"HMEL Cell:永生上皮細胞系 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞背景資料:上皮細胞;永生化 GTL16細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1184細胞、H-1341細胞、MBVP細胞 CZ-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ST細胞、EFO-27細胞、HMC細胞 MDAMB157細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MRC-V細胞、H-596細胞、no-11細胞 HCS-2/8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:293 c18細胞、PVEC細胞、GM03570細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 HMEL Cell:永生上皮細胞系 如何把細胞養(yǎng)的形態(tài)更好更漂亮。1.不同的細胞,喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個不僅僅是說培養(yǎng)基的不同,還有就是細胞生長的空間密度問題。有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內(nèi)皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應該留很少量的細胞,這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結(jié)果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。2.對于有些人總是會遇到養(yǎng)的細胞形態(tài)怎么都不好的問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞,如果細胞形態(tài)不好,(或者細胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進行預吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細胞我們只吹打,不消化的);其次,把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內(nèi),培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng),按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經(jīng)有部分細胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。呵呵。如果一次效果還不理想,可重復多次。直到找到細胞完美形態(tài)。其中要注意,結(jié)合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。3.關(guān)于培養(yǎng)瓶內(nèi)加入培養(yǎng)基的量的問題。這個是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些細胞反而是培養(yǎng)基少一點相反細胞形態(tài)會長得比較好。(可能也是競爭很大,有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。)對于生長速度快的細胞,易生長的細胞加少一點培養(yǎng)基細胞形態(tài)會更好。但是要注意換液掌握。4.關(guān)于選擇培養(yǎng)瓶的問題。個人發(fā)現(xiàn)生長速度快的細胞在玻璃瓶內(nèi)生長的狀態(tài)會比一次性相對好一些。而對于同一種細胞,在其生長旺盛快速的時期在玻璃瓶內(nèi)的生長狀態(tài)也比內(nèi)好。這可能是因為比玻璃瓶更容易貼壁。生長速度快的細胞在這種相對“更安逸”的環(huán)境里反而長得狀態(tài)不如玻璃瓶好。所以對于生長速度慢的細胞如果想要更漂亮的細胞狀態(tài),比玻璃瓶會好,對于生長速度慢的細胞,玻璃瓶則會更好。同樣,對于同一種細胞,在其生長速度慢的時候,會好一點,比如剛剛復蘇的時候,或者原代培養(yǎng)的時候。而在其生長旺盛的時候,玻璃瓶則相對會好一點。 細胞產(chǎn)品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因?研究人員在細胞培養(yǎng)時出現(xiàn)存活率不佳,原因比較復雜,常見原因可歸納為:培養(yǎng)基使用錯誤或培養(yǎng)基品質(zhì)不佳;血清使用錯誤或血清的品質(zhì)不佳;解凍過程錯誤;冷凍細胞解凍后,加以洗滌細胞和離心;懸渾細胞誤認為死細胞;培養(yǎng)溫度使用錯誤;細胞置于-80℃太久等。建議嚴格參照ATCC的標準操作規(guī)程進行細胞復蘇、凍存等工作。欲將一般動物細胞離心下來,其離心速率應為多少轉(zhuǎn)速?欲回收動物細胞,其離心速率一般為300×g(約1O(jiān)OOrpm),5-10分鐘,轉(zhuǎn)速過高或離心時間過長都將造成細胞死亡。合適的離心轉(zhuǎn)速是根據(jù)相對離心力決定。RCF=1.119×105×r×(rpm)2,其中r為離心機轉(zhuǎn)軸中心與離心套管底部內(nèi)壁的距離;rpm為離心機每分鐘的轉(zhuǎn)數(shù);RCF(relative centrifugal force)為相對離心力,以重力加速度g(980.66cm/s2)的倍數(shù)來表示單位。 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 NCI-H1563細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HO-8910PM細胞、U87MG細胞、FHCRC-11細胞 NCI-H2198細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ca761細胞、OVCAR5細胞、DSL6A/C1細胞 NK92MI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 450細胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細胞、Lu99A細胞 Hs578Bst細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RCC10 RGB細胞、A427細胞、EFM192C細胞 8505C細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BGC823細胞、NCI-H1930細胞、Danio rerio Gill細胞 細胞生長特性:貼壁 HMEL Cell:永生上皮細胞系 細胞株(系)的使用,為醫(yī)學研究和測試工作帶來了極大的方便。