"PANC-1 Cell:人胰腺癌細胞系 細胞形態(tài):上皮細胞樣 細胞生長:貼壁 細胞背景資料:這株人胰腺癌細胞株源自于胰腺癌導管細胞,其倍增時間為52小時。染色體研究表明,該細胞染色體眾數(shù)為63,包括3個獨特標記的染色體和1個小環(huán)狀染色體。該細胞的生長可被1unit/ml的左旋天冬酰胺酶抑制;能在軟瓊脂上生長;能在裸鼠上成瘤。 FM88細胞系相關產品:BaF3細胞、NCTC-1469細胞、SKO007細胞 OCIAML3細胞系相關產品:BetaTC6細胞、GM2132細胞、HS-5細胞 BAR-T細胞系相關產品:HEK-293F細胞、H22-H8D8細胞、CWR-22rv1細胞 EU-2細胞系相關產品:TE-11細胞、Roswell Park Memorial Institute 7951細胞、NCI-H1404細胞 細胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 PANC-1 Cell:人胰腺癌細胞系 如何把細胞養(yǎng)的形態(tài)更好更漂亮。1.不同的細胞,喜歡的環(huán)境是不一樣的。這個不僅僅是說培養(yǎng)基的不同,還有就是細胞生長的空間密度問題。有一些細胞是數(shù)量多一點比較好生長,生長狀態(tài)也比較好。這種一般是屬于生長速度慢的細胞。譬如內皮細胞。而有一些是細胞是數(shù)量少一點細胞狀態(tài)會生長的比較好,譬如巨噬細胞和某些腫瘤細胞。尤其是巨噬細胞,生長速度非常得快,貼壁速度很快,所以傳代時就應該留很少量的細胞,這樣細胞狀態(tài)會比較好。并且巨噬細胞比較喜歡扎堆生長,而堆與堆之間是有空間的。如果長成相連在一起的一滿片的時候,細胞形態(tài)基本上就會差了,老化的會比較多,對后期實驗結果是不好的。所以在養(yǎng)細胞的時候應該摸索該細胞喜歡的生長空間密度問題。2.對于有些人總是會遇到養(yǎng)的細胞形態(tài)怎么都不好的問題。這個其實是有一個方法可以改善的。對于貼壁細胞,如果細胞形態(tài)不好,(或者細胞形態(tài)不清晰,表面似有異物等)可以在傳代的時候進行如下操作:首先,倒掉舊的培養(yǎng)基,加入3ml新的培養(yǎng)基(有無血清的都可)洗滌一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培養(yǎng)基,進行預吹打,控制吹打力度,輕輕地大概沿著瓶底過一遍,然后吸走。這時侯再開始正式的消化、吹打。(巨噬細胞我們只吹打,不消化的);其次,把吹打下來的細胞懸液加入到新的培養(yǎng)瓶內,培養(yǎng)瓶事先加入培養(yǎng)基,放入培養(yǎng)箱內培養(yǎng),按時間點觀察細胞貼壁情況。10分鐘觀察一次,20分鐘,30分鐘觀察一次。選擇一個時間點,已經有部分細胞貼壁的情況下,重新置于潔凈臺,底面朝上迅速倒出其中的培養(yǎng)基,加入3ml新培養(yǎng)基再輕輕洗一次。然后加入完全培養(yǎng)基培養(yǎng)。后續(xù)觀察細胞生長情況以及形態(tài)。我稱之為“二傳”。呵呵。如果一次效果還不理想,可重復多次。直到找到細胞完美形態(tài)。其中要注意,結合細胞喜歡的生長情況。喜歡多一點數(shù)量長得好的細胞你就等貼壁細胞比較多點的時候再傳。反之亦然。3.關于培養(yǎng)瓶內加入培養(yǎng)基的量的問題。這個是要靠自己去摸索你所養(yǎng)的細胞的。并不是小的玻璃方瓶12ml,大方瓶14ml的。有些細胞反而是培養(yǎng)基少一點相反細胞形態(tài)會長得比較好。(可能也是競爭很大,有優(yōu)勝劣汰吧。呵呵。)對于生長速度快的細胞,易生長的細胞加少一點培養(yǎng)基細胞形態(tài)會更好。但是要注意換液掌握。4.關于選擇培養(yǎng)瓶的問題。個人發(fā)現(xiàn)生長速度快的細胞在玻璃瓶內生長的狀態(tài)會比一次性相對好一些。而對于同一種細胞,在其生長旺盛快速的時期在玻璃瓶內的生長狀態(tài)也比內好。這可能是因為比玻璃瓶更容易貼壁。生長速度快的細胞在這種相對“更安逸”的環(huán)境里反而長得狀態(tài)不如玻璃瓶好。所以對于生長速度慢的細胞如果想要更漂亮的細胞狀態(tài),比玻璃瓶會好,對于生長速度慢的細胞,玻璃瓶則會更好。