"ACHN Cell:人腎細胞腺癌細胞系
細胞形態(tài):上皮細胞樣
細胞生長:貼壁
細胞背景資料:該細胞1979年建系,源自一名22歲患有腎細胞腺癌的白人男性的胸腔積液。干擾素可抑制該細胞的生長,該細胞多用于干擾素及其誘導(dǎo)劑的抗增殖研究。
HCV29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GS9L細胞、HCC-1171細胞、WEHI 164細胞
H-1869細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Tb 1-Lu細胞、ES2細胞、EoL-1細胞
IHC-ST1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Be-Wo細胞、H-3255細胞、HPC-Y5細胞
C2C12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OC 316細胞、COLO-HSR細胞、RPE D407細胞
細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源
ACHN Cell:人腎細胞腺癌細胞系
因為細胞生長的時候肯定是要相互聯(lián)系,大部分的細胞都是要成片生長的,尤其是對于貼壁細胞,單個細胞貼壁之后長著長著就長到一片去了。但是如果是成片的細胞抱團的話,傳代后細胞是不能貼壁的,這樣抱團的細胞就會死亡。所以,消化傳代的時候一定要將細胞消化成單個單個的獨立狀態(tài),這個啊是非??季磕愕墓Ψ虻?!細胞一旦脫落入懸液里你很難再將他吹打成單個,因為他沒有受力點了。很難找到受力點讓你對他吹打的力分散開細胞。所以必須要在細胞未脫落之前將其吹打開,受力點就是細胞貼壁的地方。這樣你就必須要嚴格控制好消化的程度啊,這和大師做飯掌握好火候是一樣的道理啊。既要消化到容易吹打下來,又不能太過,一吹就整片脫落,要單個單個地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是為了保證不同生長狀態(tài)貼壁程度的細胞能夠都維持在好的受力點分散開。這個是很重要的一點。尤其是對于某些細胞這一點就是他活去死的致命點。像Caco-2細胞就是如此。另外關(guān)于傳代很重要一點就是一定不能等到細胞長滿的時候才去消化傳代。要在細胞長到70%左右的時候就要傳代了,一旦發(fā)現(xiàn)細胞生長中已經(jīng)有疊層生長的時候就要立即進行消化傳代。不能再拖了。關(guān)于換液傳代時候洗瓶的問題。對于用DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)的細胞,你在洗的時候如果是用無血清1640去洗細胞在隨即后的幾次中會比用DMEM洗的長的要好。同樣,用1640培養(yǎng)的也有這個現(xiàn)象。如果不嫌麻煩的話,可以用PBS來洗,洗的效果和用無血清培養(yǎng)基洗的效果基本上是一樣的,對于有些細胞會更勝一籌。洗的目的主要是洗去培養(yǎng)瓶里殘留的血清,防止它對胰酶的影響。這樣能夠保證胰酶的消化能力優(yōu)先,是很關(guān)鍵的一點。先補充這么多,還會后續(xù)更新。再補充一點:傳代時PBS洗是很重要的一步,最近發(fā)現(xiàn),用PBS就可以把細胞消化開來。加入PBS放置10-15分鐘,有些需要更長的時間,等到細胞一個個分離開來的時候,就可以直接吹打下來,但是和胰酶消化一樣,要控制好時間,不能時間太過了,要不然損傷細胞,細胞不容易成活,狀態(tài)容易不好。這個方法對于某些細胞是很管用的。有些細胞用胰酶消化不容易消化成單個的時候,或者臨時沒有胰酶了,可以選用此方法。不過一定要試試,看是否適合你的細胞。
細胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法:1:2-1:3傳代,每周2-3次。
培養(yǎng)細胞真的不難,最關(guān)鍵幾點:1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進口的,真的很難相信你會把細胞養(yǎng)壞;2)動作要快,胰酶消化,換液什么,細胞暴露在空氣中的時間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時間,所謂的細胞狀態(tài)差,很多時候是傳代的原因;3)有時間的話,需要細胞計數(shù),傳相應(yīng)數(shù)目的細胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細胞的生長曲線,不會臨時要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時間,傳代細胞的實驗穿插進行,可以節(jié)省很多時間,也不會耽誤別人的實驗;5)個人的實驗器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細胞不能進去太多人,避免相互干擾。每天對待細胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細胞時有哪些經(jīng)驗教訓(xùn)可以分享呢?1)嚴格無菌操作,多噴噴酒精,要是對滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準備一套;3)有可能的話在拿到新細胞的時候做好支原體衣原體檢測;4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動加濕的話盤里的水也會很臟,勤換(滅菌水加進去);5)晚上離開的時候給傳代細胞照紫外,超凈臺是用完就開;6)是同一時間就你一個人在用傳代細胞在養(yǎng)細胞。
細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
H64細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EC109細胞、NCI H82細胞、PLC PRF 5細胞
MFE 280細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C57 Mouse Tumor 64細胞、SK ES 01細胞、HCC-1833細胞
Murine Lung Epithelial-12細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCI-LY-10細胞、JEG3細胞、HBVP細胞
P31/Fujioka細胞系相關(guān)產(chǎn)品:B958細胞、SK BR 03細胞、D562細胞
LM(TK-)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0015細胞、373 MG細胞、B/C3T3細胞
細胞生長特性:貼壁生長
ACHN Cell:人腎細胞腺癌細胞系
細胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項:1.取細胞的過程中注意帶好防凍手套,護目鏡。此項尤為重要,細胞凍存管可能漏入液氮,解凍時凍存管中的氣溫急劇上升,可導(dǎo)致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識,在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對細胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對細胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢,會造成細胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對細胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進行培養(yǎng),第二天換液。因為離心的目的是兩個,去除DMSO,去除死細胞,這個是標準流程,但對一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時間,轉(zhuǎn)的不夠活細胞沉底的少,細胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細胞會受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對細胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗中按照常規(guī)的離心分裝的方法進行復(fù)蘇,結(jié)果無異常。5.細胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細胞解凍時1ml細胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗中的經(jīng)驗總結(jié)為培養(yǎng)基越少細胞越容易貼附。6.復(fù)蘇細胞分裝的問題:試驗中我的經(jīng)驗總結(jié)為復(fù)蘇1管細胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細胞濃度過低,不利于細胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會比較大,就會影響細胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時候?qū)σ话慵毎麤]有什么影響,還有一個說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。
細胞形態(tài)特性:上皮細胞樣
C-4-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Capan2細胞、beta-TC6細胞、Jijoye細胞
ESC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y-79細胞、HS-294T細胞、HCe-8693細胞
JKT-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEYA8細胞、NCI-SNU-449細胞、HCC0366細胞
Mel526細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-MS細胞、KCL-22細胞、KRC/Y細胞
H-1876細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHL-6細胞、SNU-182細胞、AML-193細胞
EL4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDCK.2細胞、SK-MEL3細胞、SV40-HCEC細胞
HT29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW 962細胞、OVCA-432細胞、HCT_116細胞
ACHN Cell:人腎細胞腺癌細胞系
Mouse Bladder Tumor line-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NPA87-1細胞、Porcine Kidney-15細胞、IPLB-SF-21細胞
32Dcl3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH3T3細胞、A 2780 CP細胞、WPMY-1細胞
SJ-RH30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC-7細胞、ZR75-1細胞、HFB細胞
PG-LH7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RSMC細胞、T/GHA-VSMC細胞、CAL 78細胞
OVCAR 433細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO394細胞、SMMC7721細胞、RPMI 8226細胞
NCIH226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-524細胞、LTPA細胞、COLO320DM細胞
hESC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BCAP37細胞、TE12細胞、174xCEM.T2細胞
SNB.19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LLC-MK2細胞、Alpha Mouse Liver 12細胞、KYSE-180細胞
HuCC-T1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP 62細胞、P3HR1-BL細胞、H-209細胞
HuCC-T1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP 62細胞、P3HR1-BL細胞、H-209細胞
Calu6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ra #1細胞、RPMI8402細胞、HEK-A細胞
HEL9217細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kato-III細胞、H1836細胞、TE 85.T細胞
SK-N-MC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-02細胞、TE354T細胞、MDA-MB231細胞
Mink細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ROS 17/28細胞、SUIT2細胞、Human Microglia Clone 3細胞
SK.MEL.5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Co 115細胞、HCT.116細胞、PLA801C細胞
HEK-AD 293細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H184A1細胞、M059K細胞、CNLMG-B5537SKIN細胞
Leydig細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CTSC-3細胞、BPH-1細胞、MC3T3-L1細胞
190PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 888.T細胞、OCM1A細胞、Calu 3細胞
PE CA PJ34細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-716細胞、H-2286細胞、U-hth74細胞
