"NS20Y Cell:小鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞系 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞背景資料:神經(jīng)母細胞瘤;雄性;A/J ME1細胞系相關產(chǎn)品:TE9細胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細胞、NCI-H2228細胞 mRTEC細胞系相關產(chǎn)品:MOLM-14細胞、MES13細胞、LL2細胞 Tca8113細胞系相關產(chǎn)品:Hs 695T細胞、SUDHL-5細胞、Tu-212細胞 SUM-102細胞系相關產(chǎn)品:H-1651細胞、NRK 49F細胞、SKN-AS細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 NS20Y Cell:小鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞系 細胞的凍存:目前,細胞凍存最常用的技術是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng)液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產(chǎn)細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×10(6)~1×10(7)/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或專用冷凍塑料管中,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內;置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作):1)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,PBS緩沖液潤洗細胞兩次,加2-3ml 0.25%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間,通??刂圃冢?2min);2)鏡下觀察消化情況,在細胞邊緣縮小,貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培養(yǎng)基,輕輕吹打細胞層,盡量把細胞層吹落,吹散;3)取部分細胞懸液轉移到新的培養(yǎng)皿/瓶中,添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基,把細胞懸液打勻,于培養(yǎng)箱中培養(yǎng);4)注意培養(yǎng)基PH值變化情況,定期換液(每周2-3次),待細胞密度達到80%以后重復1項操作或者凍存;特別注意:(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng),建議添加雙抗培養(yǎng))1)收到細胞后請盡快更換為含15%血清的新鮮培養(yǎng)基,如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶,請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加10%的血清,(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過72小時);2)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化,請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代,請優(yōu)先選擇直徑6cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng);3)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂,漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 JJN-3細胞系相關產(chǎn)品:HOC1細胞、CW2細胞、UMUC14細胞 P815細胞系相關產(chǎn)品:SKMEL2細胞、NPA'87細胞、hFOB 1.19細胞 HS-5細胞系相關產(chǎn)品:HEK293-F細胞、HEK293細胞、TN5B14細胞 293 c18細胞系相關產(chǎn)品:NCI-SNU-668細胞、HPAF-I細胞、A431/P細胞 WEHI 164 TC細胞系相關產(chǎn)品:Hs683T細胞、OVCA 432細胞、MARC 145細胞 細胞生長特性:貼壁 NS20Y Cell:小鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞系 貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法:一、加入胰酶等細胞脫落后,再加培養(yǎng)基中止胰酶作用,離心傳代;二、加入胰酶后,鏡下觀察待細胞始脫落時,棄胰酶,加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩,而后者有可能對細胞施加胰酶選擇,因為總是貼壁不牢的細胞先脫落,對腫瘤細胞來說,這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),棄之,再加入適量胰酶作用10s-40s(根據(jù)細胞消化的難易程度),棄之,這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞,可以用2%利多卡因消化5-8分鐘,然后再棄去,加培養(yǎng)基吹打也可以,對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點,直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后,用0.04%的EDTA沖洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室溫孵育5min,棄取大部分EDTA,加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積1/10v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好,有證據(jù)嗎?培養(yǎng)的BASMC:倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶約6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和,并分瓶這種方法簡單、省事;效果很好并且不損失細胞! 