"ACHN epithelioid cells人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞背景資料:該細(xì)胞1979年建系,源自一名22歲患有腎細(xì)胞腺癌的白人男性的胸腔積液。干擾素可抑制該細(xì)胞的生長(zhǎng),該細(xì)胞多用于干擾素及其誘導(dǎo)劑的抗增殖研究。 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng):1.取細(xì)胞的過(guò)程中注意帶好防凍手套,護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要,細(xì)胞凍存管可能漏入液氮,解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升,可導(dǎo)致爆炸。2.凍存液的問(wèn)題:凍存液的配置已是常識(shí),在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對(duì)細(xì)胞不是完全無(wú)毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢,會(huì)造成細(xì)胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。4.離心問(wèn)題:目前主要有兩種見(jiàn)解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng),第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè),去除DMSO,去除死細(xì)胞,這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程,但對(duì)一般人來(lái)說(shuō),把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間,轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少,細(xì)胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過(guò)了活細(xì)胞會(huì)受壓過(guò)大,死亡。此外在操作過(guò)程中容易污染,所以不推薦。另一種說(shuō)法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇,結(jié)果無(wú)異常。5.細(xì)胞貼壁少的問(wèn)題:教科書(shū)中說(shuō)明凍存細(xì)胞解凍時(shí)1ml細(xì)胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。6.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問(wèn)題:試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇1管細(xì)胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過(guò)多,細(xì)胞濃度過(guò)低,不利于細(xì)胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問(wèn)題:這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問(wèn)題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會(huì)比較大,就會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng),從以前的資料來(lái)看,DMSO的濃度在小于0.5%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒(méi)有什么影響,還有一個(gè)說(shuō)法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無(wú)害濃度。 NCIH1770細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:J45.01細(xì)胞、293 F細(xì)胞、Kasumi 1細(xì)胞 mousepodocyte細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HH [Human lymphoma]細(xì)胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細(xì)胞、MCA-38細(xì)胞 CHL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-03.27細(xì)胞、MALME.3M細(xì)胞、SUDHL-8細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 ACHN epithelioid cells人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞復(fù)蘇基本方法:1.從液氮罐中取出安剖;有時(shí)因安剖未封嚴(yán),浸入了液氮,取出后因安剖內(nèi)液氮迅速氣化而發(fā)生爆炸,因此應(yīng)帶有防護(hù)眼睛和手套。2.迅速放入盛有36℃~37℃水的搪瓷罐中,扣上蓋并不時(shí)搖動(dòng),盡快解凍。3.剪開(kāi)紗布口袋,取出安剖,用70%酒精擦拭消毒后,凈化臺(tái)上打開(kāi)蓋,用吸管吸出細(xì)胞懸液,裝入離心管中,再補(bǔ)加10ml培養(yǎng)液,吹打使細(xì)胞懸浮。4.低速離心(500~1000轉(zhuǎn)/分)5分鐘,取上清后再重復(fù)用培養(yǎng)液漂洗、離心。5.加入培養(yǎng)液適當(dāng)稀釋后,再移裝入培養(yǎng)瓶中,置溫箱培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液后再繼續(xù)培養(yǎng)。收到T25 flask細(xì)胞時(shí),處理方式為:在寄送過(guò)程中,為避免起泡造成細(xì)胞脫落死亡,T25 flask均加滿培養(yǎng)基。請(qǐng)檢查flask外觀,并于顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀況和有無(wú)污染現(xiàn)象,若有任何問(wèn)題,不要打開(kāi)蓋子,請(qǐng)立即通知細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室。將原封之T25 flask靜置于37°C,5%CO2培養(yǎng)箱中,使細(xì)胞回溫至37°C,并讓運(yùn)送過(guò)程中少數(shù)脫落的細(xì)胞可再附著生長(zhǎng)。隔天后,于無(wú)菌操作箱內(nèi)取出flask內(nèi)之培養(yǎng)基(取出之培養(yǎng)基可以再使用),僅留約5-10ml培養(yǎng)基于flask內(nèi),依一般培養(yǎng)方式再將細(xì)胞置入培養(yǎng)箱中,或細(xì)胞已長(zhǎng)滿盤(pán),則將細(xì)胞做傳代培養(yǎng)。 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代,每周2-3次。 NPA 87細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-6TG細(xì)胞、32Dcl3細(xì)胞、Swiss 3T3細(xì)胞 SKES1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madison 109細(xì)胞、Hs819.T細(xì)胞、HONE1細(xì)胞 751細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-NEP-1細(xì)胞、H-1792細(xì)胞、RIN-14B細(xì)胞 HCC-78細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H358細(xì)胞、RPMC細(xì)胞、L-Wnt-3A細(xì)胞 MV-522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM 102細(xì)胞、451-LU細(xì)胞、Caki2細(xì)胞 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 ACHN epithelioid cells人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁生長(zhǎng) 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮細(xì)胞樣 培養(yǎng)細(xì)胞真的不難,最關(guān)鍵幾點(diǎn):1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的,真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞;2)動(dòng)作要快,胰酶消化,換液什么,細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時(shí)間,所謂的細(xì)胞狀態(tài)差,很多時(shí)候是傳代的原因;3)有時(shí)間的話,需要細(xì)胞計(jì)數(shù),傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線,不會(huì)臨時(shí)要處理,手足無(wú)措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時(shí)間,傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行,可以節(jié)省很多時(shí)間,也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn);5)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人,避免相互干擾。