Hs600T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNK1細胞、Hs832T細胞、U20-S細胞
SF-126細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HGSMC細胞、OCIAML2細胞、Lu-99A細胞
AMJ2-C8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ANA1細胞、CHO K1細胞、SGC 7901細胞
A2780-CP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 578.T細胞、NG10815細胞、KM-H2細胞
ACC-M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF10-A細胞、NFS60細胞、HN13細胞
PA-TU S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H322T細胞、IMR 32細胞、NCI-ADR-RES細胞
RPMI-8226細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Epithelioma-2細胞、CCRF-CEM細胞、Turbot Embryonic Cell line細胞
MDAMB134細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HIT.T15細胞、Panc-10.05細胞、Nittby-Salford 1細胞
Metastatic Variant 522細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ZR-75-30細胞、MV3細胞、MKN-74細胞
MAVER細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuH 6細胞、FL-83B細胞、P3.NS-1/1.Ag4.1細胞
OCI AML4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF細胞、H-1770細胞、T-HEECs細胞
VM-CUB1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC4細胞、MSCs(mUCMSCs)細胞、SW-948細胞
CCRF/CEM/0細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H9c2(2-1)細胞、HCC-1419細胞、H661細胞
Renal Proximal Tubule Epithelial Cells/TERT-immortalized 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H-69細胞、WI38細胞、H-292細胞
B6Tert-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM-0細胞、EL4細胞、SNT8細胞
Sp 2817細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI1846細胞、OUMS27細胞、NCI-BL6細胞
LC1-Sq細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCI1細胞、NBL-2細胞、Pa17C細胞
JB6 Cl 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞、HEY-A8細胞、NCIH1184細胞
JurkatE6-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Walker-256-TC細胞、NR8383.1細胞、28SC細胞
AZ 521細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A72細胞、H1651細胞、U-343-MG細胞
MV-1-Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIU-87/Adr細胞、NOZC-1細胞、T 98 G細胞
MV-1-Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BIU-87/Adr細胞、NOZC-1細胞、T 98 G細胞
S.B.細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL7402細胞、HEK-293-EBNA細胞、DU 145細胞
HPAEpiC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colon-38細胞、IMR-90細胞、hRPTC細胞
ACHN Cell:人腎細胞腺癌細胞系
HIMEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-157細胞、2V6.11細胞、SCL-2細胞
H660細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE5細胞、MC3T3-E1(C4)細胞、UPCI-SCC-90細胞
MAVER1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU-761細胞、HuNS1細胞、FF-WT-BJ細胞
RT 112細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC/PRF5細胞、H-2291細胞、KYSE0520細胞
SW-954細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HB 611細胞、KG1細胞、PC 12細胞
BEL-7405細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1793細胞、OSKM-1細胞、Kit225/K6細胞
NCTC-1469細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-357細胞、Jeko1細胞、FRhK4細胞
RBL-2H3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:EFM192B細胞、KB細胞、C4-2 Bone metastatic細胞
OVCAR-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:578T細胞、Epstein-Barr-1細胞、BJA-B1細胞
LC-MS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1963細胞、SNU601細胞、NCI-H2170細胞
22Rv-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SGC7901細胞、HCC-70細胞、Monomac-1細胞
DCS細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM16136細胞、JB-6細胞、RM-1細胞
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