"SUM190PT Cell:人乳腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞生長(zhǎng):貼壁 細(xì)胞背景資料:乳腺癌;女性 H157細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCRF-CEM C1細(xì)胞、NCIH1048細(xì)胞、NCIH841細(xì)胞 IPLB-SF 21細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HITT15細(xì)胞、RIN Cl-5F細(xì)胞、CLL-CII細(xì)胞 Hs-688A-T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LNCaP.FGC細(xì)胞、ANA1細(xì)胞、HTR-8/SV-neo細(xì)胞 H-676細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:X63-Ag 8.6.5.3細(xì)胞、Hs742T細(xì)胞、H1238細(xì)胞 細(xì)胞物種來(lái)源:人源或鼠源等其它物種來(lái)源 SUM190PT Cell:人乳腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞消化過(guò)程總結(jié):其實(shí)絕大部分細(xì)胞消化的時(shí)候是只要用胰酶潤(rùn)洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無(wú)法計(jì)算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細(xì)胞(絕大部分1min不到)。對(duì)于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞,連續(xù)這樣傳代,對(duì)細(xì)胞傷害很大。簡(jiǎn)單的程序是PBS潤(rùn)洗吸去,胰酶潤(rùn)洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個(gè)圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層,只要能移動(dòng)了,多半呈沙壯移動(dòng),其實(shí)已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞,這是沒(méi)有必要的。一般能移動(dòng)了,說(shuō)明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細(xì)胞已經(jīng)獨(dú)立分布了(雖然沒(méi)有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個(gè)時(shí)候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細(xì)胞就是完全成單個(gè)細(xì)胞懸液,之后在貼壁的過(guò)程中仍然會(huì)聚集,這個(gè)是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,尤其是腫瘤細(xì)胞的一個(gè)特性,無(wú)論死活的細(xì)胞都是如此,你可以嘗試,準(zhǔn)備100%的單個(gè)細(xì)胞懸液,貼壁后觀察細(xì)胞,仍然是幾個(gè)幾個(gè)細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過(guò)幾個(gè)小時(shí)就拿出來(lái)吹打成單細(xì)胞懸液(不要笑,這個(gè)是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯(cuò)誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個(gè)一個(gè)分開(kāi))。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來(lái),這個(gè)時(shí)候即使是成片的(比如Calu-3細(xì)胞),吹打不超過(guò)20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個(gè)細(xì)胞左右),是正常的,不要試圖再去延長(zhǎng)消化時(shí)間,或者像有的同學(xué)那樣吹打1h,等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細(xì)胞(潤(rùn)洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細(xì)胞,一般不超過(guò)5min,即可見(jiàn)細(xì)胞成片移動(dòng),就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會(huì)有難消化的時(shí)候,比如tsDC細(xì)胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動(dòng)。 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 細(xì)胞凍存的步驟:1)選擇處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞,在凍存前一天換液。將多個(gè)培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞培養(yǎng)液去掉,用0.25% 胰蛋白酶消化。適時(shí)去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復(fù)吹打瓶壁上的細(xì)胞,使其成為均勻分散的細(xì)胞懸液。懸浮生產(chǎn)細(xì)胞則不要消化處理。然后將細(xì)胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘);2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預(yù)冷15分鐘后,逐滴加入已無(wú)菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻,細(xì)胞濃度為5×106~1×107/mL之間。(凍存培養(yǎng)液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具體要看培養(yǎng)的細(xì)胞類(lèi)型來(lái)選擇;3)將分裝上述細(xì)胞懸液于2ml凍存管中,每管0.25ml。凍存管要將蓋子蓋緊,并標(biāo)記好細(xì)胞名稱和凍存日期,同時(shí)作好登記(日期、細(xì)胞種類(lèi)及代次、凍存支數(shù));4)將裝好細(xì)胞的凍存管放到凍存盒中,-80℃冰箱過(guò)夜。;如果有程序降溫器(放在-80℃冰箱過(guò)夜,放入液氮罐);或者可以在4℃,2h;然后轉(zhuǎn)到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;5)細(xì)胞凍存在液氮中可以長(zhǎng)期保存,但為妥善起見(jiàn),凍存半年后,取出一只凍存管細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng),觀察生長(zhǎng)情況,然后再繼續(xù)凍存。 