

EMT-6細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CTLL2細(xì)胞、MCM細(xì)胞、GA-10細(xì)胞

H-1092細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Hs 863.T細(xì)胞、MCF 10A細(xì)胞、H-1238細(xì)胞

CMT 167細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：LLC-PK(1)細(xì)胞、VERO76細(xì)胞、RL95-2細(xì)胞

Rat 1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HMrSV5細(xì)胞、NCI-H1792細(xì)胞、ACT-1細(xì)胞

Calf Pulmonary Artery 47細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SKRC-20細(xì)胞、MKN-74細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細(xì)胞

RetroPack PT67細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MAD109細(xì)胞、CAL78細(xì)胞、T84細(xì)胞

Michigan Cancer Foundation-7細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：WM-239細(xì)胞、Hs 888Lu細(xì)胞、SW-13細(xì)胞

WM115 Cell|人黑色素瘤細(xì)胞

RAT2細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Rat 2細(xì)胞、Walker256細(xì)胞、P31 FUJ細(xì)胞

RA.1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：TT細(xì)胞、H-1092細(xì)胞、COLO 680N細(xì)胞

L(TK-)細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：MC57G細(xì)胞、SUNE-1細(xì)胞、RKO-AS-45-1細(xì)胞

Eph4 1424細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HDMEC細(xì)胞、RBMVEC細(xì)胞、LC-2-Ad細(xì)胞

B16細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Panc-08.13細(xì)胞、CCD33Co細(xì)胞、Panc-8_13細(xì)胞

RMG-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：V79-GalK1細(xì)胞、LOU-NH-91細(xì)胞、OSC-19細(xì)胞

SK-MEL2細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：COLO824細(xì)胞、NCIH2286細(xì)胞、NBL-2細(xì)胞

SKUT1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Tn5 B1-4細(xì)胞、Calf Pulmonary Artery Endothelial細(xì)胞、HepG2細(xì)胞

HCC0095細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Ha Fe細(xì)胞、L-1210細(xì)胞、VMRCLCD細(xì)胞

NCI.H460細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：THP-1(ATCC)細(xì)胞、P3J HR-1細(xì)胞、NS-I/1細(xì)胞

NCIH596細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Tu-212細(xì)胞、NCIH2066細(xì)胞、CL1細(xì)胞

MB-49細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HT29細(xì)胞、KOPN-8細(xì)胞、UC-3細(xì)胞

H-727細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：293A細(xì)胞、U251細(xì)胞、PK-13細(xì)胞

DMS-153細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H2052_MM細(xì)胞、OV 2008細(xì)胞、BJAB細(xì)胞

OCM-1A細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：A.704細(xì)胞、Bronchial Epithelium transformed with Ad12-SV40 2B細(xì)胞、OCILY3細(xì)胞

K562細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SUM52細(xì)胞、LWnt-3A細(xì)胞、EO771細(xì)胞

Tca-8113細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：KM12細(xì)胞、Hca-F細(xì)胞、NP-69細(xì)胞

MARC 145細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CoCL2細(xì)胞、CP70細(xì)胞、T-T細(xì)胞

SW-756細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CD-18細(xì)胞、H250細(xì)胞、PTK2細(xì)胞

Chang liver細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：COS-7細(xì)胞、IB-RS2細(xì)胞、L-6TG細(xì)胞

Fu97細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：KRC/Y細(xì)胞、T 84細(xì)胞、LN 229細(xì)胞

Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-4細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Hs 294T細(xì)胞、U-118MG細(xì)胞、HNE-1細(xì)胞

NCIH2106細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：GM03190細(xì)胞、RCF細(xì)胞、MN 60細(xì)胞

GM01232細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Tu212細(xì)胞、32D.3細(xì)胞、J82 COT細(xì)胞

Farage OL細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：F-36P細(xì)胞、SK-RC 52細(xì)胞、SK-MEL5細(xì)胞

L929細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：NCI-H1792細(xì)胞、HuCC-T1細(xì)胞、293 EBNA細(xì)胞

NCIN87細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H1876細(xì)胞、NCIH841細(xì)胞、NCI-H2405細(xì)胞

H1838細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：DCS細(xì)胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細(xì)胞、MDAMB157細(xì)胞

MEC-1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HPAF-I細(xì)胞、HCC-2935細(xì)胞、NCI-H889細(xì)胞

WM115 Cell|人黑色素瘤細(xì)胞

Ramos.2G6.4C10細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Hepa1-6細(xì)胞、NCI-H1915細(xì)胞、GC-1 spg細(xì)胞

G-361細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：U-118MG細(xì)胞、U-87MG細(xì)胞、HCMEC細(xì)胞

Ketr3細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HRA19細(xì)胞、VE細(xì)胞、RPMI7666細(xì)胞

NCI-H660細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SK-MEL5細(xì)胞、GM03573細(xì)胞、LS 1034細(xì)胞

Mahlavu細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Sp2/0-Ag14細(xì)胞、MB468細(xì)胞、HO-1-N-1細(xì)胞

GC1-SPG細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SaOS-2細(xì)胞、SUM149-PT細(xì)胞、H-1048細(xì)胞

HHL-5細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：PL 5細(xì)胞、NCI-H1963細(xì)胞、LAD2細(xì)胞

Vx-2細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：HuPT3細(xì)胞、GL-261細(xì)胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細(xì)胞

NCIH2342細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RTMC細(xì)胞、ssMCF-7細(xì)胞、CAL148細(xì)胞

H-2110細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：RCC 786-O細(xì)胞、Hs-729-T細(xì)胞、WC00079細(xì)胞

NCI-H226細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：Doubling time: ~50 hours (ATCC).細(xì)胞、H820細(xì)胞、RA細(xì)胞

H838細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：E.G7-OVA細(xì)胞、Hs 600.T細(xì)胞、AML-2細(xì)胞

L-929細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：SN12PM6細(xì)胞、HANK-1細(xì)胞、Hs.27細(xì)胞

NT2/D1細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：H-2170細(xì)胞、KYSE0410細(xì)胞、Y79細(xì)胞

NOZAWA細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：ME180細(xì)胞、NCI-SNU-878細(xì)胞、HepaRG細(xì)胞

HCT-116細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：TGW-I-nu細(xì)胞、HS 1.Tes細(xì)胞、HCET細(xì)胞

NBLS細(xì)胞類(lèi)似產(chǎn)品：：CEF細(xì)胞、RT-BM 1細(xì)胞、RK 13細(xì)胞

"