"KYSE-140 Cell:人食管鱗癌細胞系 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞背景資料:食管鱗癌細胞;男性 NCIH2141細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Large Cell Lung Cancer-103H細胞、BJAB-1細胞、MESSA-DX5細胞 HcaF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H8細胞、YD-15細胞、RT-112細胞 MC3T3-E1 Subclone 4細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCF細胞、H184A1細胞、CAL 148細胞 INS1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCAR-8細胞、L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、MRCV細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 KYSE-140 Cell:人食管鱗癌細胞系 如何把細胞養(yǎng)的形態(tài)更好更漂亮。1.不同的細胞,喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個不僅僅是說培養(yǎng)基的不同,還有就是細胞生長的空間密度問題。有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應該留很少量的細胞,這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。2.對于有些人總是會遇到養(yǎng)的細胞形態(tài)怎么都不好的問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞,如果細胞形態(tài)不好,(或者細胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進行預吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細胞我們只吹打,不消化的);其次,把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。呵呵。如果一次效果還不理想,可重復多次。直到找到細胞完美形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。3.關(guān)于培養(yǎng)瓶內(nèi)加入培養(yǎng)基的量的問題。這個是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些細胞反而是培養(yǎng)基少一點相反細胞形態(tài)會長得比較好。(可能也是競爭很大,有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。)對于生長速度快的細胞,易生長的細胞加少一點培養(yǎng)基細胞形態(tài)會更好。但是要注意換液掌握。4.關(guān)于選擇培養(yǎng)瓶的問題。個人發(fā)現(xiàn)生長速度快的細胞在玻璃瓶內(nèi)生長的狀態(tài)會比一次性相對好一些。而對于同一種細胞,在其生長旺盛快速的時期在玻璃瓶內(nèi)的生長狀態(tài)也比內(nèi)好。這可能是因為比玻璃瓶更容易貼壁。生長速度快的細胞在這種相對“更安逸”的環(huán)境里反而長得狀態(tài)不如玻璃瓶好。所以對于生長速度慢的細胞如果想要更漂亮的細胞狀態(tài),比玻璃瓶會好,對于生長速度慢的細胞,玻璃瓶則會更好。同樣,對于同一種細胞,在其生長速度慢的時候,會好一點,比如剛剛復蘇的時候,或者原代培養(yǎng)的時候。而在其生長旺盛的時候,玻璃瓶則相對會好一點。 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 細胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細胞為貼壁細胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決;2)貼壁細胞生長緩慢;適當提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細胞進行消化,重懸打散細胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 NE-4C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PK-136細胞、rRMECs細胞、NuTu-19細胞 SK 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Colo-206F細胞、SW 756細胞、Hep 3B2細胞 Pa18C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-766T細胞、BSC40細胞、NCI-441細胞 NCI-HUT-292細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2291細胞、H322T細胞、SUDHL4細胞 SNU-886細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SuDHL 2細胞、RBL 1細胞、MIN-6細胞 細胞生長特性:貼壁 KYSE-140 Cell:人食管鱗癌細胞系 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細胞貼壁要求不是很嚴格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細胞很多且需要大量細胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細胞或細胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細胞,收集全部的細胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉! 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 AE 1201細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ly10細胞、L-5178-Y細胞、SNU-1040細胞 SN12CPM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SV40-HCEC細胞、COLO 320HSR細胞、Hs-274-T細胞 OCI-Ly7細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRK 49F細胞、HFT 8810細胞、PC-2 [Human pancreatic carcinoma]細胞 SK MEL 28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fetal Human Colon細胞、NP69細胞、HREC細胞 GM03320D細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TK.10細胞、HLEB3細胞、RH35細胞 RN-c細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BSC-1細胞、X63細胞、NTERA-2細胞 HSKMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C8166-CD4細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-157細胞、SIRC細胞 KYSE-140 Cell:人食管鱗癌細胞系 H2108細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-13細胞、H-2405細胞、NCIH69細胞 H-1944細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNB.19細胞、H-35細胞、Rat 2細胞 OE21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H508細胞、ECV304細胞、H64細胞 Vx-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuPT3細胞、GL-261細胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細胞 U14細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IFRS1細胞、DR2R 1610細胞、H-1838細胞 SF 539細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU739細胞、HTR-8/SV-neo細胞、NH6細胞 FRTL-5 Cl 