"HCC4006 Cell:人肺癌腺癌細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹
OVMANA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-MEL-5細胞、LIXC-002細胞、PA317細胞
TR 146細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1222細胞、SNB19細胞、KM H-2細胞
SK-RC-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PE/CA-PJ34細胞、BT.549細胞、COR-L51細胞
Hs604T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TSCCa細胞、P3X63細胞、GA-10 clone 4細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
HCC4006 Cell:人肺癌腺癌細胞系
如何把細胞養(yǎng)的形態(tài)更好更漂亮。1.不同的細胞,喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個不僅僅是說培養(yǎng)基的不同,還有就是細胞生長的空間密度問題。有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應該留很少量的細胞,這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。2.對于有些人總是會遇到養(yǎng)的細胞形態(tài)怎么都不好的問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞,如果細胞形態(tài)不好,(或者細胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進行預吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細胞我們只吹打,不消化的);其次,把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。呵呵。如果一次效果還不理想,可重復多次。直到找到細胞完美形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。3.關(guān)于培養(yǎng)瓶內(nèi)加入培養(yǎng)基的量的問題。這個是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些細胞反而是培養(yǎng)基少一點相反細胞形態(tài)會長得比較好。(可能也是競爭很大,有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。)對于生長速度快的細胞,易生長的細胞加少一點培養(yǎng)基細胞形態(tài)會更好。但是要注意換液掌握。4.關(guān)于選擇培養(yǎng)瓶的問題。個人發(fā)現(xiàn)生長速度快的細胞在玻璃瓶內(nèi)生長的狀態(tài)會比一次性相對好一些。而對于同一種細胞,在其生長旺盛快速的時期在玻璃瓶內(nèi)的生長狀態(tài)也比內(nèi)好。這可能是因為比玻璃瓶更容易貼壁。生長速度快的細胞在這種相對“更安逸”的環(huán)境里反而長得狀態(tài)不如玻璃瓶好。所以對于生長速度慢的細胞如果想要更漂亮的細胞狀態(tài),比玻璃瓶會好,對于生長速度慢的細胞,玻璃瓶則會更好。同樣,對于同一種細胞,在其生長速度慢的時候,會好一點,比如剛剛復蘇的時候,或者原代培養(yǎng)的時候。而在其生長旺盛的時候,玻璃瓶則相對會好一點。
細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:4-1:6傳代,每周2-3次。
常見細胞培養(yǎng)中一些問題總結(jié):1)培養(yǎng)基中血清的比例多少合適?血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源,所以血清的含量多少會對細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%,不要低于5%或高過20%,因為含量過低會導致細胞營養(yǎng)不足,過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%,可以適量加減;2)何時須更換培養(yǎng)基?視細胞生長密度而定,或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上的更換時間,按時更換培養(yǎng)基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換;3)購買的復蘇細胞,為何會有脫落?因為運輸?shù)倪^程中不可避免的會有震蕩,收到后可以離心收集;4)購買的細胞冷凍管經(jīng)解凍后,為何會發(fā)生細胞數(shù)目太少之情形?研究人員在冷凍細胞之培養(yǎng)時出現(xiàn)細胞數(shù)目太少,大都是因為離心過程操作上的失誤,造成細胞的物理性損傷,以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心,應待細胞生長隔夜后再更換培養(yǎng)基即可;5)購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳。血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養(yǎng)溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久;6)收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落之原因?冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因為操作者夾取冷凍管時用力不當,造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動或松脫,乃因熱脹冷縮之物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時,均應立刻將冷凍管再一次扭緊。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
FM-88細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM H-2細胞、MC26細胞、N1E115細胞
V 79細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Liver-02細胞、LS 123細胞、Microbiological Associates-104細胞
NE-4C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK-136細胞、rRMECs細胞、NuTu-19細胞
LAN-5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GA-10細胞、HCC941122細胞、HEM-L細胞
Blotchy fibroblast-11細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mevo細胞、OCI-AML-3細胞、UMC11細胞
細胞生長特性:貼壁生長
HCC4006 Cell:人肺癌腺癌細胞系
