"HEK293-EBNA Cell:人胚腎細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL4細胞、HT細胞、HCEC-B4G12細胞
HSC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs-578-T細胞、EPC細胞、MPC-11細胞
LIPF178C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NEC8細胞、GM04154細胞、C41細胞
CMT 64細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TGBC11T細胞、M20 [Human melanoma]細胞、NEC8細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
HEK293-EBNA Cell:人胚腎細胞系
細胞消化過程總結(jié):其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:4-1:10傳代;每周2次。
造成實驗室細胞污染常見情況總結(jié):細胞培養(yǎng)中最常見污染的是細菌、真菌和支原體污染。細胞一旦污染,大多數(shù)較難處理。那么,哪些情況我們不注意的話就會造成細胞污染呢?我們根據(jù)常見細胞培養(yǎng)實驗分析總結(jié)下?!具`規(guī)操作】1)為節(jié)省時間,有人已經(jīng)用超凈臺四個多小時,不開紫外滅菌30min,酒精擦拭后直接開始試驗;2)器材或者溶液很久沒用,未檢測是否污染而直接使用;離心管多次使用,槍頭為了方便交叉使用;3)超凈臺不點酒精燈;點了酒精燈放在右上角,而你在左下角做試驗;4)不帶手套,徒手操作;5)細胞培養(yǎng)間配備槍式移液器、手術(shù)器械、離心機、冰箱等專用儀器設(shè)備以及專用的實驗服和拖鞋,未定期消毒。專用物品被帶出傳代細胞使用。培養(yǎng)細胞過程中使用的所有實驗用具,如移液管、一次性槍頭、一次性塑料離心管、凍存管等未按要求滅菌使用(通常需121°C高壓滅菌20分鐘后37%烤干備用)。超凈臺和桌面,東西太多太亂:超凈臺不是儲物箱,什么培養(yǎng)皿、各種規(guī)格的板子、槍頭就不要堆在超凈臺!這樣就會有許多紫外線顧不到的衛(wèi)生死角。傳代細胞其他的桌面,切忌東西堆積如山,不要將酒精棉球、標簽紙、牛皮紙買來后全部堆在傳代細胞!一不小心“飄”進你的細胞培養(yǎng)板里,細胞就會養(yǎng)的不好,啥時候死了都不知道!【培養(yǎng)箱太久沒清潔】細胞污染了,并非直接扔了培養(yǎng)皿就不管了,首先你還得看看這個恒溫培養(yǎng)箱里其他培養(yǎng)皿或孔板里的細胞是否污染,如果有而且好幾個板子都有類似的污染塊,那很可能是培養(yǎng)箱中的水或者空氣污染了,得給培養(yǎng)箱做個大掃除,重新酒精消毒,照紫外;孵箱里的水,水沒了要記得加,還得記得十天半個月的就用酒精擦擦托盤?!緜鞔毎硕嗫陔s,難管理】在傳代細胞這種衛(wèi)生要求高,人多了,不確定因素多了,難以保證試驗在無菌條件下操作。出入試驗室,實驗服當風衣穿,不扣紐扣,不戴,就容易造成細胞污染;超凈臺做實驗時,喜歡說話聊著做試驗,要是還不帶口罩,里面就有很多細菌等著去攻擊你的細胞呢!
