"NS20Y epithelioid cells小鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞背景資料：神經(jīng)母細胞瘤；雄性；A/J
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
貼壁細胞消化傳代時通常采用兩種方法：一、加入胰酶等細胞脫落后，再加培養(yǎng)基中止胰酶作用，離心傳代；二、加入胰酶后，鏡下觀察待細胞始脫落時，棄胰酶，加培養(yǎng)液分瓶。但前者太麻煩，而后者有可能對細胞施加胰酶選擇，因為總是貼壁不牢的細胞先脫落，對腫瘤細胞來說，這部分細胞有可能是惡性程度較高的細胞亞群。一種簡單的消化傳代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(３０s)，棄之，再加入適量胰酶作用１０s-４０s(根據(jù)細胞消化的難易程度)，棄之，這樣依賴殘余的胰酶就可將細胞消化單細胞。對于較難消化的細胞，可以用２%利多卡因消化５-８分鐘，然后再棄去，加培養(yǎng)基吹打也可以，對細胞的影響不大。不用PBS也不用Hanks洗，只要把舊培養(yǎng)液吸的干凈一點，直接加酶消化應該不會有什么問題。棄培養(yǎng)液后，用０.０４%的EDTA沖洗一次，再用１/４v的０.０４%的EDTA室溫孵育５min，棄取大部分EDTA，加入與剩余EDTA等量的胰酶(預熱)總體積１/１０v。消化到有細胞脫落。不過有人說EDTA對細胞不好，有證據(jù)嗎？培養(yǎng)的BASMC：倒掉舊培養(yǎng)液加入少量胰酶沖一下，倒掉再加入０.１２５-０.２５%胰酶約６-１０滴或１ml(２５ml bottle)消化再加入適量新培養(yǎng)基中和，并分瓶這種方法簡單、省事；效果很好并且不損失細胞！
SKNEP-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuLEC-5a細胞、KM-12細胞、786-O細胞
VMM5細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NuTu 19細胞、HCC9724細胞、EM3細胞
RAG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HFTF細胞、OSRC2細胞、CD18細胞
細胞生長：貼壁
NS20Y epithelioid cells小鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞培養(yǎng)中支原體污染的經(jīng)驗分享：支原體是一類缺乏細胞壁的原核細胞型微生物，大小一般在０.３-０.５um之間，呈高度多形性，有球形、桿形、絲狀、分枝狀等多種形態(tài)。它不同于細胞，也不同于病毒。支原體用普通染色法不易著色，用姬姆薩染色很淺，革蘭染色為陰性。支原體可在雞胚絨毛尿囊膜上或細胞培養(yǎng)中生長，營養(yǎng)要求比細菌高。細胞培養(yǎng)(特別是傳代細胞)被支原體污染是個世界性問題。在細胞培養(yǎng)中支原體感染發(fā)生率達到６３%，支原體感染發(fā)生后能改變細胞的DNA,RNA及蛋白表達，又不能通過可視法對其進行檢測，而且它對細胞的生長率影響較小，不易引起注意。國內(nèi)外研究表明，９５%以上是以下四種支原體：口腔支原體(M.orale)、精酸支原體(M.arginini)、豬鼻支原體(M.hyorhinis)和萊氏無膽甾原體(A.laidlawii)，為牛源性。以上是最常見的污染細胞培養(yǎng)的支原體菌群，但能夠污染細胞的支原體種類是很多的，國外調(diào)查證明，大約有二十多種支原體能污染細胞，有的細胞株可以同時污染兩種以上的支原體。支原體污染的來源包括工作環(huán)境的污染、操作者本身的污染(一些支原體在人體是正常菌群)、培養(yǎng)基的污染、污染支原體的細胞造成的交叉污染、實驗器材帶來的污染和用來制備細胞的原始組織或器官的污染。組織細胞培養(yǎng)工作中，主要從以下幾個方面來預防支原體的污染：控制環(huán)境污染;嚴格實驗操作；細胞培養(yǎng)基和器材要保證無菌；在細胞培養(yǎng)基中加入適量的抗生素。支原體污染細胞后，特別是重要的細胞株，有必要清除支原體，常用方法有抗生素處理、抗血清處理、抗生素加抗血清和補體聯(lián)合處理。支原體最突出的結(jié)構(gòu)特征是沒有細胞壁，一般來講，對作用于細胞壁生物合成的抗生素，如萬古霉素等完全不敏感；對多粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支原體最有抑制活性及常用于支原體感染治療的抗生素是四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類及一些喹諾酮;其他類抗生素如基糖苷類、霉素對支原體有較小抑制作用，所以常不用來作為支原體感染的化學治療劑。
細胞傳代方法：１：２-１：３傳代；每周換液２-３次。
COLO 678細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OVCA-432細胞、NCIH295R細胞、Panc-1-P細胞
LL/2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-436細胞、TCCPAN2細胞、BEP2D細胞
SNU869細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Corneal Endothelial Cells-12細胞、MNNG/HOS細胞、A2780CP70細胞
HD11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM05887細胞、RPMI-6666細胞、SKNDZ細胞
P3/X63-Ag8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MHCC 97細胞、MOVAS細胞、HCC-366細胞
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
NS20Y epithelioid cells小鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞系
細胞生長特性：貼壁
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
細胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程(請嚴格遵照無菌操作)：１)吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加２-３ml ０.２５%胰酶進行消化細胞(注意把握消化時間，通?？刂圃冢?２min)；２)鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時(不建議消化到細胞漂浮)去掉胰酶，加６-８ml完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散；３)取部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；４)注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液(每周２-３次)，待細胞密度達到８０%以后重復１項操作或者凍存；特別注意：(如使用公共實驗室或者初次接觸細胞培養(yǎng)，建議添加雙抗培養(yǎng))１)收到細胞后請盡快更換為含１５%血清的新鮮培養(yǎng)基，如因特殊情況需要繼續(xù)使用原瓶，請在原瓶培養(yǎng)基中額外添加１０%的血清，(原瓶培養(yǎng)基的繼續(xù)使用時間最長不宜超過７２小時)；２)貼壁細胞收到當天切忌立刻消化，請將細胞換液后放置培養(yǎng)箱孵育到第二天再做消化傳代，請優(yōu)先選擇直徑６cm的培養(yǎng)皿進行傳代培養(yǎng)；３)如簽收時出現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂，漏液等情況請及時做好照片記錄并聯(lián)系實驗室。
H526細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PLCPRF5細胞、HMy2.CIR細胞、GTL-16細胞
Ketr-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C42細胞、CCD 966SK細胞、MES-SA/Dx5細胞
BNL CL.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TF1細胞、JURKAT E-6.1細胞、Colo-206F細胞
SUIT 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：K562/ADR細胞、P-3J細胞、SUDHL5細胞
CCD-33Co細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HMC細胞、SKNEP-1細胞、SBC3細胞
HFL 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MIA Paca2細胞、Panc 04.03細胞、HCC-1937細胞
MFE 280細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C57 Mouse Tumor 64細胞、SK ES 01細胞、HCC-1833細胞
BeWo細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-5細胞、TE-3A細胞、UM-UC-3細胞
CAL78細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFE-296細胞、Hs 737.T細胞、OEC19細胞
Hs445細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SK-RC-39細胞、CAL85-1細胞、CEM-C1細胞
NS20Y epithelioid cells小鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞系
22Rv-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SGC7901細胞、HCC-70細胞、Monomac-1細胞
A2780S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE-33細胞、3T3 clone A31細胞、WSU-DLCL2細胞
Mel526細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LC-MS細胞、KCL-22細胞、KRC/Y細胞
HSAS3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PE/CA-PJ-34細胞、Buffalo Rat Liver-3A細胞、HUTU80細胞
Centre Antoine Lacassagne-51細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LWnt-3A細胞、HT 1197.T細胞、SRA01/04細胞
SVGp12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2066細胞、SW-1573細胞、TE354T細胞
SVGp12細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2066細胞、SW-1573細胞、TE354T細胞
AG06814-J細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BAC1.2F5細胞、Pt K2細胞、LWnt-3A細胞
SKRC-52細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VA-ES-BJ細胞、Ly19細胞、Sci-1細胞
H-1963細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CTX TNA2細胞、OCI-AML-4細胞、SK-MEL24細胞
HTSMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LIM-1215細胞、Ej138細胞、HTori-3細胞
HeLa S-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa 229細胞、RFL 6細胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1細胞
U-373 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-132細胞、Huh7.5.1細胞、GS9L細胞
H-522細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEK-293-F細胞、HTR8/SVneo細胞、H-1703細胞
L540細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MES-SA/Dx5細胞、P31 FUJ細胞、RS(4;11)細胞
D341Med細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H2405細胞、U20S細胞、MDA-MB-157細胞
CRFK細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TCC-PAN2細胞、JVM3細胞、NCI.H522細胞
HCA 7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-292細胞、GC1-SPG細胞、AR4-IP細胞
SNB.19細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LLC-MK2細胞、Alpha Mouse Liver 12細胞、KYSE-180細胞
