"HPAF-II Cell:人胰腺癌細胞系
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
細胞生長：貼壁
細胞背景資料：詳見相關(guān)文獻介紹
BE(2)-M17細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-774細胞、A2780細胞、beta-TC6細胞
SNU638細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NIH:OVCAR3細胞、SP2-0-Ag14細胞、AD293細胞
UCLA NPA871細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MADB106細胞、A2780 CP70細胞、MDAMB361細胞
SW-620細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COR-L51細胞、CHO/dhFr-細胞、SW1088細胞
細胞物種來源：人源或鼠源等其它物種來源
HPAF-II Cell:人胰腺癌細胞系
細胞傳代時消化的問題：可以這樣說，對于需要消化傳代的細胞，每一次的消化都是對這個細胞存活與否，狀態(tài)好與不好最至關(guān)重要的考驗。很多同學都遇到過這個問題，自己養(yǎng)的細胞開始的幾代長的還挺好的，可是穿過幾代之后就發(fā)現(xiàn)自己的細胞，狀態(tài)越來越差勁了。對于這個問題，可以非?？隙ǖ卣f，你的消化環(huán)節(jié)出問題了。你每一次的消化都讓細胞受到較大損傷了。所以，越長越差。在消化的過程中，你加入胰酶后，所有細胞都在被胰酶消化著，但是我們忽視了一個問題就是，細胞的生長狀態(tài)是不一樣的，每一個細胞的貼壁情況也是不一樣的，有的貼壁牢固，有的貼壁沒有那么牢固的，所以，讓所有的細胞消化同樣的時間對細胞是不公平的，他們受到了差別待遇當然會有脾氣啊。我后來對消化的方法進行了改良。爭取做到因材施教呵呵。我稱之為“四步消化法”。（以難消化細胞為例）；具體操作：１)首先不加胰酶，倒掉舊培養(yǎng)基加入少量新培養(yǎng)基洗１-２遍，（這是前奏，即為步，目的是將漂浮著的死細胞之類盡量洗掉。２)然后再加入少量新培養(yǎng)基直接吹打一遍，這一遍是把貼壁不牢固的細胞吹打下來。再用培養(yǎng)基洗一遍，兩次所得懸液混合傳入新瓶。即為第二步（你可以將這些傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面胰酶消化過的細胞對比觀察看誰長的更好一點就知道該細胞對胰酶的敏感度了。）３)吸干凈瓶內(nèi)剩余液體，加入０.３ml左右的胰酶潤洗一遍，吸掉棄之，再加入１ml左右的胰酶消化。消化的同時置于顯微鏡下觀察，待細胞與細胞之間間隙明顯的時候立即吸掉胰酶與干凈子彈頭里備用，加入新培養(yǎng)基開始吹打，吹打２-３遍后吸取懸液于試管或新瓶暫存。用２ml左右新培養(yǎng)基洗一遍與前面的混合。（你也可以傳入新瓶培養(yǎng)，以與后面及前面的做對比。）這是第三步。４)然后把前面剛吸出來的胰酶重新加進去瓶里繼續(xù)消化剩余的貼壁牢固的細胞。當然你也可以用新的胰酶，如果你們那比較富裕的話，呵呵。繼續(xù)鏡下觀察，待剩余細胞間隙明顯，細胞獨立開來的時候，吸掉胰酶，加入新培養(yǎng)基吹打。懸液傳入新瓶培養(yǎng)（根據(jù)實際情況你自己把握）。這是第四步。其實還可以有第五步，對于特別難消化的細胞和對胰酶特別敏感的細胞的話，你可以繼續(xù)加第五步甚至第六步。為了細胞更好的狀態(tài)，更漂亮的樣子，沒辦法，你必須分多批多次消化，這樣才能限度地將胰酶對細胞的損傷降到最低，保證細胞的狀態(tài)能夠。當然了，如果細胞是屬于那種很容易消化的細胞，像RAW２６４.７，僅僅第二步就搞定了。就沒必要第三步第四步了。這個是需要你在實驗中能夠自己用心去體會的。建議你接受一個新細胞時把各步消化的細胞分別培養(yǎng)起來做比較，去摸索好細胞對胰酶的要求。便于你后續(xù)實驗的開展。將細胞消化分成這幾步，除了是為了避免胰酶對細胞的損傷之外，還有一個更重要的作用就是，可以程度地把細胞吹打成單個單個的狀態(tài)，不成片不連體。
細胞產(chǎn)品包裝：復蘇形式：T２５培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式：１ml凍存管(兩支)
細胞傳代方法：１：２傳代
如何進行細胞復蘇：１)從液氮容器中取出凍存管，直接浸入３７℃溫水中，并不時搖動令其盡快融化；２)從３７℃水浴中取出凍存管，打開蓋子，用吸管吸出細胞懸液，加到離心管并滴加１０倍以上培養(yǎng)液，混勻；３)離心，１０００rpm，５min；４)棄去上清液，加入含１０%小牛血清培養(yǎng)液重懸細胞，計數(shù)，調(diào)整細胞密度，接種培養(yǎng)瓶，３７℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)；５)次日更換一次培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)?！緶剀疤嵝选浚?從增殖期到形成致密的單層細胞以前的培養(yǎng)細胞都可以用于凍存，但為對數(shù)生長期細胞。在凍存前一天換一次培養(yǎng)液；２)將凍存管放入液氮容器或從中取出時，要做好防護工作(戴棉手套)，以免凍傷；３)凍存和復蘇用新配制的培養(yǎng)液。細胞復蘇的時候，有些初次實驗員將凍存管從液氮中取出后，放在室溫下，經(jīng)常發(fā)生凍存管爆炸，該怎么避免出現(xiàn)這種情況嗎？其中在擰緊凍存管的時候是否有哪些細節(jié)要注意的？一般常用的方法是取出凍存管后在超凈工作臺中用酒精棉球擦試管口，再稍擰松蓋子，再放３７度水浴鍋中搖溶，在將細胞轉(zhuǎn)移到裝有３７度預熱過的培養(yǎng)基的試管中，迅速離心，再用培養(yǎng)基洗一遍。
細胞來源說明：細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系
SKMES-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：PCI-04B細胞、MDBK細胞、GES1細胞
MHCC97-L細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKCO1細胞、SACC83細胞、NCI-H2126細胞
H82sclc細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Y 1細胞、SCC-4細胞、Pro-5WgaRI3C細胞
