"DSL-6A/C1 Cell:大鼠胰腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 細(xì)胞背景資料:胰腺癌;雄性;Lewis KMH2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE(2)細(xì)胞、ARIP細(xì)胞、PG-4 (S+L-)細(xì)胞 CEM/0細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1734細(xì)胞、GM01232E細(xì)胞、NTera-2D1細(xì)胞 KTCTL140細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2009細(xì)胞、Evsa-T細(xì)胞、COLO 678細(xì)胞 PL45細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:4T1細(xì)胞、NHDF細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-12T細(xì)胞 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 DSL-6A/C1 Cell:大鼠胰腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中相關(guān)問(wèn)題總結(jié):懸浮性細(xì)胞應(yīng)如何繼代處理?一般僅需持續(xù)加入新鮮培養(yǎng)基于原培養(yǎng)角瓶中,稀釋細(xì)胞濃度即可,若培養(yǎng)液太多時(shí),可將培養(yǎng)角瓶口端稍微抬高,直到無(wú)法容納為止。分瓶時(shí)取出一部份含細(xì)胞之培養(yǎng)液至另一新的培養(yǎng)角瓶,加入新鮮培養(yǎng)基稀釋至適當(dāng)濃度,重復(fù)前述步驟即可。欲將一般動(dòng)物細(xì)胞離心下來(lái),其離心速率應(yīng)為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動(dòng)物細(xì)胞,其離心速率一般為300xg(約1,000rpm),5-10分鐘,過(guò)高之轉(zhuǎn)速,將造成細(xì)胞死亡;細(xì)胞之接種密度為何?依照細(xì)胞株基本數(shù)據(jù)上之接種密度或稀釋分盤(pán)之比例接種即可。細(xì)胞數(shù)太少或稀釋的太多亦是造成細(xì)胞無(wú)法生長(zhǎng)之一重要原因;細(xì)胞冷凍培養(yǎng)基之成份為何?動(dòng)物細(xì)胞冷凍保存時(shí)最常使用的冷凍培養(yǎng)基是含5-10%DMSO(dimethyl sulfoxide)和90-95%原來(lái)細(xì)胞生長(zhǎng)用之新鮮培養(yǎng)基均勻混合之。注意:由于DMSO稀釋時(shí)會(huì)放出大量熱能,故不可將DMSO直接加入細(xì)胞液中,必須使用前先行配制完成;DMSO之等級(jí)和無(wú)菌過(guò)濾之方式為何?冷凍保存使用之DMSO等級(jí),必須為T(mén)issue culture grade之DMSO,其本身即為無(wú)菌狀況,次開(kāi)瓶后應(yīng)立即少量分裝于無(wú)菌試管中,保存于4°C,避免反復(fù)冷凍解凍造成DMSO之裂解而釋出有害物質(zhì),并可減少污染之機(jī)會(huì)。若要過(guò)濾DMSO,則須使用耐DMSO之Nylon材質(zhì)濾膜;冷凍保存細(xì)胞之方法?冷凍保存方法一:冷凍管置于4°C 30~60分鐘→ (-20°C 30分鐘)→-80°C 16~18小時(shí)(或隔夜)→液氮槽vaporphase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3°C至–80°C以下,再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。-20°C不可超過(guò)1小時(shí),以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80°C冰箱中,惟存活率稍微降低一些;細(xì)胞欲冷凍保存時(shí),細(xì)胞冷凍管內(nèi)應(yīng)有多少細(xì)胞濃度?冷凍管內(nèi)細(xì)胞數(shù)目一般為1x10(6)cells/ml vial,融合瘤細(xì)胞則以5x10(6)cells/ml vial為宜;應(yīng)如何避免細(xì)胞污染?細(xì)胞污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌。主要的污染原因?yàn)闊o(wú)菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無(wú)菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來(lái)源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法;如果細(xì)胞發(fā)生微生物污染時(shí),應(yīng)如何處理?直接滅菌后丟棄之。 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 細(xì)胞凍存的步驟:1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類型來(lái)選擇;3)將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過(guò)夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過(guò)夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見(jiàn),凍存半年后,取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 GH 3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLCL9B10細(xì)胞、SP-2/0-AG14細(xì)胞、SU-DHL2細(xì)胞 RPMI-8226S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCSMC細(xì)胞、C32 mel細(xì)胞、HT115細(xì)胞 CCD 841 CoN細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUD4細(xì)胞、DF-1細(xì)胞、GM05887A細(xì)胞 LAD-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293FT細(xì)胞、PLC-PRF-5細(xì)胞、TB1 Lu細(xì)胞 NCI-H810細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ACHN細(xì)胞、JB6 Cl 30-7b細(xì)胞、H2228細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁 DSL-6A/C1 Cell:大鼠胰腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞傳代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn):體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞,并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后,由于密度過(guò)大生存空間不足而引起營(yíng)養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細(xì)胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中,細(xì)胞培增3~6次。