正確的細胞復蘇需知事項:細胞凍存好了,接下來要注意什么問題呢?沒錯,就是記得到時間了,拿出來復蘇。那么,細胞復蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?活力檢查——千萬不要使用不健康的細胞,可能有污染(真菌、支原體等),如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查——檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞:補充新的培養(yǎng)液——在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞,計數(shù)活細胞數(shù),用凍存液調(diào)整細胞密度~5 x106 Cell s/ml (根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整);凍存液——用凍存液洗細胞并用凍存液重懸細胞,有不同類型的凍存液,根據(jù)細胞類型選擇最合適的凍存液(常用的凍存液成分有):5-10% DMSO——注意確保DMSO不含有其他的毒性物質(zhì);5-15%甘油;如果細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長,應在50%條件培養(yǎng)基內(nèi)(細胞在無血清培養(yǎng)基內(nèi)生長24小時)內(nèi)凍存和復蘇。在凍存管上標記好細胞類型,日期,凍存人等信息,并保證每凍存管不超過1.5ml。放入液氮罐之前記錄凍存管的數(shù)量和位置。以最快的速度轉(zhuǎn)移凍存管知液氮罐內(nèi),因此,此步驟使用干冰,或者把凍存管浸入裝有液氮的小盒內(nèi)。此外還要注意,在凍存管上沒有足夠的空間記錄細胞的詳細信息,做好記錄是非常非常重要的!還有一個最重要的,一定要在異地的液氮罐內(nèi)保存同樣的一份細胞,以免其中的一個液氮罐出現(xiàn)問題!細胞正確的復蘇方式和正確的凍存方式同樣重要,熟記以下要點:當從液氮罐內(nèi)取出細胞時,有可能會出現(xiàn)凍存管破裂的情況,使用保護面罩和防護服十分必要;其實,細胞復蘇只是一個簡單的實驗,不過這其中卻不可避免有一些需要注意的細節(jié),不然,也不一定會盡如人意。例如說,人身健康方面:一定要記得做好防凍工作,戴上護目鏡;盡量降低DMSO對細胞的損傷等等。
細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣
UMUC14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mono Mac 1細胞、CT26-clone 25細胞、MNNG-HOS細胞
HTR-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2330細胞、MDA-157細胞、V 79細胞
SU-DHL6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuT78細胞、NCI-H661細胞、IOSE-29細胞
ADR-RES細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SG231細胞、B-16細胞、Hs600T細胞
alpha TC1 clone 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Leukemic 1210細胞、COLO-320-HSR細胞、H19-7細胞
Panc327細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KPL-1細胞、BEL-7402細胞、COLO-320HSR細胞
OCI-AML3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0078細胞、UPCI:SCC90細胞、P3X63Ag8.653細胞
HCC4006 Cell:人肺癌腺癌細胞系
M-14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW626細胞、NIH 3T6細胞、BNL-CL.2細胞
HFLS-OA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFF-1細胞、L5178-R細胞、COV 434細胞
NEC-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-10細胞、Panc2_03細胞、KTA7細胞
RT 112細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC/PRF5細胞、H-2291細胞、KYSE0520細胞
TE7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1417細胞、CPA 47細胞、UM-UC-14細胞
hTERT-RPE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs821T細胞、STTG1細胞、DR2R 1610細胞
MDA-MB-134-VI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB436細胞、TGW-nu細胞、RAOEC細胞
Karpas 422細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WC00059細胞、NS-1細胞、TC7細胞
KU-19-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MM1.S細胞、SK-NEP-1細胞、HT細胞
AA-Mel細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW1463細胞、L 929細胞、HT-1080細胞
HFF1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BNL 1ME A.7R.1細胞、MB39細胞、H295R-S1細胞
TE1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2228細胞、COLO-320HSR細胞、Med 341細胞
KMS18細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS20-Y細胞、UCLA NPA-87-1細胞、JHH-7細胞
Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A375SM細胞、RL-95-2細胞、IB-RS-2細胞
D283-MED細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MBVP細胞、CAL 78細胞、WM115-mel細胞
NCI-SNU-520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-159細胞、H-2029細胞、NCIH1770細胞
Centre Antoine Lacassagne-51細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LWnt-3A細胞、HT 1197.T細胞、SRA01/04細胞
FCCH1024細胞系相關(guān)產(chǎn)品:751-NA細胞、KBM-7細胞、Emory University-3細胞
MF2059細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM266mel細胞、HBL 100細胞、SU.86細胞
