"N1E-115 Cell:小鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞生長:貼壁 細(xì)胞背景資料:神經(jīng)母細(xì)胞瘤;雄性;A/J EBC-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCMEC細(xì)胞、Institute for Medical Research-32細(xì)胞、NCI-H650細(xì)胞 C-Lu-65細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CMT-167細(xì)胞、AU565細(xì)胞、RH7777細(xì)胞 L2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:D562細(xì)胞、TALL-104細(xì)胞、NPC-TW 039細(xì)胞 RC-4B/C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW-948細(xì)胞、BA/F3細(xì)胞、SK Mel28細(xì)胞 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 N1E-115 Cell:小鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系 細(xì)胞凍存基本方法:1.細(xì)胞:選對(duì)數(shù)生長期細(xì)胞,收集細(xì)胞24小時(shí)前換液一次。2.計(jì)數(shù):按常規(guī)方法把細(xì)胞制成細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù),令細(xì)胞密度達(dá)5×10(6)/ml,離心去上清,吸入離心管中。3.凍存液:先用培養(yǎng)液9分+DMSO 1分(或甘油)配成10%的DMSO凍存液,按上法一滴滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細(xì)胞重懸。4.分裝:分裝入無菌安剖中,每安剖加1.5毫升細(xì)胞懸液。5.封口:用塑料安剖時(shí)擰緊瓶口即可;如用火焰封閉安剖口后,仔細(xì)檢查,定要封嚴(yán),必要時(shí)可浸入藍(lán)色液中觀察,為安全起見,把安剖縫入紗布小袋中,以防液氮浸入后,融解時(shí)因受熱發(fā)生爆炸傷人;紗袋一端系以線繩,末端扎有小牌,注明:細(xì)胞名稱,凍存日期,以便日后查找。細(xì)胞株(系)的使用,為醫(yī)學(xué)研究和測(cè)試工作帶來了極大的方便。但細(xì)胞的傳代是有限制的,長期連續(xù)傳代的細(xì)胞,不僅消耗大量的人力和物力,而且細(xì)胞的生長與形態(tài)等會(huì)有一定退變或轉(zhuǎn)化,因而細(xì)胞失去原有的遺傳特性,有時(shí)還會(huì)由于細(xì)胞污染而造成傳代中斷,種子丟失。因此,在實(shí)際工作中常需凍存一定數(shù)量的細(xì)胞,以備替換使用。細(xì)胞冷凍與復(fù)蘇是細(xì)胞培養(yǎng) 室的常規(guī)工作和通用技術(shù)。 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代方法:1:2-1:3傳代;每周換液2-3次。 培養(yǎng)細(xì)胞真的不難,最關(guān)鍵幾點(diǎn):1)所有的東西使用,如果你用的血清、培養(yǎng)皿、培養(yǎng)基、胰酶什么的都是進(jìn)口的,真的很難相信你會(huì)把細(xì)胞養(yǎng)壞;2)動(dòng)作要快,胰酶消化,換液什么,細(xì)胞暴露在空氣中的時(shí)間越少越好。另外,要掌握好胰酶消化時(shí)間,所謂的細(xì)胞狀態(tài)差,很多時(shí)候是傳代的原因;3)有時(shí)間的話,需要細(xì)胞計(jì)數(shù),傳相應(yīng)數(shù)目的細(xì)胞到培養(yǎng)皿中,可以大致清楚細(xì)胞的生長曲線,不會(huì)臨時(shí)要處理,手足無措;4)要做什么心里要非常清楚,合理安排時(shí)間,傳代細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)穿插進(jìn)行,可以節(jié)省很多時(shí)間,也不會(huì)耽誤別人的實(shí)驗(yàn);5)個(gè)人的實(shí)驗(yàn)器具自己收一套,不要和別人混用,最近換了什么新的東西稍微記一下,試劑一旦懷疑污染,馬上丟;6)傳代細(xì)胞不能進(jìn)去太多人,避免相互干擾。每天對(duì)待細(xì)胞比孝敬爹媽還用心,那真是捧在手里怕碎了,含在嘴里怕化了,看在眼里怕丟了,培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)有哪些經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)可以分享呢?1)嚴(yán)格無菌操作,多噴噴酒精,要是對(duì)滅菌的東西不放心,自己包自己送自己烘干;2)不要和別人共用試劑耗材,自己準(zhǔn)備一套;3)有可能的話在拿到新細(xì)胞的時(shí)候做好支原體衣原體檢測(cè);4)水浴鍋很臟,生化培養(yǎng)箱要是得手動(dòng)加濕的話盤里的水也會(huì)很臟,勤換(滅菌水加進(jìn)去);5)晚上離開的時(shí)候給傳代細(xì)胞照紫外,超凈臺(tái)是用完就開;6)是同一時(shí)間就你一個(gè)人在用傳代細(xì)胞在養(yǎng)細(xì)胞。 