P30-OHKUBO細胞系相關(guān)產(chǎn)品：BALB/3T3 (clone A31)細胞、SW13細胞、Renal Carcinoma細胞
OCILY10細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HLF-a細胞、RSMC細胞、C3H10T1/2 clone8細胞
細胞生長特性：貼壁生長
HPAF-II Cell:人胰腺癌細胞系
細胞培養(yǎng)無菌操作步驟和注意事項：１.打開無菌工作臺及凈化室的紫外燈，消毒半小時以上。２.進入凈化室前先關(guān)閉紫外燈，打開超凈臺風機，等待３０min以上，以排盡臭氧。３.穿好隔離衣，戴好口罩，帽子。４.風淋２分鐘。５.０.１%水泡手，擦干。６.點燃酒精燈;超凈臺內(nèi)應避免放入過多的物品;使用的吸管，滴管，試管，培養(yǎng)瓶等均事先滅菌。７.打開各類瓶蓋前先過火，以固定灰塵;打開的瓶口、試管口過火焰，鑷子使用前應經(jīng)火焰燒灼。８.水平式風機的超凈臺，應使瓶口斜置，應盡量避免瓶口敞開直立。９.同一根吸管或滴管不應連續(xù)用于幾個不同的細胞系；吸取培養(yǎng)基的吸管應離開培養(yǎng)瓶或試管口０.５cm，避免伸入培養(yǎng)瓶口或試管口；以防止細胞系的互相混雜污染。１０.漏在培養(yǎng)瓶上或臺上的液體，立即用酒精棉球擦凈。１１.操作完畢后恢復工作臺面。
細胞形態(tài)特性：詳見細胞說明書
MDA-436細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RKOAS451細胞、BNL-CL.2細胞、HUT28細胞
RBL-1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RBVEC細胞、Hs 604.T細胞、GM00215細胞
H-2029細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCTC-929細胞、UM-UC3細胞、SK MES 1細胞
NCI-HUT-125細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Ramos.2G6.4C10細胞、Jurkat E6細胞、C33細胞
SU-DHL-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CII細胞、HMrSV5細胞、MCA38細胞
NS-20Y細胞系相關(guān)產(chǎn)品：CCRF CEM細胞、VK2細胞、U2932細胞
Soleus clone 8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Rat Glomerular Endothelial細胞、HT 1080細胞、OCI-LY-10細胞
HPAF-II Cell:人胰腺癌細胞系
COLO-741細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HPAF2細胞、Swiss/3T3細胞、MDA-435細胞
HK-2 [Human kidney]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：University of Arizona Cell Culture-812細胞、KBM-7/Hap8細胞、H-522細胞
C32r細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NB19細胞、HEI193細胞、SF763細胞
A2780S細胞系相關(guān)產(chǎn)品：OE-33細胞、3T3 clone A31細胞、WSU-DLCL2細胞
HS-683細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HTori3細胞、OK-WT細胞、HCC 38細胞
H4IIE細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-1975細胞、M109細胞、C4I細胞
H9c2(2-1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MFE296細胞、PLCPRF5細胞、HCC0044細胞
HEY A8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：ME-180細胞、H-2198細胞、CMK細胞
H-1838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVG p12細胞、H1734細胞、WM-239A細胞
H-1838細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SVG p12細胞、H1734細胞、WM-239A細胞
COR-L279細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NS1細胞、Caov-4細胞、HCC0015細胞
HemECs細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Beta-TC-6細胞、H-1184細胞、COS-7細胞
F9細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Roswell Park Memorial Institute 8402細胞、NCI-H2052細胞、A-1847細胞
HPAF-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L Wnt-3A細胞、NCI-H2107細胞、HMC3細胞
A375S2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H1341細胞、PANC 1005細胞、PNT1-a細胞
NCIH1651細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KG-1細胞、HuT 78細胞、NCIH1792細胞
UM-UC-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：16HBEo-細胞、A704細胞、AN3CA細胞
PBMC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：kms 11細胞、LLC-MK-2細胞、526-mel細胞
LN382細胞系相關(guān)產(chǎn)品：526mel細胞、PL5細胞、GC1-SPG細胞
