"TK-10 Cell:人腎癌細(xì)胞系
細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞生長:貼壁
細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻(xiàn)介紹
Molm14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL78細(xì)胞、HCE-2 [50.B1]細(xì)胞、HS 445T細(xì)胞
SCCVII/St細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-327細(xì)胞、LNCaP-ATCC細(xì)胞、LS 180細(xì)胞
CCD-112CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3M 2B4細(xì)胞、EHEB細(xì)胞、RPMI 8402細(xì)胞
HANK-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPAF-II/CD18細(xì)胞、Hs274T細(xì)胞、NCI-H1618細(xì)胞
細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
TK-10 Cell:人腎癌細(xì)胞系
細(xì)胞的凍存:目前,細(xì)胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為3×10(6)~1×10(7)/mL之間。(3)將上述細(xì)胞分裝于安瓿或?qū)S美鋬鏊芰瞎苤校碴逞b1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細(xì)胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內(nèi);置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉(zhuǎn)入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內(nèi)3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細(xì)胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞傳代方法:1:3-1:6傳代;2-3天換液1次。
細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見問題總結(jié):1)一般客戶拿到細(xì)胞后,應(yīng)該注意什么?客戶收到細(xì)胞后先不開蓋,放在培養(yǎng)箱靜置若干小時后(看細(xì)胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞生長情況,并對細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議受收細(xì)胞后觀察培養(yǎng)基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細(xì)胞100X,200X各一張),排除細(xì)胞本身污染的情況;收到細(xì)胞未開封,出現(xiàn)污染狀況我們負(fù)責(zé)免費(fèi)發(fā)送一株細(xì)胞。收到細(xì)胞時如無異常情況,請?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過80%匯合度時,將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)液吸出,留下10ml培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng);超過80%匯合度時,請按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液、1000轉(zhuǎn)/分鐘離心2分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。細(xì)胞消化液建議使用PBS配制,慎用Hanks液配制;2)快遞細(xì)胞多久能到,是寄凍存的細(xì)胞還是復(fù)蘇好的細(xì)胞?我們采用快遞發(fā)貨,一般外地2--3天,寄細(xì)胞前請確認(rèn)當(dāng)?shù)販囟?,如果氣溫低于4度的,則采用郵寄凍存細(xì)胞;3)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細(xì)胞大都無法立即適應(yīng),造成細(xì)胞無法存活;4)可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。血清是細(xì)胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的種類和品質(zhì)對于細(xì)胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。來自不同物種的血清,在一些物質(zhì)或分子的量或內(nèi)容物上都有所不同,血清使用錯誤常會造成細(xì)胞無法存活。
細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
OsA-CL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE11細(xì)胞、TE6細(xì)胞、NRK 52E細(xì)胞
H-2591細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTori-3細(xì)胞、A549細(xì)胞、CCRF CEM細(xì)胞
IMCD3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P560細(xì)胞、MKN-1細(xì)胞、NCI-H2052細(xì)胞
HSAS4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A 2058細(xì)胞、C8166細(xì)胞、MDA-MB-134VI細(xì)胞
U-118MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK-15細(xì)胞、293EBNA細(xì)胞、HPDEC細(xì)胞
細(xì)胞生長特性:貼壁生長
TK-10 Cell:人腎癌細(xì)胞系
細(xì)胞復(fù)蘇后貼壁細(xì)胞較少的問題分析:總結(jié)1:復(fù)蘇過程沒有問題,是否是從液氮拿出直接放入溫水,還有培養(yǎng)箱,二氧化碳濃度,培養(yǎng)基、PH值等環(huán)節(jié)。要么加高濃度FBS 15-20%,看看能否幫助貼壁,當(dāng)然也需要考慮血清問題,還有確信拿來的細(xì)胞沒問題??偨Y(jié)2:首先應(yīng)該懷疑凍存,實(shí)際上復(fù)蘇出問題的可能非常小,因?yàn)椴僮骱唵?,而且死板。1、你凍存的時候是不是消化的時間過長,這是一般人所注意不到的,即使書上也不講這個問題,太長的消化時間會讓細(xì)胞復(fù)蘇時失去貼壁能力,表現(xiàn)為先貼后死,原因是在你復(fù)蘇的時候細(xì)胞已進(jìn)入凋亡程序,不可逆轉(zhuǎn)的死亡。2、你的凍存液好不好,是什么,甘油還是DMSO,質(zhì)量非常重要,否則也會死亡。3、你的凍存液的量加的是不是太多,ATCC推薦是不超過7%,大于5%,太多也不好。4、你在凍存的時候是不是把DMSO混均勻,這個有一些影響,但不算太大。5、你的凍存是否按部就班,就是所溫度梯度是不是把握嚴(yán)格,很多人容易忘卻這個事情,因?yàn)檫@個東西流程長。6、如果你細(xì)胞污染,你是否能很快看到,我比我的導(dǎo)師能早一天看到污染。從這個角度講建議去除離心這步。7、你的細(xì)胞在凍存前是否過密。還有,不贊成孵箱污染這個概念的,所有在一個孵箱里的細(xì)胞都污染一個細(xì)菌的話,這個細(xì)菌是源于孵箱的,但這不代表孵箱污染,因?yàn)榉跸錈o論你如何處理都有大量的細(xì)菌,問題在操作。每次污染的原因都要盡可能的找,以后就不犯同樣的問題,這個很重要,不能靠猜,否則你就有可能細(xì)胞養(yǎng)絕最后換課題,這個見得太多了,別不當(dāng)會事。