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 SK-N-BE(2)-C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HOS (TE85)細(xì)胞、HCC 2185細(xì)胞、PL9細(xì)胞 EC-9706細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LTEP-s細(xì)胞、BaF3細(xì)胞、G292細(xì)胞 OP9細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNU354細(xì)胞、P3X63 Ag8細(xì)胞、HCC-1187細(xì)胞 SN12C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H727細(xì)胞、D283-MED細(xì)胞、TJ905細(xì)胞 Psi-2 DAP細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HFT 8810細(xì)胞、SJRH 30細(xì)胞、HCC1954 BL細(xì)胞 細(xì)胞生長特性:貼壁 N1E-115 Cell:小鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系 細(xì)胞復(fù)蘇相關(guān)注意事項(xiàng):1.取細(xì)胞的過程中注意帶好防凍手套,護(hù)目鏡。此項(xiàng)尤為重要,細(xì)胞凍存管可能漏入液氮,解凍時(shí)凍存管中的氣溫急劇上升,可導(dǎo)致爆炸。2.凍存液的問題:凍存液的配置已是常識(shí),在這里不作詳述,但二甲基亞砜(DMSO )對(duì)細(xì)胞不是完全無毒副作用,在常溫下,二甲基亞砜對(duì)細(xì)胞的毒副作較大,因此,必須在1-2min內(nèi)使凍存液完全融化。如果復(fù)蘇溫度太慢,會(huì)造成細(xì)胞的損傷,二甲基亞砜(DMSO)選擇進(jìn)口產(chǎn)品。3.離心前須加入少量培養(yǎng)液。細(xì)胞解凍后二甲基亞砜濃度較高,注意加入少量培養(yǎng)液可稀釋其濃度,以減少對(duì)細(xì)胞的損傷。4.離心問題:目前主要有兩種見解。一種是解凍后的細(xì)胞懸液直接吹打均勻后分裝到培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng),第二天換液。因?yàn)殡x心的目的是兩個(gè),去除DMSO,去除死細(xì)胞,這個(gè)是標(biāo)準(zhǔn)流程,但對(duì)一般人來說,把握不好離心轉(zhuǎn)速和時(shí)間,轉(zhuǎn)的不夠活細(xì)胞沉底的少,細(xì)胞就全被扔掉了,轉(zhuǎn)過了活細(xì)胞會(huì)受壓過大,死亡。此外在操作過程中容易污染,所以不推薦。另一種說法為細(xì)胞懸液中含有二甲基亞砜(DMSO),DMSO對(duì)細(xì)胞有一定的毒副作用,所以須將離心后的液體前倒凈,且一定倒干凈。我在試驗(yàn)中按照常規(guī)的離心分裝的方法進(jìn)行復(fù)蘇,結(jié)果無異常。5.細(xì)胞貼壁少的問題:教科書中說明凍存細(xì)胞解凍時(shí)1ml細(xì)胞液要加10ml-15ml培養(yǎng)液,而在我的試驗(yàn)中的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為培養(yǎng)基越少細(xì)胞越容易貼附。6.復(fù)蘇細(xì)胞分裝的問題:試驗(yàn)中我的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)為復(fù)蘇1管細(xì)胞一般可分裝到1-2只培養(yǎng)瓶中,分裝過多,細(xì)胞濃度過低,不利于細(xì)胞的貼壁。7.加培養(yǎng)基的量放入問題:這個(gè)量的多少的把握主要涉及到的問題DMSO的濃度,從如果你加培養(yǎng)基的太少,那么DMSO的濃度就會(huì)比較大,就會(huì)影響細(xì)胞生長,從以前的資料來看,DMSO的濃度在小于0.5%的時(shí)候?qū)σ话慵?xì)胞沒有什么影響,還有一個(gè)說法是1%。所以如果你的凍存液的濃度是10%DMSO的話那么加10ml以上的培養(yǎng)基就恰好稀釋到了無害濃度。 細(xì)胞形態(tài)特性:詳見細(xì)胞說明書 8505C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BGC823細(xì)胞、NCI-H1930細(xì)胞、Danio rerio Gill細(xì)胞 Hs 343.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TN5B14細(xì)胞、HKC細(xì)胞、V79-1細(xì)胞 Panc 04.03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mono-Mac-1細(xì)胞、T2(174 x CEM.T2)細(xì)胞、L428細(xì)胞 L-363細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2342細(xì)胞、MCF-7細(xì)胞、SK ES 01細(xì)胞 HEK-293FT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:B16F10細(xì)胞、Jiyoye(P-2003)細(xì)胞、High 5細(xì)胞 LICCF細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Emory University-3細(xì)胞、DB細(xì)胞、EJ1細(xì)胞 H-2052細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM149-PT細(xì)胞、SCL II細(xì)胞、Hs 863.T細(xì)胞 N1E-115 Cell:小鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系 C127細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M 1細(xì)胞、PTK 1細(xì)胞、TE6細(xì)胞 J-82細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293EBNA細(xì)胞、MDA-175細(xì)胞、NCI-H2172細(xì)胞 BL2141細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CAL148細(xì)胞、MOVAS-1細(xì)胞、PL 