細(xì)胞傳代后,一般經(jīng)過(guò)三個(gè)階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度,即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/100個(gè)細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細(xì)胞可達(dá)3~5%;細(xì)胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時(shí)期,稱指數(shù)增生期(對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期),適宜進(jìn)行各種試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)步驟:1.將長(zhǎng)成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺(tái)中倒掉瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞,如果細(xì)胞變圓,相互之間不再連接成片,這時(shí)應(yīng)立即在超凈臺(tái)中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細(xì)胞懸液。3.將細(xì)胞懸液吸出2ml左右,加到另一個(gè)培養(yǎng)瓶中并向每個(gè)瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細(xì)胞在2小時(shí)左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶?jī)?nèi)形成單層,需要再次進(jìn)行傳代。 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū) ME-180細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16BL-6細(xì)胞、B16 F1細(xì)胞、SJ-Rh 30細(xì)胞 H157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF-CEM C1細(xì)胞、NCIH1048細(xì)胞、NCIH841細(xì)胞 CAL 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PTK2細(xì)胞、HO8910/PM細(xì)胞、IPLB-SF 21細(xì)胞 Line 697細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUT 226細(xì)胞、L-cells細(xì)胞、HeLa-S3細(xì)胞 OCI-Ly 7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H220細(xì)胞、253J-BV細(xì)胞、Tsup-1細(xì)胞 PZ-HPV-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-216細(xì)胞、174xCEM.T2細(xì)胞、HEK-293FT細(xì)胞 KBM5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMM-1細(xì)胞、Virginia Mason Research Center-Renal Cancer Z細(xì)胞、NW38細(xì)胞 DSL-6A/C1 Cell:大鼠胰腺癌細(xì)胞系 NCI-H2170細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細(xì)胞、BHT101細(xì)胞、COLO-824細(xì)胞 EFM-192C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-33A細(xì)胞、MDAPC2B細(xì)胞、293-H細(xì)胞 MDCK-II細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-Lu-65細(xì)胞、MN-60細(xì)胞、HCC94細(xì)胞 RPTEC/TERT 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RFL6細(xì)胞、NCIH1568細(xì)胞、Psi2 DAP細(xì)胞 DanG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:207細(xì)胞、TGW細(xì)胞、T2(174 x CEM.T2)細(xì)胞 Nb2a細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM clone 7細(xì)胞、PIGI細(xì)胞、Kato-III細(xì)胞 Panc-10.05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA432_Bast細(xì)胞、GP2-293細(xì)胞、Rat1細(xì)胞 Hs68細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DMS 114細(xì)胞、OCI-LY-1細(xì)胞、M21細(xì)胞 Panc-3_27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WiDr細(xì)胞、SUIT 2細(xì)胞、PC3M-2B4細(xì)胞 Panc-3_27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WiDr細(xì)胞、SUIT 2細(xì)胞、PC3M-2B4細(xì)胞 GM02132C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HR-8348細(xì)胞、GLC82細(xì)胞、MC57G細(xì)胞 HOS/MNNG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2347細(xì)胞、Centre Antoine Lacassagne-51細(xì)胞、JROECL19細(xì)胞 A3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF-763細(xì)胞、X63-Ag8-653細(xì)胞、NPA87細(xì)胞 MTC-TT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UMC11細(xì)胞、MeWo細(xì)胞、HBVSMC細(xì)胞 KMS26細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Kuramochi細(xì)胞、NCI-441細(xì)胞、3T3 Swiss Albino細(xì)胞 GTL 16細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FO [Mouse myeloma]細(xì)胞、UPCISCC154細(xì)胞、MDAMB436細(xì)胞 Epstein-Barr-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HK2細(xì)胞、MLTC-1細(xì)胞、SKMES細(xì)胞 Onda 11細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-N-BE(2)C細(xì)胞、GM02219D細(xì)胞、COLO206細(xì)胞 KP 4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Saos2細(xì)胞、D341Med細(xì)胞、CCD 19Lu細(xì)胞 HEK293-FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SVEC 