細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣
HCC-1438細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN229細(xì)胞、PA I細(xì)胞、BpRcl細(xì)胞
MH-S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細(xì)胞、PC12(高分化)細(xì)胞、KE39細(xì)胞
GC9811-P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anip973細(xì)胞、HNE-3細(xì)胞、BE2_C細(xì)胞
CEM/0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1734細(xì)胞、GM01232E細(xì)胞、NTera-2D1細(xì)胞
ARIP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AR4-2J細(xì)胞、H1666細(xì)胞、CFSC-2G細(xì)胞
CCRF/CEM-C7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SLMT-1細(xì)胞、COLO206細(xì)胞、SCCVII/St細(xì)胞
RPMI1788細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1436細(xì)胞、UM-UC14細(xì)胞、NCI-H1436細(xì)胞
TK-10 Cell:人腎癌細(xì)胞系
HL-7702細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly3細(xì)胞、H508細(xì)胞、BPH1細(xì)胞
SUSM-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2073細(xì)胞、Hs604T細(xì)胞、MKN45細(xì)胞
COLO 678細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA-432細(xì)胞、NCIH295R細(xì)胞、Panc-1-P細(xì)胞
NCIH2141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Large Cell Lung Cancer-103H細(xì)胞、BJAB-1細(xì)胞、MESSA-DX5細(xì)胞
Jeko1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mel-RM細(xì)胞、MMVECs細(xì)胞、ChaGo-K1細(xì)胞
L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC-12細(xì)胞、HCC2108細(xì)胞、CHP 100細(xì)胞
FU-MMT-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KG-1a細(xì)胞、H-522細(xì)胞、SK-Mel 2細(xì)胞
HCA7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAKI1細(xì)胞、H128細(xì)胞、Hs-606-T細(xì)胞
SJCRH30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SBC-3細(xì)胞、RCC-10RGB細(xì)胞、NCI660細(xì)胞
SJCRH30細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SBC-3細(xì)胞、RCC-10RGB細(xì)胞、NCI660細(xì)胞
3T3F442A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Microbiological Associates-104細(xì)胞、JB-6 Cl 30細(xì)胞、NWA細(xì)胞
IPLB-Sf21AE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H378細(xì)胞、NCI-SNU-520細(xì)胞、hFOB細(xì)胞
P3HR1-BL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pan02細(xì)胞、MCA-205細(xì)胞、SK-ES-1細(xì)胞
MonoMac 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-231-luc細(xì)胞、LA795細(xì)胞、AMC-HN-8細(xì)胞
102PT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMH2細(xì)胞、COLO 16細(xì)胞、C2C12細(xì)胞
TU 686細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NF639細(xì)胞、KOPN8細(xì)胞、N-Tera-2細(xì)胞
Malme3M細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1993細(xì)胞、MDCK2細(xì)胞、HEP3B2細(xì)胞
P3-NS1/1-Ag4-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHLF細(xì)胞、NCI-H524細(xì)胞、Caco 2細(xì)胞
A549 ATCC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ECC1細(xì)胞、NCI-H2023細(xì)胞、NCIH2122細(xì)胞
LIM-1215細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC0327細(xì)胞、CEMx721.174.T2細(xì)胞、GM00637F細(xì)胞
D-341細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHA細(xì)胞、COLO684細(xì)胞、BE2-M17細(xì)胞
HT 29細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TM4細(xì)胞、G361-mel細(xì)胞、SRA01/04 (HLE)細(xì)胞