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3X63Ag8.653細胞、HUCEC細胞、MCF-7/AdrR細胞 CAL-62細胞系相關(guān)產(chǎn)品:mRMEC細胞、KYSE180細胞、HS766T細胞 BTT739細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-937細胞、H1869細胞、My-La 2059細胞 BTT739細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-937細胞、H1869細胞、My-La 2059細胞 PCI-SG231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HT1376細胞、DU-145細胞、DF1細胞 K1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:McCoy B細胞、PLA-802細胞、PNEC30細胞 BCP1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M4e細胞、SK-CO-1細胞、IOSE29細胞 HBVP細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1793細胞、Panc-8_13細胞、Reuber H35細胞 PANC0403細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L-540細胞、RGE細胞、A704細胞 DHL-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS-1細胞、CAL-51細胞、PTK 2細胞 ACC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:4T1-LUC細胞、HRA 19細胞、SUM-149細胞 TW 01細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A20細胞、ECC-1細胞、SC細胞 NCI-H1975細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LS-174細胞、H-889細胞、Jurkat-E6細胞 NTERA-2cl.D1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:DHBE細胞、MDA PCa 2b細胞、KCL22S細胞 P3/X63/Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-5細胞、CTLL2細胞、CD18/HPAF細胞 P3/X63/Ag8.653細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-5細胞、CTLL2細胞、CD18/HPAF細胞 FDCP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M21細胞、HCC1599細胞、GT1-1細胞 KU812-F細胞系相關(guān)產(chǎn)品:639V細胞、B35細胞、Pro-5 Lec1.3c細胞 HHUA細胞系相關(guān)產(chǎn)品:U266BL細胞、Hs-578Bst細胞、NK92-MI細胞 Danio rerio Gill細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKG-3a細胞、343MG細胞、FHs74Int細胞 CEM-CCRF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PLC-8024細胞、A7r5細胞、COLO 320HSR細胞 IEC 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H865細胞、H4細胞、Hs 606.T細胞 HCEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HARAB細胞、VSC4.1細胞、B104 [Rat neuroblastoma]細胞 Wien 133細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1404細胞、KLM-1細胞、MNNG細胞 Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS940細胞、S.B.細胞、Ca761細胞 NCI-H820細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P31/FUJ細胞、Caco 2細胞、HHUA細胞 SK-MEL24細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IGROV 1細胞、EFM192B細胞、COLO-1細胞 HR1K細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB6 Cl 30-7b細胞、TM-4細胞、IB-RS2細胞 SW 620細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-650細胞、SKMEL2細胞、Hs695細胞 CWR22R-V1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HLE-SRA-01/04細胞、NG-108-15細胞、CAL12T細胞 ABC-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1869細胞、L 363細胞、NCIH1930細胞 IOSE29細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C32r細胞、SCC7細胞、CORL26細胞 Super Tube細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCCVII/St細胞、COR-L23/P細胞、TE5細胞 H125細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLM16細胞、LLC-WRC 256細胞、RPPVEC細胞 H125細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLM16細胞、LLC-WRC 256細胞、RPPVEC細胞 SW-837細胞系相關(guān)產(chǎn)品:P3HR-1細胞、WM451Lu細胞、TCam-2細胞 NCI-H1299細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COR-L23細胞、Madison 109細胞、C643細胞 KYSE-140 Cell:人食管鱗癌細胞系 DLD 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PC-3細胞、MCF-12A細胞、NK-92 transfected with MFG-hIL2細胞 H524細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MN-60細胞、H1781細胞、GM3569細胞 OCI AML5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1693細胞、Hs-688A-T細胞、X63Ag8.653細胞 HLF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-T6細胞、NCI-H774細胞、SW-1222細胞 PM6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1694細胞、hEEC細胞、HCT116細胞 C127細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M 1細胞、PTK 1細胞、TE6細胞 MIA-PaCa-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Dakiki細胞、HSC3細胞、HCPEpiC細胞 GLRK 13細胞系相關(guān)產(chǎn)品:IB-RS-2細胞、RCC_7860細胞、67NR細胞 MDA-1386細胞系相關(guān)產(chǎn)品:786-0細胞、VMM-5A細胞、SK BR 03細胞 NS1/1-Ag4.1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JEG-3細胞、SW 839細胞、MCF-7ADR細胞 IPLB-SF 21AE細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKO3細胞、Intestinal Porcine Epithelial Cell line-J2細胞、HCC-2108細胞 PCI:SG-231細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK-ES1細胞、A20細胞、FLC7細胞 "
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