細(xì)胞來(lái)源說(shuō)明:細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)外著名大學(xué)建系 Tokyo Medical and Dental university 8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEK細(xì)胞、HB 611細(xì)胞、FLC-7細(xì)胞 H-1623細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOP-92細(xì)胞、Caki-2細(xì)胞、MFM-223細(xì)胞 ChaGo-K1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-118 MG細(xì)胞、MDA-330細(xì)胞、alpha TC1.6細(xì)胞 Tn5 B1-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CORL51細(xì)胞、UCLA-RO 81細(xì)胞、B-3細(xì)胞 NCI-H2122細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:R1610細(xì)胞、U-CH1細(xì)胞、HFL1細(xì)胞 細(xì)胞生長(zhǎng)特性:貼壁 SUM190PT Cell:人乳腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞傳代培養(yǎng)實(shí)驗(yàn):體外培養(yǎng)的原代細(xì)胞或細(xì)胞株要在體外持續(xù)地培養(yǎng)就必須傳代,以便獲得穩(wěn)定的細(xì)胞株或得到大量的同種細(xì)胞,并維持細(xì)胞種的延續(xù)。培養(yǎng)的細(xì)胞形成單層匯合以后,由于密度過(guò)大生存空間不足而引起營(yíng)養(yǎng)枯竭,將培養(yǎng)的細(xì)胞分散,從容器中取出,以1:2或1:3以上的比率轉(zhuǎn)移到另外的容器中進(jìn)行培養(yǎng),即為傳代培養(yǎng);細(xì)胞“一代”指從細(xì)胞接種到分離再培養(yǎng)的一段期間,與細(xì)胞世代或倍增不同。在一代中,細(xì)胞培增3~6次。細(xì)胞傳代后,一般經(jīng)過(guò)三個(gè)階段:游離期、指數(shù)增生期和停止期。常用細(xì)胞分裂指數(shù)表示細(xì)胞增殖的旺盛程度,即細(xì)胞群的分裂相數(shù)/100個(gè)細(xì)胞。一般細(xì)胞分裂指數(shù)介于0.2%~0.5%,腫瘤細(xì)胞可達(dá)3~5%;細(xì)胞接種2~3天分裂增殖旺盛,是活力時(shí)期,稱指數(shù)增生期(對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期),適宜進(jìn)行各種試驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)步驟:1.將長(zhǎng)成的培養(yǎng)細(xì)胞從二氧化碳培養(yǎng)箱中取出,在超凈工作臺(tái)中倒掉瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)液,加入少許消化液。(以液面蓋住細(xì)胞為宜),靜置5~10分鐘。2.在倒置鏡下觀察被消化的細(xì)胞,如果細(xì)胞變圓,相互之間不再連接成片,這時(shí)應(yīng)立即在超凈臺(tái)中將消化液倒掉,加入3~5ml新鮮培養(yǎng)液,吹打,制成細(xì)胞懸液。3.將細(xì)胞懸液吸出2ml左右,加到另一個(gè)培養(yǎng)瓶中并向每個(gè)瓶中分別加3ml左右培養(yǎng)液,蓋好瓶塞,送回二氧化碳培養(yǎng)箱中,繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng)。一般情況,傳代后的細(xì)胞在2小時(shí)左右就能附著在培養(yǎng)瓶壁上,2~4天就可在瓶?jī)?nèi)形成單層,需要再次進(jìn)行傳代。 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見(jiàn)細(xì)胞說(shuō)明書(shū) L(TK-)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MC57G細(xì)胞、SUNE-1細(xì)胞、RKO-AS-45-1細(xì)胞 LAD 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC-1細(xì)胞、SN4741細(xì)胞、Hs 746T細(xì)胞 3-LL細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CCD 966 SK細(xì)胞、SRS-82細(xì)胞、SW-954細(xì)胞 OVCAR-8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:578T細(xì)胞、Epstein-Barr-1細(xì)胞、BJA-B1細(xì)胞 MC 3T3-E1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUNE1細(xì)胞、WBF344細(xì)胞、OE19細(xì)胞 PTK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCISCC154細(xì)胞、CHP 100細(xì)胞、GLRK 13細(xì)胞 C4-2B細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-II-E-C3細(xì)胞、FRO81-2細(xì)胞、LCD細(xì)胞 SUM190PT Cell:人乳腺癌細(xì)胞系 HBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-446細(xì)胞、RL細(xì)胞、mIMCD3細(xì)胞 HCC2935細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GLC82細(xì)胞、L5178Y TK+/-3.7.2c細(xì)胞、OC-3-VGH細(xì)胞 PanC1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TB1 Lu細(xì)胞、OLN-93細(xì)胞、M-20細(xì)胞 NCI-H-295細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KM932細(xì)胞、LN-229細(xì)胞、NCCIT細(xì)胞 hMSC-BM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:YT細(xì)胞、FAO-1細(xì)胞、NCIH1755細(xì)胞 Mia PACA 2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U118細(xì)胞、Ramos 1細(xì)胞、GM06141B細(xì)胞 NCI-H2195細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Menschliche Und Tierische Zellkulture-3細(xì)胞、HEK 293 EBNA細(xì)胞、VMCUB1細(xì)胞 FHs74Int細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D341細(xì)胞、KP-N-RT-BM細(xì)胞、CAL85-1細(xì)胞 HCC15細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FRO81-2細(xì)胞、YD-38細(xì)胞、MOLT.4細(xì)胞 