JEG-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-295R細胞、GM02131A細胞、Shadyside Hospital Pittsburgh-77細胞
H748細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MJ細胞、H-2009細胞、CAL 27細胞
SK Mel 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：VK2細胞、H.Ep. No. 2細胞、GH3細胞
NK-92.05細胞系相關(guān)產(chǎn)品：32D-Cl3細胞、H1573細胞、NCI-H146細胞
SKRC-39細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1155細胞、SPDC-CCL141細胞、MOLT-3細胞
HBZY 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HOS-MNNG細胞、HEK-293F細胞、REC1細胞
MDA MB 175 VII細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-5細胞、H-1623細胞、TO 175.T細胞
Hos TE-85細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MS1細胞、H650細胞、ACC3細胞
SW982細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MD Anderson-Metastatic Breast-436細胞、HEI-193細胞、HS 1.Tes細胞
IM95細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CORL279細胞、Nakata-1細胞、Panc_04_03細胞
P31/Fujioka細胞系相關(guān)產(chǎn)品：B958細胞、SK BR 03細胞、D562細胞
HT-1080細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AMJ2C8細胞、Capan-2細胞、U266細胞
EOL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-2126細胞、NCI-SNU-475細胞、CMT.64細胞
NR 8383細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RH-30細胞、SF 539細胞、PLC8024細胞
NRK-52E細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Wistar Institute, Susan Hayflick細胞、Mia PACA 2細胞、PC9細胞
HEL 299細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2085細胞、MM.1S細胞、L-5178-Y細胞
BEAS-2B細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PA-1細胞、143TK-細胞、HCC0078細胞
C4-I細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BpRc1細胞、D-341 Med細胞、Hs 888.Lu細胞
NKT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MASMC細胞、Tca8113細胞、SKMEL5細胞
H-2126細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A253細胞、VCaP細胞、Be Wo細胞
SCLC21H細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OCM-1A細胞、Balb/c3T3細胞、MDA-MB-231 #4175細胞
KMB 17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MCF10A細胞、COV362細胞、SNU216細胞
COLO 205細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H4-II-E細胞、SUM 102PT細胞、COLO_320DM細胞
B16/F0細胞系相關(guān)產(chǎn)品：P3/ag細胞、SW-839細胞、ATN1細胞
746T細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MNNG-HOS (Cl#5)細胞、PC3M-2B4細胞、VM-CUB1細胞
HEK293FT細胞系相關(guān)產(chǎn)品：U-87-MG細胞、251MG細胞、B16F10細胞
MDA-MB-361細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LICR-LON-HN6細胞、FU-MMT-1細胞、Walker256-TC細胞
HPAF/CD18細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MUS-M1細胞、PANC 813細胞、BSC-40細胞
CL34細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HuP-T4細胞、RCCJF細胞、OCI AML3細胞
DC 2.4細胞系相關(guān)產(chǎn)品：526細胞、HFLS-OA細胞、NBL-S細胞
Pfeiffer細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L-Wnt-3A細胞、OCILY7細胞、MFHL-2細胞
MCF-7/ADR細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CAL 62細胞、CRFK細胞、SCC9細胞
NS20Y epithelioid cells小鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞系
PK 15細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDCC-MSB1細胞、HCC95細胞、Panc 3.27細胞
SkChA-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CMT93細胞、NCIH1993細胞、SF 539細胞
OVTOKO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RL-65細胞、RBL細胞、A549/DDP細胞
BNL CL.2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：TF1細胞、PG-4 (S+L-)細胞、NCI-H647細胞
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