但細胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細胞的生長與形態(tài)等會有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細胞失去原有的遺傳特性,有時還會由于細胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實際工作中常需凍存一定數(shù)量的細胞,以備替換使用。細胞冷凍與復蘇是細胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。目前,細胞凍存最常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護劑的緩慢冷凍法凍存細胞。細胞在不加任何保護劑的情況下直接冷凍,細胞內(nèi)外的水分會很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應。如細胞脫水使局部電解質(zhì)濃度增高,pH值改變,部分蛋白質(zhì)由于上述原因而變性,引起細胞內(nèi)部空間結(jié)構(gòu)紊亂,溶酶體膜由此遭到損傷而釋放出溶酶體酶,使細胞內(nèi)結(jié)構(gòu)成分造成破壞,線粒體腫脹,功能丟失,并造成能量代謝障礙。胞膜上的類脂蛋白復合體也易破壞引起細胞膜通透性的改變,使細胞內(nèi)容物丟失。如果細胞內(nèi)冰晶形成較多,隨冷凍溫度的降低,冰晶體積膨脹造成細胞核DNA空間構(gòu)型發(fā)生不可逆的損傷,而致細胞死亡。因此,細胞冷凍技術(shù)的關(guān)鍵是盡可能地減少細胞內(nèi)水分,減少細胞內(nèi)冰晶的形成。采用甘油或二甲基亞砜作保護劑,這兩種物質(zhì)分子量小,溶解度大,易穿透細胞,可以使冰點下降,提高細胞膜對水的通透性,且對細胞無明顯毒性。慢速冷凍方法又可使細胞內(nèi)的水分滲出細胞外,減少胞內(nèi)形成冰結(jié)晶的機會,從而減少冰晶對細胞的損傷。 細胞形態(tài)特性:詳見細胞說明書 JB6 clone 30, subclone 7b細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB6 Cl 30細胞、RS4;11細胞、RC92A細胞 JB 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H1417細胞、16-HBE細胞、FC33細胞 MCF10A細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H647細胞、GP5d細胞、CV-1.K細胞 JB6 Cl 30細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-435細胞、HEY-A8細胞、NCIH1184細胞 Malme-3 M細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KNS-62細胞、NS1-Ag 4/1細胞、SRS-82細胞 Transformed Human Liver Epithelial-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NRCC細胞、TE-1細胞、S.B.細胞 293T/17細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU-DHL-16細胞、IPEC1細胞、H1693細胞 HMEL Cell:永生上皮細胞系 H-1299細胞系相關(guān)產(chǎn)品:T98G細胞、P116細胞、MFE 296細胞 PLC/PRF/5細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos.G6.C10細胞、HEY A8細胞、OS-RC-2細胞 CTX TNA2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:JB-6 Cl 30細胞、USMC細胞、C-32細胞 H-295細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RDES-1細胞、LOU-NH91細胞、T-cell Acute Lymphoblastic Leukemia-1細胞 JC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI H157細胞、THEECs細胞、MDCKII-WT細胞 HANK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:BJAB-1細胞、HCT/FU細胞、SUP-B1細胞 SUIT-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:K1735細胞、GalK 1細胞、HLCL9B10細胞 MIN-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SCC090細胞、DCS細胞、Caov-4細胞 Me-Wo細胞系相關(guān)產(chǎn)品:CEM細胞、HO1-N-1細胞、SW837細胞 HONE-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:PG-4 S+L-細胞、GM05372E細胞、H1522細胞 HBL-100細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS-I/1細胞、SKMel-28細胞、Hs27細胞 NCI-322細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2171細胞、H226細胞、NCI-H460細胞 FOX-NY細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A-875細胞、C8161細胞、MLO-Y4細胞 Suzhou Human Glioma-44細胞系相關(guān)產(chǎn)品:52PE細胞、H-157細胞、B16 melanoma F10細胞 MCF7-CTRL細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SK HEP-1細胞、RS411細胞、Caco-2細胞 SGC996細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEI-193細胞、HDF-a細胞、SNU-407細胞 OVCA8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GM03320細胞、RCC-10細胞、hA549細胞 CD18/HPAF細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NB-9細胞、RL95-2細胞、Chinese