XWLC-05細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1770細(xì)胞、V79-1細(xì)胞、Hela-mock細(xì)胞 IEC-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:AdHek細(xì)胞、OCI-LY-7細(xì)胞、Hs 839.T細(xì)胞 HCC-1806細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D324 Med細(xì)胞、RBL 2H3細(xì)胞、HCS2/8細(xì)胞 C-32細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EST81細(xì)胞、Cloudman M3細(xì)胞、UK Pan-1細(xì)胞 MDCK-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ku812F細(xì)胞、HS578T細(xì)胞、Swiss/3T3細(xì)胞 hSCC-25細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF 295細(xì)胞、K1735細(xì)胞、HDF-a細(xì)胞 B95.8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-3-H-I細(xì)胞、HT29細(xì)胞、Kit-225-K6細(xì)胞 IGROV-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:G361細(xì)胞、PC-9/GR細(xì)胞、RPE-1細(xì)胞 H3255_DA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCS2/8細(xì)胞、KPL-4細(xì)胞、OCI Ly3細(xì)胞 T-98細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKml2細(xì)胞、MKN-28細(xì)胞、MDCK Type II細(xì)胞 DHBE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW900細(xì)胞、Suzhou Human Glioma-44細(xì)胞、Hep 3B2_1-7細(xì)胞 Henrietta Lacks cells細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IM 9細(xì)胞、OVHM細(xì)胞、MOLT16細(xì)胞 SJSA細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL 12T細(xì)胞、MHCC-LM3細(xì)胞、Th17細(xì)胞 QG-56細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SY5Y細(xì)胞、Tu-686細(xì)胞、SB細(xì)胞 IOSE80細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H69C細(xì)胞、Jurkat E6-1細(xì)胞、MGECs細(xì)胞 MRCV細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H524細(xì)胞、BEP2D細(xì)胞、D-283細(xì)胞 LS123細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HS-68細(xì)胞、A-172 MG細(xì)胞、HSMC細(xì)胞 NR8383細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HAPI細(xì)胞、WM 451-Lu細(xì)胞、HEK293細(xì)胞 BIU-87/Adr細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OVCA 432細(xì)胞、PF-382細(xì)胞、KYSE50細(xì)胞 Gingival carcinoma Neck Metastasis細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIH/3T3細(xì)胞、BV-173細(xì)胞、HEK/293細(xì)胞 OVCAR433細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BEL/FU細(xì)胞、HBZY-1細(xì)胞、Lilly Laboratories Cell-Monkey Kidney 2細(xì)胞 NCIH1688細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H23細(xì)胞、AGS細(xì)胞、786-0WT細(xì)胞 T2(174 x CEM.T2)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PANC.1細(xì)胞、H295R細(xì)胞、CNE2Z細(xì)胞 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MONO-MAC 6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2135細(xì)胞、P30/OHK細(xì)胞、EOC 20細(xì)胞 HAPI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARO細(xì)胞、H1944細(xì)胞、NCIH2227細(xì)胞 C32r細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB19細(xì)胞、HEI193細(xì)胞、SF763細(xì)胞 PC2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nb2細(xì)胞、HOP92細(xì)胞、HLEB3細(xì)胞 HCC1588細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-211細(xì)胞、MDA-kb2細(xì)胞、H-3255細(xì)胞 OPM-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NK-92MI細(xì)胞、OVCAR-420細(xì)胞、MSC細(xì)胞 rUCMSCs細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK.EBNA細(xì)胞、SB細(xì)胞、ME16C細(xì)胞 OCI-AML3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0078細(xì)胞、UPCI:SCC90細(xì)胞、P3X63Ag8.653細(xì)胞 Melanoma 14細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T. T細(xì)胞、NSC-34細(xì)胞、OVCAR5細(xì)胞 HCPEpiC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PT-67細(xì)胞、U-343-MG細(xì)胞、Kit-225細(xì)胞 "
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