每天對(duì)待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?1)嚴(yán)格無(wú)菌操作,多噴噴酒精,要是對(duì)滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準(zhǔn)備一套;3)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測(cè);4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤(pán)里的水也會(huì)很臟,勤換(滅菌水加進(jìn)去);5)晚上離開(kāi)的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外,超凈臺(tái)是用完就開(kāi);6)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。 PSN1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVEC4-10細(xì)胞、TOV21G細(xì)胞、DiFi細(xì)胞 H-1734細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JM-1細(xì)胞、3T3NIH細(xì)胞、HBL-100細(xì)胞 H-647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kit225/K6細(xì)胞、P3X63 AG 8.653細(xì)胞、NRK49F細(xì)胞 CAL 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK2細(xì)胞、HO8910/PM細(xì)胞、IPLB-SF 21細(xì)胞 SW-1088細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEMO-1細(xì)胞、C17細(xì)胞、PL45細(xì)胞 MCF7-CTRL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK HEP-1細(xì)胞、RS411細(xì)胞、Caco-2細(xì)胞 ID8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IPI-2I細(xì)胞、RA 1細(xì)胞、FHs 74 Int細(xì)胞 KB細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T-ALL1細(xì)胞、H-2171細(xì)胞、SUM-159PT細(xì)胞 GM03571細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fetal Rhesus Kidney-4細(xì)胞、HCC-1395細(xì)胞、SU86.86細(xì)胞 NCI-H196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIE-115細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細(xì)胞、L615細(xì)胞 ACHN epithelioid cells人腎細(xì)胞腺癌細(xì)胞系 H-1944細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNB.19細(xì)胞、H-35細(xì)胞、Rat 2細(xì)胞 TE-32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3-Jiyoye細(xì)胞、hTERT-RPE細(xì)胞、EVSAT細(xì)胞 HEP-3B2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CNE-2Z細(xì)胞、OCLY8細(xì)胞、KMM-1細(xì)胞 HTori3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM637A細(xì)胞、MDA330細(xì)胞、P30/Ohkubo細(xì)胞 Mel-MeWo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UK Pan-1細(xì)胞、K562細(xì)胞、P3HR1-BL細(xì)胞 MDA-MB-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE70細(xì)胞、MLA-144細(xì)胞、CTX TNA2細(xì)胞 MDA-MB-231細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE70細(xì)胞、MLA-144細(xì)胞、CTX TNA2細(xì)胞 Laboratory of Allergic Diseases 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-1細(xì)胞、Hep 3B2_1-7細(xì)胞、GM-215細(xì)胞 Mv1Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63-Ag8.653細(xì)胞、KU-812細(xì)胞、BIU-87細(xì)胞 KNS-62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMNSAH-DF-1細(xì)胞、SK-N-BE(2)細(xì)胞、MNNG/HOS細(xì)胞 Pa16C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:F9細(xì)胞、Panc02-H0細(xì)胞、HO-8910 PM細(xì)胞 NUGC4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCEpiC細(xì)胞、IGROV-1細(xì)胞、TGW-nu-1細(xì)胞 MES-SA/Dx-5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RS1細(xì)胞、HEK 293T/17細(xì)胞、HSCT6細(xì)胞 130 T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2106細(xì)胞、3396細(xì)胞、MDAMB231細(xì)胞 NCI-H2122細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:R1610細(xì)胞、U-CH1細(xì)胞、HFL1細(xì)胞 U-373-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC 3T3-E1細(xì)胞、WSU-DLCL-2細(xì)胞、PANC0327細(xì)胞 LADMAC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TO175T細(xì)胞、MRC 5細(xì)胞、FHCRC subclone 11細(xì)胞 SK MEL-28細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mv 1 Lu細(xì)胞、SK-ChA1細(xì)胞、RGCs細(xì)胞 HRA 19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞、NCI-H2444細(xì)胞、L02細(xì)胞 NCI.H522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-4 (S+L-)細(xì)胞、GM03573A細(xì)胞、NS1-1 Ag4.1細(xì)胞 SKNBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PZ-HPV-7細(xì)胞、L-132細(xì)胞、H-446細(xì)胞 NH-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE-2細(xì)胞、HS0578T細(xì)胞、SK-MES1細(xì)胞 A-875細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA-433細(xì)胞、Helacyton gartleri細(xì)胞、MIA Paca2細(xì)胞 Hs 683細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RDES細(xì)胞、Hs606細(xì)胞、HuH-6細(xì)胞 MD Anderson-Metastatic Breast-468細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:YH-13細(xì)胞、SLK細(xì)胞、NCIH1869細(xì)胞 HCT 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KNS42細(xì)胞、P-388D1細(xì)胞、WEHI 231細(xì)胞 Opossum Kidney細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK RC 52細(xì)胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-1細(xì)胞、NHA細(xì)胞 NCIH2172細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCA-205細(xì)胞、KY-50細(xì)胞、HBMEC細(xì)胞 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H647細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS-273細(xì)胞、HDQ-P1細(xì)胞、H-146細(xì)胞 "
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