H-128細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H125細胞、UO-31細胞、H-9細胞
Panc203細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SCH細胞、HCASMC細胞、Human podocyte細胞
MKN 28細胞系相關(guān)產(chǎn)品：AG06814-N細胞、RPMI #1846細胞、University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1細胞
MonoMac 6細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MDA-MB-231-luc細胞、LA795細胞、AMC-HN-8細胞
H-1395細胞系相關(guān)產(chǎn)品：A549-Taxol細胞、NCI-322細胞、UO-31細胞
Ramos (RA 1)細胞系相關(guān)產(chǎn)品：hESC細胞、K7M2 wt細胞、SW-1990細胞
OAC-P4C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Hut292細胞、Karpas 422細胞、AG06814-M細胞
BAEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C28/I2細胞、H295細胞、LK2細胞
NCI-H747細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C 6細胞、BIC-1細胞、MDAMB134VI細胞
Caco-2 BBe細胞系相關(guān)產(chǎn)品：RPMI 6666細胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a細胞、Colo-678細胞
LA-4 [Mouse lung adenoma]細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H2347細胞、DSL-6A-C1細胞、RIMEC細胞
NCI-H250細胞系相關(guān)產(chǎn)品：H-295細胞、H1341細胞、NCI-H226細胞
SKNBE2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C17細胞、ECV細胞、JiyoyeP-2003細胞
TE11細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Lung cancer-1/squamous細胞、OUMS-27細胞、U2OS細胞
RCC 7860細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-205細胞、WEHI231細胞、CAKI 2細胞
CHOK1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC20細胞、R 1610細胞、KHYG-1細胞
TE-7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Human Intestinal Epithelial Cell-6細胞、MGH-UI細胞、H2291細胞
Hep G2/C3A細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HeLa-229細胞、GM05887細胞、SK-MEL28細胞
SKNBE2C細胞系相關(guān)產(chǎn)品：C17細胞、ECV細胞、JiyoyeP-2003細胞
JVM-2細胞系相關(guān)產(chǎn)品：3T3-L1 ad細胞、Caco-2 BBe細胞、SaOS-2細胞
EOC-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-10細胞、KYSE-30細胞、MTC-TT細胞
EOC-20細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SU-DHL-10細胞、KYSE-30細胞、MTC-TT細胞
JB6Cl30細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MLO-Y4細胞、H661細胞、DHL4細胞
DanG細胞系相關(guān)產(chǎn)品：207細胞、TGW細胞、T2(174 x CEM.T2)細胞
HPAF-II Cell:人胰腺癌細胞系
mRTEC細胞系相關(guān)產(chǎn)品：MOLM-14細胞、MES13細胞、LL2細胞
B-3細胞系相關(guān)產(chǎn)品：COLO-738細胞、Hs578Bst細胞、H-2452細胞
LC-2-Ad細胞系相關(guān)產(chǎn)品：SKRC 39細胞、HLFa細胞、WB-F344細胞
PL-45細胞系相關(guān)產(chǎn)品：KPNRTBM1細胞、SAOS 2細胞、DHL-4細胞
NCI-BL1339細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Neuro-2a細胞、Tb 1-Lu細胞、NCTC1469細胞
CNE-2Z細胞系相關(guān)產(chǎn)品：Centre Antoine Lacassagne-27細胞、WM35細胞、Line 870 Emory University-4細胞
COLO-320DM細胞系相關(guān)產(chǎn)品：NCI-H510A細胞、L-cell細胞、PK-15細胞
FLC7細胞系相關(guān)產(chǎn)品：GM00346B細胞、OVCAR8細胞、Nb2細胞
CALU1細胞系相關(guān)產(chǎn)品：LUDLU1細胞、NCI-HUT-69細胞、H1770細胞
Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8細胞系相關(guān)產(chǎn)品：L 540細胞、RMC細胞、P3-X63-Ag8-653細胞
NCI-H220細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEC-1A細胞、WM 239細胞、MUTZ1細胞
SGC996細胞系相關(guān)產(chǎn)品：HEI-193細胞、SKMel-5細胞、SW480細胞
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