NCI-SNU-878細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VERO C 1008細(xì)胞、CCRF-CEM C7細(xì)胞、COR L279細(xì)胞
EBC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCMEC細(xì)胞、Institute for Medical Research-32細(xì)胞、NCI-H650細(xì)胞
MDA-361細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF7-CTRL細(xì)胞、C-28/I2細(xì)胞、MFE-280細(xì)胞
BHK21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MHCC97細(xì)胞、H2135細(xì)胞、SU 86.86細(xì)胞
KM-12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T8細(xì)胞、MZCRC1細(xì)胞、U-251 MG細(xì)胞
Panc-813細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IA-LM細(xì)胞、PCI:SG-231細(xì)胞、OE-19細(xì)胞
Soleus clone 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Glomerular Endothelial細(xì)胞、HT 1080細(xì)胞、OCI-LY-10細(xì)胞
BCPAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCCIT細(xì)胞、X63-AG 8.653細(xì)胞、COLO-357細(xì)胞
MDA-MB436細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LA-795細(xì)胞、X63Ag8.653細(xì)胞、Colon 38細(xì)胞
COLO 201細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madin Darby Canine Kidney細(xì)胞、HuP-T3細(xì)胞、Bovine Turbinate細(xì)胞
C-33A細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH740細(xì)胞、CEM-T4細(xì)胞、PC3M-IE8細(xì)胞
Panc_03_27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780/Taxol細(xì)胞、Strain KB細(xì)胞、GP293細(xì)胞
NCI-H460細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK Mel28細(xì)胞、NCI-H1793細(xì)胞、SW 480細(xì)胞
253JB-V細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV2008細(xì)胞、HSC-6細(xì)胞、NCI-HUT-520細(xì)胞
P3.NS-1/1.Ag4.1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJAB細(xì)胞、SKUT1細(xì)胞、B16F1細(xì)胞
NCIH2196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT/Taxo1細(xì)胞、CAOV4細(xì)胞、RKO_AS45細(xì)胞
TO175T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT167細(xì)胞、U-343 MG細(xì)胞、LM TK negative細(xì)胞
H661細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ABC1細(xì)胞、BHK21細(xì)胞、TSUpr1細(xì)胞
OCI/AML2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BrCL18細(xì)胞、CORL26細(xì)胞、MDA415細(xì)胞
AU-Mel細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RKO-AS45-1細(xì)胞、B 95-8細(xì)胞、NCI-157細(xì)胞
2PK3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH 3T6細(xì)胞、Lewis-Lung細(xì)胞、NTERA2D1細(xì)胞
TK-10 Cell:人腎癌細(xì)胞系
L M (TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UT-7細(xì)胞、FRTL-5細(xì)胞、58F細(xì)胞
AAV293細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COS1細(xì)胞、MLE12細(xì)胞、NCIH2171細(xì)胞
B4G12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MUM2B細(xì)胞、PCI:SG231細(xì)胞、Hs-578Bst細(xì)胞
MC116細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs839.T細(xì)胞、SCaBER細(xì)胞、IHHA-1細(xì)胞
SUM-102細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1651細(xì)胞、NRK 49F細(xì)胞、SKN-AS細(xì)胞
NALM-6-M1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-15細(xì)胞、KRCY細(xì)胞、LAD 2細(xì)胞
HS-294細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPL-4細(xì)胞、RIN-m5F細(xì)胞、Huh 7.5細(xì)胞
SUD-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHOK1細(xì)胞、H4-II-E-C3細(xì)胞、CHL-IU細(xì)胞
IMR 32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RenCa細(xì)胞、MDA-MB-134 VI細(xì)胞、H1048細(xì)胞
RPTEC TERT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:786O細(xì)胞、H2591細(xì)胞、CF PAC-1細(xì)胞
KLE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Chinese Hamster Ovary細(xì)胞、T-CAM2細(xì)胞、Madison lung細(xì)胞
HeLa細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc2_03細(xì)胞、SKES1細(xì)胞、G-401細(xì)胞
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