同樣,對于同一種細胞,在其生長速度慢的時候,會好一點,比如剛剛復蘇的時候,或者原代培養(yǎng)的時候。而在其生長旺盛的時候,玻璃瓶則相對會好一點。 細胞產品包裝:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細胞傳代方法:1:2-1:4傳代;每周2-3次。 為什么培養(yǎng)的細胞要及時傳代?體外培養(yǎng)的細胞大多具有生長接觸抑制的特性,也就是說當一個細胞被其他細胞包圍的時候,它就會停止生長,及時傳代后,細胞的生長得以繼續(xù)。培養(yǎng)細胞生長減慢的原因在哪些?其解決辦法有哪些?可能的原因有:更換了不同的培養(yǎng)液或血清;培養(yǎng)液中一些細胞生長必需成分如谷眈肢或生長因子等耗盡或缺乏或己被破壞;培養(yǎng)物中有少量細菌或真菌污染;試劑保存不當;比較新培養(yǎng)液與原培養(yǎng)液成分,比較新血清與舊血清等,找出其它可能的原因。解決辦法:增加起始培養(yǎng)細胞濃度;讓細胞逐漸適應新培養(yǎng)液;換入新鮮配制培養(yǎng)液;補加谷酷肢或生長因子等;用無抗生素培養(yǎng)液培養(yǎng),如發(fā)現(xiàn)污染,去棄培養(yǎng)物,或用抗生素除菌;血清需保存在5℃到20℃; 培養(yǎng)液需在2-8℃避光保存;含血清完全培養(yǎng)液在2-8℃保存,并在2周內用完;分離培養(yǎng)物,檢測支原體。冷凍管應如何解凍?取出冷凍管后,須立即放入37℃水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1-2分鐘內大部分融化,特別注意,需殘留一小塊冰塊,就可拿到超凈工作臺操作細胞,用75%酒精消毒凍存管,用新鮮培養(yǎng)基將細胞轉移至培養(yǎng)瓶。另外冷凍管由液氮桶中取出解凍時,必須注意安全,預防冷凍管爆裂。 細胞來源說明:細胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學建系 MOLM13細胞系相關產品:CAL 85-1細胞、HCC-1954BL細胞、Hep-3B細胞 SUM-149PT細胞系相關產品:AU 565細胞、LIM 1215細胞、HEYA8細胞 TM4細胞系相關產品:UC-3細胞、CWR22R-V1細胞、TE-11細胞 JROECL19細胞系相關產品:LC1/Sq細胞、U118細胞、BT483細胞 beta-TC6細胞系相關產品:BCPAP細胞、TE3細胞、Normal Rat Kidney-52E細胞 細胞生長特性:貼壁生長 PANC-1 Cell:人胰腺癌細胞系 細胞凍存復蘇材料與方法步驟:常用的細胞冷凍貯存器為液氮貯存器,規(guī)格有35L和50L兩種。使用時要注意以下幾點:(1)一般兩周需充液氮一次,至少一個月充氮一次。液氮溫度達-196℃,使用時注意勿讓液氮濺到皮膚上,以免引起凍傷。(2)液氮容器為雙層結構,中間為真空層,瓶口有雙層焊接處,應防止焊接部裂開。(3)在裝入液氮時,要注意緩慢小心,并用厚紙卷筒或特制漏斗作引導,使液氮直達瓶底,如有專用液氮灌注裝置則更好。若為初次使用,加液氮時更要緩慢,以免溫度驟降而使容器損壞。細胞凍存時常備的材料有:0.25%胰蛋白酶,含10%~20%的血清培養(yǎng)液,DMSO(分析純)或無色新鮮甘油(121°C蒸氣高壓消毒),2mL安瓿(或專用細胞凍存管)、吸管、離心管、噴燈、紗布袋(或凍存管架)等。主要操作步驟為:(1)選擇處于對數(shù)生長期的細胞,在凍存前一天換液。將多個培養(yǎng)瓶中的細胞培養(yǎng) 液去掉,用0.25%胰蛋白酶消化。適時去掉胰蛋白酶,加入少量新培養(yǎng)液。用吸管吸取培養(yǎng)液反復吹打瓶壁上的細胞,使其成為均勻分散的細胞懸液。懸浮生產細胞則不要消化處理。然后將細胞收集于離心管中離心(1000r/min,10分鐘)。(2)去上清液,加入含20%小牛血清的完全培養(yǎng)基,于4℃預冷15分鐘后,逐滴加入已無菌的DMSO或甘油,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,細胞濃度為3×106~1×107/mL之間。