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
COV362細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMEL-1細胞、L5178YR細胞、P30 OHK細胞
PC 61 5.3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NE1-E6E7細胞、ST2細胞、HT 1197細胞
H-889細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1930細胞、NS-I/1細胞、SCL-1細胞
HeLa S-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa 229細胞、RFL 6細胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞
P3JHR-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SV40-MES13細胞、NCI-H920細胞、SKNBE細胞
細胞生長特性:貼壁生長
HEK293-EBNA Cell:人胚腎細胞系
貼壁細胞的消化方法介紹:1、胰酶。這是用得最多的。一般濃度在0.25-0.5%。作用時間根據(jù)細胞種類、作用溫度等因素而變化很大,從幾分鐘到幾十分鐘不等。0.25%的胰酶作用于單層貼壁的細胞,在37度條件下,一般消化1-5分鐘就足夠了。終止是用血清。主要作用于細胞間。配制時不能用含、鎂的平衡液,否則影響活性。保存于-20度。2、膠原酶。這種方法比較少,一般是用原代培養(yǎng)時,從組織消化下細胞。這種方法作用溫和,對細胞損傷較小,但是,價格也較貴。中止同樣是用血清。3、EDTA。用得也是非常多。一般濃度在0.02%左右。作用于細胞與間質(zhì),對細胞間也有一定作用。注意,它能顯著影響pH值,而且在弱堿性條件下才易溶。因此,配制時應(yīng)調(diào)節(jié)好酸堿度。它不能被終和。因此,消化下來的細胞要洗一遍。4、商品化的無酶消化液。個人的使用經(jīng)常覺得對細胞的損傷比較大,但是分離成單細胞懸液的能力確實比較強。5、物理法。直接吹打或用細胞刮子將細胞刮下來。6、冷凍法。此方法僅能用于細胞傳代時。無法使組織上的細胞脫落下來。本方法的原理,我想是因細胞冷凍后收縮,從而從培養(yǎng)瓶上脫落下來。優(yōu)點是:對細胞損傷小,不需要中止或洗細胞,方便,不需要另外配制消化液。特別適用那些貼壁不是特別緊,又特別嬌氣的細胞。不足是細胞常成小片脫落。此種方法曾用于因用其它方法傳代導致大量細胞死亡操作的間充質(zhì)干細胞、DC細胞的培養(yǎng),效果非常滿意。具體過程是:1、用較多的4度的PBS 洗滌一遍細胞(以6孔板為例,加1.5ml/孔),2、再加0.5毫升4度的PBS,靜置操作臺上,很快細胞就小片脫落,3、輕輕吹打,細胞即完全脫落,4、按一定比例傳代。
細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣
HPDE6c7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16F1細胞、BCPAP細胞、RCC 786-O細胞
NT2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T1-73細胞、C 643細胞、NFHIOSE-80細胞
End1/E6E7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Vero E6細胞、HECCL-1細胞、H1869細胞
H-2052細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM149-PT細胞、SCL II細胞、Hs 863.T細胞
WERI Rb-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LY細胞、SW1116細胞、U-343 MG細胞
PC3M-2B4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO684細胞、Tu 212細胞、G361-mel細胞
NCI-H23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEL-92細胞、H676細胞、VSMC細胞
HEK293-EBNA Cell:人胚腎細胞系
SUM 159PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM02132細胞、TE-5細胞、P3-X63Ag8.653細胞
SJCRH30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SBC-3細胞、RCC-10RGB細胞、NCI660細胞
BNL 1ME A.7R.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC2218細胞、SW 1573細胞、COLO 684細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM19細胞、DHL-2細胞、U937細胞
A 549細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLEC-SRA 01/04細胞、MMAc-SF細胞、MSB1細胞
Hi-five細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTh-74細胞、CAL851細胞、NCIH211細胞
SUM-102PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MZCRC1細胞、UWB1289細胞、D283細胞
UT-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCCC-9810細胞、Panc_04_03細胞、FL62891細胞
CEM/0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1734細胞、GM01232E細胞、NTera-2D1細胞
CEM/0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1734細胞、GM01232E細胞、NTera-2D1細胞
VMRC-RCZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-839細胞、H-358細胞、Panc02.03細胞
MCF7/WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB134VI細胞、MMAc-Serum Free細胞、C26細胞
HL60細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MT-3 [Human leukocytes]細胞、Farage細胞、MDA MB 436細胞
OS-RC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NUGC2細胞、SF-767細胞、3T6細胞
PaTu 8988s細胞系相關(guān)產(chǎn)品:22Rv1細胞、HK2細胞、NCTC 929細胞
NCI-H2591細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AML 12細胞、MC38細胞、Tu 212細胞
PA-TU S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H322T細胞、IMR 32細胞、NCI-ADR-RES細胞
UMRC-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL細胞、NCI-H740細胞、CMT-93細胞
HAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Baby Hamster Kidney 21細胞、A-72細胞、DU4475細胞