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 Fetal Rhesus Kidney-4細胞系相關產(chǎn)品:IGR-OV1細胞、HOS TE85細胞、LAN-6細胞 HIT細胞系相關產(chǎn)品:SUM-52細胞、PLA801C細胞、MEL-526細胞 SV40-MES13細胞系相關產(chǎn)品:KRC Y細胞、G519細胞、149 PT細胞 N-9細胞系相關產(chǎn)品:PK15細胞、MSF細胞、CG4細胞 Ly18細胞系相關產(chǎn)品:NCIH28細胞、TC-1 [Mouse lung]細胞、P3.times.63 Ag8.653細胞 JVM3細胞系相關產(chǎn)品:NCI-SNU-761細胞、MDA-MB-231細胞、SH-SY5Y細胞 Neukoplast細胞系相關產(chǎn)品:HKF細胞、Laboratory of Allergic Diseases 2細胞、TOV21G細胞 NS20Y Cell:小鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞系 HHL5細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H322細胞、HTori3細胞、DOK細胞 COLO 320F細胞系相關產(chǎn)品:G-402細胞、IAR-20細胞、Immortalized Human Hepatocytes細胞 3T3-F442A細胞系相關產(chǎn)品:rRTEC細胞、SK-LU-1細胞、Panc 05.04細胞 RPMI-6666細胞系相關產(chǎn)品:SKG3A細胞、MC-116細胞、Madin-Darby Bovine Kidney細胞 T-ALL-1細胞系相關產(chǎn)品:NCI-H716細胞、NCIH2342細胞、ReNcell CX細胞 SNU739細胞系相關產(chǎn)品:CF-PAC1細胞、149 PT細胞、SNU-484細胞 NCIH1963細胞系相關產(chǎn)品:C1498細胞、NR-8383細胞、ES2細胞 MDAMB435細胞系相關產(chǎn)品:NCIH647細胞、PTK1細胞、UACC 812細胞 LS-513細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1792細胞、OCIAML4細胞、brain-derived Endothelial cells.3細胞 LS-513細胞系相關產(chǎn)品:NCIH1792細胞、OCIAML4細胞、brain-derived Endothelial cells.3細胞 CemT4細胞系相關產(chǎn)品:HCC-1937細胞、X63-Ag8細胞、GM2219C細胞 UPCI:SCC154細胞系相關產(chǎn)品:PTK1細胞、Lu99A細胞、HSC3細胞 MDCK supertube細胞系相關產(chǎn)品:MF2059細胞、NCIH1693細胞、NBL-4細胞 L-Wnt-3A細胞系相關產(chǎn)品:MC3T3-E細胞、A-172細胞、RPMI-1788細胞 MFE-296細胞系相關產(chǎn)品:PIG1細胞、H-747細胞、A375mel細胞 OCI AML5細胞系相關產(chǎn)品:H-1693細胞、Hs-688A-T細胞、X63Ag8.653細胞 P3.653細胞系相關產(chǎn)品:Ect1/E6E7細胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2細胞、H446細胞 A 2058細胞系相關產(chǎn)品:SK-N-BE2C細胞、G-292, clone A141B1細胞、LS 174 T細胞 MDA MB 453細胞系相關產(chǎn)品:M-G63細胞、T47D:A細胞、C32-mel細胞 LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞系相關產(chǎn)品:H2347細胞、DSL-6A-C1細胞、RIMEC細胞 OVCAR 420細胞系相關產(chǎn)品:Panc 02.03細胞、GM01232細胞、Hs675T細胞 MHCC97L細胞系相關產(chǎn)品:MESSADX5細胞、COLO 741細胞、CEM-C7細胞 MOLT 3細胞系相關產(chǎn)品:BC-009細胞、OAW-42細胞、LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞 OCI-Ly07細胞系相關產(chǎn)品:MDA-175細胞、Nthy-ori 3-1細胞、U118MG細胞 SK-ES細胞系相關產(chǎn)品:LK 2細胞、Emory University-3細胞、U-138 MG細胞 MIO-M1細胞系相關產(chǎn)品:PL12細胞、OCI/AML2細胞、ZR7530細胞 FF-WT-BJ細胞系相關產(chǎn)品:hTERT-HPNE細胞、R 2 C細胞、H-4細胞 LICR-HN-6細胞系相關產(chǎn)品:MB468細胞、38C-13細胞、Roswell Park Memorial Institute 6666細胞 BSC-1細胞系相關產(chǎn)品:COV 504細胞、Tn5B1-4細胞、RBMVEC細胞 PTK-2細胞系相關產(chǎn)品:MHCC97L細胞、SUDHL-1細胞、Ramos (RA 1)細胞 COLO-394細胞系相關產(chǎn)品:H810細胞、T2 (174 x CEM.T2)細胞、NBL-12細胞 H-1618細胞系相關產(chǎn)品:PCI:SG-231細胞、JROECL 33細胞、BC-019細胞 CAKI 2細胞系相關產(chǎn)品:RPMI-6666細胞、BNL 1MEA.7R.1細胞、CHL/IU細胞 HMVEC細胞系相關產(chǎn)品:NCI H226細胞、MCF12A細胞、H4細胞 KMS-11細胞系相關產(chǎn)品:NOR10細胞、NCIH2106細胞、BT細胞 SU-DHL6細胞系相關產(chǎn)品:HuT78細胞、NCI-H661細胞、IOSE-29細胞 SJ-Rh 30細胞系相關產(chǎn)品:LLC PK1細胞、H716細胞、RKN細胞 MDA MB 134VI細胞系相關產(chǎn)品:KYSE410細胞、DHL-4細胞、PK-136細胞 MCF-12F細胞系相關產(chǎn)品:COLO-741細胞、FHL 124細胞、GRSL細胞 LAD-2細胞系相關產(chǎn)品:293FT細胞、PLC-PRF-5細胞、TB1 Lu細胞 HUT-226細胞系相關產(chǎn)品:RCC23細胞、COLO-699細胞、OVCAR10細胞 COLO 699細胞系相關產(chǎn)品:TE671/RD細胞、UCD-MLA-144細胞、ZR-75-30細胞 SuperTube細胞系相關產(chǎn)品:H1930細胞、TGW-I-nu細胞、LM6細胞 NS20Y Cell:小鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞系 HMrSV5細胞系相關產(chǎn)品:CL11細胞、NCIH1437細胞、MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI細胞 138 MG細胞系相關產(chǎn)品:HCC-9724細胞、A-204細胞、C2BBe1細胞 GDM-1細胞系相關產(chǎn)品:MCF7-GFP細胞、B16 melanoma F10細胞、UWB1289細胞 NCIH1693細胞系相關產(chǎn)品:C4-2 B細胞、Metastatic Variant-522細胞、COLO-320DM細胞 HK2細胞系相關產(chǎn)品:OCI-Ly 10細胞、2E8細胞、H-4-II-E細胞 NCIH322細胞系相關產(chǎn)品:SW-1116細胞、H-865細胞、Henrietta Lacks cells細胞 LLC PK1細胞系相關產(chǎn)品:U20S細胞、LTEP-s細胞、JTC-28細胞 U-87MG細胞系相關產(chǎn)品:D341Med細胞、B16/BL6細胞、TT細胞 H-1672細胞系相關產(chǎn)品:PC3M細胞、Calu-3細胞、SK MEL 28細胞 BS-C-1細胞系相關產(chǎn)品:U87-MG細胞、RCC-4細胞、H-1693細胞 KYSE0410細胞系相關產(chǎn)品:H929細胞、GTL-16細胞、SKG-IIIa細胞 3 LL細胞系相關產(chǎn)品:UM-UC14細胞、CT26WT細胞、HCA7細胞 "
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