45細(xì)胞 H2198細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Malme3M細(xì)胞、NK10a細(xì)胞、TB-1 Lu細(xì)胞 1301細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:L cell line細(xì)胞、CoCL2細(xì)胞、PSN-1細(xì)胞 CemT4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1937細(xì)胞、X63-Ag8細(xì)胞、GM2219C細(xì)胞 CCD-19Lu細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HTh74細(xì)胞、Pt K1 (NBL-3)細(xì)胞、H358細(xì)胞 JIII細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-MB-468細(xì)胞、LS1034細(xì)胞、3D4/21細(xì)胞 X63.Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH211細(xì)胞、GC9811-P細(xì)胞、NCI-BL1339細(xì)胞 X63.Ag8.653細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH211細(xì)胞、GC9811-P細(xì)胞、NCI-BL1339細(xì)胞 H522細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HUASMC細(xì)胞、JHH-2細(xì)胞、Daudi細(xì)胞 LP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW480細(xì)胞、HCC 94細(xì)胞、AML12細(xì)胞 MDA MB 453細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:M-G63細(xì)胞、T47D:A細(xì)胞、C32-mel細(xì)胞 C41細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK293-A細(xì)胞、C2A細(xì)胞、EMT6細(xì)胞 PTK1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:UPCISCC154細(xì)胞、CHP 100細(xì)胞、GLRK 13細(xì)胞 H-661細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PCI-4M細(xì)胞、MKN7細(xì)胞、HCC1359細(xì)胞 NBL-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LC-1 sq細(xì)胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized細(xì)胞、KU19-19細(xì)胞 SW1222細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HRA 19細(xì)胞、Normal Rat Kidney-49F細(xì)胞、HCC941122細(xì)胞 QGP1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H220細(xì)胞、MT-2J細(xì)胞、LS-180細(xì)胞 1.1B4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LN-18細(xì)胞、GM637A細(xì)胞、Human Kidney-2細(xì)胞 NALM-6-M1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-15細(xì)胞、KRCY細(xì)胞、LAD 2細(xì)胞 Hs600T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNK1細(xì)胞、Hs832T細(xì)胞、U20-S細(xì)胞 U373-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Melanoma Cell Bowes細(xì)胞、HCC1954細(xì)胞、Me-Wo細(xì)胞 UCLA NPA871細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MADB106細(xì)胞、A2780 CP70細(xì)胞、MDAMB361細(xì)胞 FAT細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Dunn LM8細(xì)胞、IPLB-SF 21AE細(xì)胞、H1650_CO細(xì)胞 33604細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KMS-18細(xì)胞、H-711細(xì)胞、U118細(xì)胞 A-253細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI2650細(xì)胞、GA-10-Clone-4細(xì)胞、SW756細(xì)胞 WSU-HN13細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RPMI 8402細(xì)胞、H2073細(xì)胞、DAN-G細(xì)胞 NCI-H2087細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW962細(xì)胞、2B4細(xì)胞、KYSE30細(xì)胞 SKRC20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:C32 mel細(xì)胞、SV40-HCEC細(xì)胞、CCD-112CoN細(xì)胞 