4-10細(xì)胞、LM2-4175細(xì)胞、PL12細(xì)胞 WILL-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Baby Hamster Kidney from litter No. 21細(xì)胞、BMF細(xì)胞、NCIH2172細(xì)胞 JROECL 19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BI-Mel細(xì)胞、KRC Y細(xì)胞、HBSMC細(xì)胞 H-1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUCEC細(xì)胞、RCSMC細(xì)胞、SkChA-1細(xì)胞 NOZAWA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ME180細(xì)胞、NCI-SNU-878細(xì)胞、HepaRG細(xì)胞 NCIH889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS180細(xì)胞、SK-HEP-1細(xì)胞、FHL 124細(xì)胞 Jurkat細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pt-K1細(xì)胞、ACC2細(xì)胞、mRMEC細(xì)胞 Panc-03.27細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO 320F細(xì)胞、NKT細(xì)胞、B16-BL6細(xì)胞 MDAMB415細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293F細(xì)胞、SCL-I細(xì)胞、MDA436細(xì)胞 EB2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CX1細(xì)胞、786O細(xì)胞、NCIH524細(xì)胞 SNU423細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OCILY-10細(xì)胞、GOTO細(xì)胞、EFM192A細(xì)胞 Sol8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RAW2647細(xì)胞、Oregon J-111細(xì)胞、U-118MG細(xì)胞 4-1st細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-5細(xì)胞、HL 60細(xì)胞、NCI H548細(xì)胞 NR-8383細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU4細(xì)胞、NK92細(xì)胞、HFL 1細(xì)胞 SRA01/04 (HLE)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AMO-1細(xì)胞、SBC3細(xì)胞、3-LL細(xì)胞 SUD6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1623細(xì)胞、RCS細(xì)胞、Walker-256-TC細(xì)胞 CV-1 in Origin Simian-7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MCF-7/ADR細(xì)胞、U937細(xì)胞、Vero C1008細(xì)胞 Be Wo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB330細(xì)胞、LNCaP C4-2B細(xì)胞、IMR-32細(xì)胞 OEC19細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE671細(xì)胞、PE/CA-PJ34細(xì)胞、Mia PACA 2細(xì)胞 HFE-145細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VSMC細(xì)胞、H1876細(xì)胞、T 84細(xì)胞 COLO.205細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC3細(xì)胞、RCM1細(xì)胞、NCI-1155細(xì)胞 ECC 12細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC-2細(xì)胞、J774細(xì)胞、3T3 J2細(xì)胞 EL-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NHDF細(xì)胞、16HBE14o-細(xì)胞、MHCC-97細(xì)胞 NCI-H441細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-366細(xì)胞、MN 60細(xì)胞、DITNC1細(xì)胞 DSL-6A/C1 Cell:大鼠胰腺癌細(xì)胞系 SKNEP-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuLEC-5a細(xì)胞、KM-12細(xì)胞、786-O細(xì)胞 mREC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNBE(2c)細(xì)胞、16-HBE14o細(xì)胞、LLC-PK-1細(xì)胞 MDA-MB-175細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293T/17細(xì)胞、MDA-MB-453細(xì)胞、UCH-1細(xì)胞 CEMC7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HPDLF細(xì)胞、Jijoye細(xì)胞、H.Ep. #2細(xì)胞 Caco-2/BBe 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW620細(xì)胞、RA-FLSs細(xì)胞、SK HEP-1細(xì)胞 RMS13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WM115-mel細(xì)胞、P3 NS1 Ag4細(xì)胞、SP2細(xì)胞 P-3J細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE14細(xì)胞、NCI-H1944細(xì)胞、VMCUB-1細(xì)胞 HEK293S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Michigan Cancer Foundation-12A細(xì)胞、SUM149PT細(xì)胞、LNCaP.FGC細(xì)胞 RC13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:JF305細(xì)胞、BE2-C細(xì)胞、HSC5細(xì)胞 AZ521細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:3T6 Swiss Albino細(xì)胞、X63Ag8-653細(xì)胞、Uhth-74細(xì)胞 Be-Wo細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-022細(xì)胞、SIRC細(xì)胞、3T3(A31)細(xì)胞 8226細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCT-15細(xì)胞、SKMES1細(xì)胞、NRK clone 49F細(xì)胞 "
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