Hamster Lung細胞 NOMO-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:786-O細胞、CII細胞、HEK293T/17細胞 FRO細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H441-4細胞、hUC-MSC細胞、H716細胞 MASMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-468-RED細胞、K562/ADR細胞、RPMI8226細胞 CCD 966 SK細胞系相關(guān)產(chǎn)品:A2780 CP70細胞、149PT細胞、BE2-C細胞 SUM 149PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:3-LL細胞、SHEE細胞、PE CA PJ34細胞 DoTc2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 688(A).T細胞、FU-OV-1細胞、MV4:11細胞 J82細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Y1細胞、SW-480細胞、CAKI 1細胞 JEG3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:L428細胞、CCRF-CEM C1細胞、HuO9細胞 HIT.T15細胞系相關(guān)產(chǎn)品:M3 Clone M-3細胞、H7721細胞、Capan 1細胞 SK-MEL 28細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NS1-Ag4細胞、OSC19細胞、IHC-ST1細胞 HCE-T細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Panc-8_13細胞、CBRH-7919細胞、HTh-74細胞 373 MG細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OEC19細胞、MAVER1細胞、NCIH295R細胞 RS(4;11)細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Stanford University Pediatric T-cell line 1細胞、MUTZ1細胞、THLE2細胞 SEG-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-1522細胞、CNLMG-B5537SKIN細胞、AR4-2J細胞 DF1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:MD Anderson-Metastatic Breast-468細胞、H838細胞、MC3T3-E1 Subclone 14細胞 CAL85-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:COLO-684細胞、GM03569D細胞、SGC-7901/DDP細胞 TB-1 Lu細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Jurkat細胞、b.End3細胞、D341MD細胞 EU-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE-11細胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細胞、NCI-H1404細胞 RS411細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NT2-D1細胞、LAN-5細胞、HEK293-FT細胞 CAKI 2細胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI-6666細胞、BNL 1MEA.7R.1細胞、CHL/IU細胞 C3H10T1/2CL8細胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKNFI細胞、TE-15細胞、H-2073細胞 RenCa細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NIE 115細胞、SVOG細胞、MT-2細胞 686LN-M4e細胞系相關(guān)產(chǎn)品:HSC-2細胞、Dx5細胞、786-O RCC細胞 NCI-H520細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs888T細胞、DC2.4細胞、HIEC-6細胞 OE-19細胞系相關(guān)產(chǎn)品:Nthy-ori 3.1細胞、CTLA4Ig-24細胞、JM-1細胞 HMEL Cell:永生上皮細胞系 8226/S細胞系相關(guān)產(chǎn)品:LCD細胞、HCC-4006細胞、293細胞 Caco-2/BBe細胞系相關(guān)產(chǎn)品:TB-1 Lu細胞、NB4細胞、TE 671細胞 SUDHL1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:GC-1 spg細胞、ZR7530細胞、Huh 7.5.1細胞 SK Col 1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:KOSC-2細胞、NCIH2228細胞、NCI H929細胞 Kasumi-6細胞系相關(guān)產(chǎn)品:WEHI-3B細胞、HS578細胞、OVCA 420細胞 SUM 102PT細胞系相關(guān)產(chǎn)品:H660細胞、BC-009細胞、SK-LU-1細胞 MDCC-MSB-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C-33-A細胞、RDES-1細胞、NCI-H1623細胞 IPLB-Sf21細胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV-2008細胞、HNTEC細胞、KYSE-510細胞 Hs_578t細胞系相關(guān)產(chǎn)品:NOZC-1細胞、MILE SVEN 1細胞、NCIH1876細胞 HAPI細胞系相關(guān)產(chǎn)品:ARO細胞、H1944細胞、NCIH2227細胞 Fortner's melanotic melanoma #3細胞系相關(guān)產(chǎn)品:C4I細胞、AR4-IP細胞、NCI-H2347細胞 FHs74Int細胞系相關(guān)產(chǎn)品:D341細胞、SK-Col-1細胞、RPMI-8226S細胞 "
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