NCIH1688細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H23細胞、AGS細胞、786-0WT細胞
hFOB 1.19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTR8細胞、MiaPaCa2細胞、THP-1(ATCC)細胞
MB157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-1細胞、18G3.cl 1細胞、SK-ChA-1細胞
Hs 636 T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNG-M細胞、Hs.27細胞、A-101D細胞
RPMI2650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H747細胞、HEC-1-A細胞、HS688AT細胞
SKNEP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuLEC-5a細胞、KM-12細胞、786-O細胞
Hs 739.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U138-MG細胞、HUVSMC細胞、OVCA 432細胞
HFLS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPC11細胞、HCC-9204細胞、HEM細胞
RPMI.8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH250細胞、KYSE 50細胞、KMB 17細胞
HEK 293A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ESC-410細胞、LC-1/sq細胞、RGC5細胞
U2OS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hela-Ap-1細胞、BIU-87細胞、KLN-205細胞
H2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-13細胞、H-2405細胞、NCIH69細胞
OK-WT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BBE細胞、AML-193細胞、PLA-801C細胞
CAL51細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB231細胞、HEK/293細胞、HSC細胞
SK-GT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D-407細胞、KP-N-RT-BM-1細胞、H-774細胞
OCI-Ly19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T84細胞、K-1735細胞、TNC-1B12B4細胞
SF 763細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM2131細胞、RD細胞、HT-29細胞
MOLT 3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-009細胞、OAW-42細胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞
GC9811-P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Anip973細胞、HNE-3細胞、BE2_C細胞
C918細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL CL.2細胞、HCT-15細胞、MDA435細胞
Hs 611.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PE/CA-PJ34 (clone C12)細胞、P3/X63-Ag8細胞、HPAF/CD18細胞
CL1-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH-1細胞、HEp-2細胞、SW 626細胞
OCI-AML-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-DZ細胞、MC9細胞、SW 837細胞
Rat 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HMrSV5細胞、NCI-H1792細胞、ACT-1細胞
HEK293-EBNA Cell:人胚腎細胞系
HBVSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL-27細胞、Kelly細胞、OCI AML4細胞
Mevo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Sci-1細胞、BxPC-3細胞、MDA2B細胞
NCIH520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL-16細胞、A 172細胞、DC2.4細胞
Me Wo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB453細胞、SUM 159PT細胞、SW 1417細胞
AMC-HN-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL7405細胞、HMSC細胞、SKMES-1細胞
IOSE-29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-a-2細胞、SNU-C2B細胞、MAntle cell VERona-1細胞
PF382細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRTL-5 Cl 2細胞、RWPE1細胞、PC 61 5.3細胞
SK-N-BE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS 17/2.8細胞、CCD841CoN細胞、KYSE-410細胞
NCIH23細胞系相關(guān)產(chǎn)品:mIMCD-3細胞、SUPM2細胞、U-118-MG細胞
HCC1395細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-829細胞、3T6細胞、Human Fetal Thymocyte-8810細胞
ACC3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU.86細胞、Detroit562細胞、OC-316細胞
Hopkins-92細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKBr3細胞、PC.3細胞、LTPA細胞
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上海賓穗生物科技有限公司 是一家集研發(fā)、生產(chǎn)、銷售與服務(wù)于一體的專業(yè)生物制品和化學品供應(yīng)商。公司總部位于上海市莘莊工業(yè)區(qū),擁有現(xiàn)代化辦公大樓、標準實驗室與生產(chǎn)廠房。上海賓穗生物科技有限公司擁有一支由教授和博士為核心的技術(shù)團隊,提供超過100000的生物、化學產(chǎn)品,產(chǎn)品涵蓋化學、醫(yī)藥、材料、能源、生物等科研領(lǐng)域。公司秉承“客戶至上、服務(wù)一流”的發(fā)展理念,致力于將優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和服務(wù)提供給客戶。上海賓穗生物科技有限公司整合眾多的優(yōu)勢市場資源,以匠心服務(wù)廣大客戶,我們可以為客戶提供Binsui、TCI等國內(nèi)外各種品牌的高品質(zhì)試劑產(chǎn)品,充分滿足客戶的試劑需求。