V-79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-SNU-5細(xì)胞、H9細(xì)胞、SKM1細(xì)胞 BA/F3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DSL-6A-C1細(xì)胞、HEP-3B2細(xì)胞、MDA-MB468細(xì)胞 Factor Dependent Cell-Paterson 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa S-3細(xì)胞、RPMI-8402細(xì)胞、G-Olig2細(xì)胞 UM2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Pt K1 (NBL-3)細(xì)胞、MDA-MB-435S細(xì)胞、Molm 14細(xì)胞 IGROV1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI.H226細(xì)胞、GH3細(xì)胞、SW982細(xì)胞 RDES細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC-4B/C細(xì)胞、CD 18細(xì)胞、BT 549細(xì)胞 GB-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DLD-1細(xì)胞、RPVSMC細(xì)胞、MOLT3細(xì)胞 LA4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:293/EBNA-1細(xì)胞、NS1細(xì)胞、T HEECs細(xì)胞 H-2122細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SF126細(xì)胞、MDA231-LM2-4175細(xì)胞、TF1細(xì)胞 RKO-AS45-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC0827細(xì)胞、MDA-MB-468-RED細(xì)胞、OCI Ly19細(xì)胞 U138-MG細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HN-6細(xì)胞、ST-2細(xì)胞、BIU87細(xì)胞 MM.1S細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC-1419細(xì)胞、C-4I細(xì)胞、F36P細(xì)胞 NCIH1385細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:P 815細(xì)胞、NCI H345細(xì)胞、Kobe university Oral Squamous Cell culture-2細(xì)胞 N1E-115 Cell:小鼠神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞系 201T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Fetal Bovine Heart Endothelial細(xì)胞、KALS-1細(xì)胞、MDBK (NBL-1)細(xì)胞 FL 62891細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HL60細(xì)胞、NCI-SNU-216細(xì)胞、KPL-1細(xì)胞 KMST-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:DF-1細(xì)胞、TK+/- (clone 3.7.2C)細(xì)胞、NCIH441細(xì)胞 ME1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE9細(xì)胞、Tb 1 Lu (NBL-12)細(xì)胞、NCI-H2228細(xì)胞 HT144細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:PCI-4.2細(xì)胞、COLO829細(xì)胞、HEK 293-H細(xì)胞 GM02131細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCTC-3960細(xì)胞、Rat Fetal Lung-6細(xì)胞、LICR-HN6細(xì)胞 SUM-52-PE細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA MB 175 VII細(xì)胞、HN13細(xì)胞、HuH1細(xì)胞 IAR-20細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:LM1細(xì)胞、VA-ES-BJ細(xì)胞、BE(2)-M17細(xì)胞 HeLa S-3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa 229細(xì)胞、RFL 6細(xì)胞、Factor Dependent Cell-Paterson 1細(xì)胞 H4-II-EC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SUM-190細(xì)胞、SKRC-20細(xì)胞、T241細(xì)胞 MGH-U3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RC-K8細(xì)胞、AR4-2J細(xì)胞、PANC1005細(xì)胞 H2291細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RGC-6細(xì)胞、UMNSAH/DF-1細(xì)胞、P3 88 D1細(xì)胞 "
上海賓穗生物科技有限公司
聯(lián)系商家時(shí)請(qǐng)?zhí)峒癱hemicalbook,有助于交易順利完成!
上海賓穗生物