"SW954 Cell:人陰戶鱗癌細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
MDCC-MSB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-33-A細胞、RDES-1細胞、NCI-H1623細胞
HT 29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TM4細胞、G361-mel細胞、SRA01/04 (HLE)細胞
Transformed Human Liver Epithelial-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OKT3細胞、MOLM-13細胞、RAW264細胞
Nittby-Salford 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FAK+/+細胞、H-1522細胞、Dx5細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
SW954 Cell:人陰戶鱗癌細胞系
細胞消化過程總結(jié):其實絕大部分細胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細胞(絕大部分1min不到)。對于這些細胞原則上不要用胰酶孵育細胞,連續(xù)這樣傳代,對細胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細胞消化或者吹打成完全分離細胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細胞就是完全成單個細胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細胞,尤其是腫瘤細胞的一個特性,無論死活的細胞都是如此,你可以嘗試,準(zhǔn)備100%的單個細胞懸液,貼壁后觀察細胞,仍然是幾個幾個細胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學(xué)那樣吹打1h,等待單細胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細胞,一般不超過5min,即可見細胞成片移動,就應(yīng)該停止消化。一些正常細胞也會有難消化的時候,比如tsDC細胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:3-1:6傳代,2-3天換液1次。
細胞凍存的步驟:1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細胞類型來選擇;3)將分裝上述細胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只凍存管細胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系
AD-293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4-2 Bone metastatic細胞、KYSE 150 KYSE150 Kyse150 KY150
細胞、Hs 888Lu細胞
HRC-99細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CW-2細胞、HA1800細胞、MO59J細胞
Me-Wo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM細胞、HO1-N-1細胞、SW837細胞
IOSE 29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293-EBNA1細胞、F442A細胞、Hx147細胞
RT 112細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC/PRF5細胞、H-2291細胞、KYSE0520細胞
細胞生長特性:貼壁生長
SW954 Cell:人陰戶鱗癌細胞系
細胞傳代培養(yǎng)實驗:體外培養(yǎng)的原代細胞或細胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細胞株或得到大量的同種細胞,并維持細胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細胞形成單層匯合以后,由于密度過大生存空間不足而引起營養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細胞“一代”指從細胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細胞世代或倍增不同。在一代中,細胞培增3~6次。細胞傳代后,一般經(jīng)過三個階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細胞分裂指數(shù)表示細胞增殖的旺盛程度,即細胞群的分裂相數(shù)/100個細胞。一般細胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細胞可達3~5%;細胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時期,稱指數(shù)增生期(對數(shù)生長期),適宜進行各種試驗。實驗步驟:1.將長成的培養(yǎng)細胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺中倒掉瓶內(nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細胞,如果細胞變圓,相互之間不再連接成片,這時應(yīng)立即在超凈臺中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細胞懸液。3.將細胞懸液吸出2ml左右,加到另一個培養(yǎng)瓶中并向每個瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細胞在2小時左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶內(nèi)形成單層,需要再次進行傳代。
細胞形態(tài)特性:上皮細胞
QGY-7703細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FLC7細胞、PFSK1細胞、MDCK2細胞
HASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS TE 85細胞、LIPF178C細胞、OCI Ly1細胞
675T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-428細胞、VM-CUB-I細胞、FRTL 5細胞
293-FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-NS1/1Ag 4.1細胞、H-2066細胞、LADMAC細胞
3T6-Swiss albino細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-9/S1細胞、STC-1細胞、G361細胞
RT4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-118-MG細胞、OLN 93細胞、SVOG細胞
MALME.3M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3J細胞、TALL-1 [Human adult T-ALL]細胞、SP-2細胞
SW954 Cell:人陰戶鱗癌細胞系
H3255_DA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCS2/8細胞、KPL-4細胞、OCI Ly3細胞
SW 1271細胞系相關(guān)產(chǎn)品:J774 A1細胞、T-T細胞、COLO-699細胞
HLEC-SRA 01/04細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs675細胞、Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞、Hs940.T細胞
H-548細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HHL-5細胞、BMSC/hBMSCs細胞、HR8348細胞
VMRCRCZ細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BE(2)-C細胞、SL1細胞、NU-GC-3細胞
MM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MV 4;11細胞、Tregs細胞、NIH-3T3細胞
CTLA4 Ig-24細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1-sq細胞、LC-2/ad細胞、253JB-V細胞
159PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2122細胞、SuDHL 8細胞、CCD-1112sk細胞
CCD18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-98G細胞、IM9細胞、NCI-H2110細胞
CCD18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-98G細胞、IM9細胞、NCI-H2110細胞
RIN14B細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CFSC-8B細胞、SCC-15細胞、LC-1-sq細胞
GM02219C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF 10A細胞、Lec1細胞、RD 2細胞
Hx-147細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLB 985細胞、MES-23.5細胞、PG-4細胞
NCI-H2030細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、H-2591細胞、BIU-87/Adr細胞
138 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-9724細胞、A-204細胞、C2BBe1細胞
NCI-H2171細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AN3細胞、Walker/LLC-WRC 256細胞、RCK8細胞
TE3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT 1376細胞、NCI-H1650細胞、GL-261細胞
3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Me-Wo細胞、WERIRb1細胞、Line 207細胞
F56 [Human neoplasm]細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CL-11細胞、PANC-02-03細胞、TE-85 clone 5細胞
KMS26細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kuramochi細胞、NCI-441細胞、3T3 Swiss Albino細胞
MHCC97L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MESSADX5細胞、COLO 741細胞、CEM-C7細胞
UC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCFB(HCF)細胞、NCIH650細胞、DH-82細胞
2008細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T241細胞、1301細胞、SK-Col-1細胞
SV40-HCEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE-Mar細胞、Capan 2細胞、Nthy ori 3.1細胞
NCIH2228細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KCL-22細胞、FHL-124細胞、ZYM-SVEC01細胞
COLO678細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P30 OHK細胞、PANC403細胞、H9細胞
EVSA/T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI/AML-5細胞、NCI-H196細胞、A9細胞
SNU119細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA1386細胞、MUTZ-3細胞、CL1-0細胞
NWA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H2106細胞、OCI AML3細胞、Natural Killer-92細胞
HCC1833細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBL-100細胞、NGEC細胞、HUT-125細胞
V-79-4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HBZY 1細胞、C3H/10T1/2 clone 8細胞、A204細胞
GP2d細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD19Lu細胞、GM2131細胞、GM637細胞
NCI-H1693細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MARC 145細胞、RCK8細胞、Hs888Lu細胞
SK-N-BE(1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AZ-521細胞、NOR-10細胞、RAMOS2G64C10細胞
LTEP a2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63 AG 8.653細胞、870細胞、Malme-3 M細胞
H-441細胞系相關(guān)產(chǎn)品:769-P細胞、OVCAR 5細胞、SUM-190PT細胞
RPMI no 8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH82細胞、KYSE-450細胞、ARH77細胞
COLO680N細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCC-HSF-1細胞、SNU182細胞、LS411N細胞
ZYM-SVEC01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EB-1細胞、HOS-143B細胞、KTCTL-140細胞
SUP-B15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-92.05細胞、PC-3M 2B4細胞、Hs 742.T細胞
BV173細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGC-5細胞、RBL.2H3細胞、HS-445細胞
H661細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ABC1細胞、BHK21細胞、TSUpr1細胞
PK 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCC-MSB1細胞、HCC95細胞、Panc 3.27細胞
SW954 Cell:人陰戶鱗癌細胞系
OV1/P細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CA46細胞、MDAMB435細胞、CCD18細胞
L-540細胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRO 81-2細胞、NCI-H2405細胞、RL-95-2細胞
PC14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LMTK-細胞、Sup T-1細胞、HOPC細胞
SNU-398細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOZ細胞、LICR-HN-6細胞、NF639細胞
WPMY1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TJ905細胞、SNU-C1細胞、KYSE 140細胞
PLC-8024細胞系相關(guān)產(chǎn)品:aTC1-6細胞、BT-B細胞、AMC-HN8細胞
Swiss 3T3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JROECL 19細胞、624細胞、HNE2細胞
HTh 74細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-415細胞、GM00637細胞、IOSE-Mar細胞
FHL-124細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL3細胞、SkChA-1細胞、LUDLU1細胞
HLF-a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TW01細胞、MDAMB330細胞、COLO.205細胞
MKN74細胞系相關(guān)產(chǎn)品:AtT20細胞、NCI-H838細胞、VeroC1008細胞
CAKI 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-6666細胞、COV434細胞、32D-Cl3細胞
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