RM1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH208細胞、RAMSCs細胞、CFPAC-1細胞
Ramos.G6.C10細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC-3T3細胞、ONS-76細胞、HUC細胞
FOXNY細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16/F1細胞、P815細胞、251 MG細胞
SUM149PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC1954細胞、hTERT RPE1細胞、HEK293-F細胞
K-562細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GFP-Olig2細胞、Colo205細胞、H3255細胞
RPMI1846細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE50細胞、RSC-96細胞、HASMC細胞
Roswell Park Memorial Institute 2650細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LPC-H12細胞、NCI-H1417細胞、Duke University 145細胞
RCC10RGB細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLA801-95C細胞、Michigan Cancer Foundation-10A細胞、MIO-M1細胞
MM134細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H526細胞、SKOV-433細胞、KFB細胞
PL-9細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IOSE-29細胞、NCIH508細胞、NPC-039細胞
Hs 870.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPVSMC細胞、MRC5細胞、KYSE510細胞
H740細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Neuro2a細胞、SUM-190細胞、IOSE80細胞
SUM 52細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA415細胞、SU86-86細胞、SKRC-20細胞
PLB 985細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SHI1細胞、OEC33細胞、FRH-0201細胞
CEK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEAS 2B細胞、HS 445T細胞、Calu-1細胞
T.T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU5細胞、H1838細胞、KNS81細胞
LAPC4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EVSAT細胞、SNU886細胞、Bovine ENDometrial cells細胞
Molm 14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-O7e細胞、HCO細胞、38C-13細胞
NL20SV細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MA-c細胞、NCI-SNU-398細胞、Jiyoye細胞
SKUT1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tn5 B1-4細胞、Calf Pulmonary Artery Endothelial細胞、HepG2細胞
NCIH526細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc8.13細胞、WERI Rb-1細胞、ATC241細胞
9L細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZYM-DIEC02細胞、Homo sapiens No. 578, tumor cells細胞、HCC1008細胞
KLN205細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa S 3細胞、ES-2細胞、H9c2 (2-1)細胞
DI-TNC1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SN12CPM6細胞、Baby Hamster Kidney from litter No. 21細胞、hEM15A細胞
HCC4006 Cell:人肺癌腺癌細胞系
LLCPK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-NMC細胞、B-CPAP細胞、HBEpiC細胞
FBHE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1781細胞、A2780/CP細胞、MHCC97L細胞
Statens Seruminstitut Rabbit Cornea細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUDHL4細胞、HT細胞、HCEC-B4G12細胞
OVCAR4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PL45細胞、Duke University 145細胞、H-2195細胞
LM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NFS 60細胞、NCI-H735細胞、P30-OHKUBO細胞
Panc02.03細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2198細胞、U118MG細胞、UWB1-289細胞
HCC0366細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF/Adr細胞、RN-c細胞、NTC200細胞
8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-15細胞、H-1930細胞、NCI H295R細胞
SKUT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-498細胞、Kit225細胞、Ra #1細胞
LC-1/sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc 10.05細胞、Scott細胞、EC-GI細胞
RKO-AS45-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0827細胞、MDA-MB-468-RED細胞、OCI Ly19細胞
MCF7-CTRL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK HEP-1細胞、Ramos 2G6 4C10細胞、KE-37細胞
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