(3)將上述細胞分裝于安瓿或專用冷凍塑料管中,安瓿裝1~1.5mL在火焰噴燈上封口,封口處要完全封閉,圓滑無勾。冷凍管要將蓋子蓋緊,并標記好細胞名稱和凍存日期,同時作好登記(日期、細胞種類及代次、凍存支數(shù))。(4)將裝好細胞的安瓿或凍存管裝入沙布袋內;置于液氮容器頸口處存放過夜,次日轉入液氮中。采用控制降溫速度的方法也可采用下列步驟:先將安瓿置入4℃冰箱中2~3小時,再移至冰箱冷凍室內3~4小時,再吊入液氮容器頸氣態(tài)部分存放2小時,最后沉入液氮中。細胞凍存在液氮中可以長期保存,但為妥善起見,凍存半年后,取出一只安瓿細胞復蘇培養(yǎng),觀察生長情況,然后再繼續(xù)凍存。 細胞形態(tài)特性:上皮樣;多角形 NCI-H358細胞系相關產品:OCI Ly3細胞、3T3F442A細胞、WPMY1細胞 A431細胞系相關產品:HS688AT細胞、H740細胞、HCC 94細胞 WEHI 3B細胞系相關產品:Tca-8113細胞、4T1.2細胞、Nb2-11細胞 Ly3細胞系相關產品:NCI-H295R細胞、MDA-MB-330細胞、LLC-WRC 256細胞 HCT-116細胞系相關產品:TGW-I-nu細胞、HS 1.Tes細胞、HCET細胞 NCIH522細胞系相關產品:Pa16C細胞、CAL 120細胞、OVCAR433細胞 CCD-112CoN細胞系相關產品:PC-3M 2B4細胞、EHEB細胞、RPMI 8402細胞 PANC-1 Cell:人胰腺癌細胞系 NCIH747細胞系相關產品:SK Mel 1細胞、RFL-6細胞、U266BL細胞 FHCRC subclone 11細胞系相關產品:3T3細胞、OCM-1A細胞、ARO81細胞 MTC-TT細胞系相關產品:UMC11細胞、MeWo細胞、HBVSMC細胞 KYSE-510細胞系相關產品:OVCAR432細胞、KE37細胞、B78細胞 TOV-112細胞系相關產品:SW-626細胞、RWPE2細胞、RCSMC細胞 THLE2細胞系相關產品:7860細胞、SCC90細胞、SNK-6細胞 CCC-HHM-2細胞系相關產品:CL40細胞、NCIH2171細胞、CCD19-Lu細胞 T2 (174 x CEM.T2)細胞系相關產品:Bowes melanoma cells細胞、NCIH2347細胞、GP2d細胞 CL40細胞系相關產品:HEK-293H細胞、Immortal Pig Intestinal-2I細胞、B16BL-6細胞 CL40細胞系相關產品:HEK-293H細胞、Immortal Pig Intestinal-2I細胞、B16BL-6細胞 PANC0203細胞系相關產品:SK-BR3細胞、SNU423細胞、HeLa 229細胞 COLO_320DM細胞系相關產品:HANK-1細胞、SUDHL-8細胞、H22細胞 NIH:OVCAR-8細胞系相關產品:X63-Ag8.653細胞、QBI-HEK 293A細胞、IEC-6細胞 Pro-5WgaRI3C細胞系相關產品:NCI-SNU-423細胞、NCIH69細胞、Hs 934.T細胞 EL 4細胞系相關產品:L5178Y細胞、Hs 294T細胞、HuH-28細胞 NCIH2029細胞系相關產品:16-HBE細胞、CFPAC1細胞、Transformed Human Liver Epithelial-3細胞 NCIH660細胞系相關產品:UCLA-SO-14細胞、UM-RC-2細胞、KAT5細胞 Tb 1-Lu細胞系相關產品:BNL-HCC細胞、NCIH1688細胞、GM07404D細胞 NCI-UMC-11細胞系相關產品:WM-115細胞、H1623細胞、NK-92 MI細胞 CV 1細胞系相關產品:hADSCs細胞、BALL-1細胞、Z310細胞 P31/Fujioka細胞系相關產品:B958細胞、SK BR 03細胞、D562細胞 LS513細胞系相關產品:OCI Ly1細胞、A-10細胞、NCI-H102細胞 293T細胞系相關產品:CMT-64細胞、HL-60 clone15細胞、SMA560細胞 Jurkat E6-1細胞系相關產品:CLL-CII細胞、Colon-26細胞、HB 611細胞 TFH細胞系相關產品:RAW 264.7細胞、NU-GC-2細胞、OCILY-10細胞 Centre Antoine Lacassagne-51細胞系相關產品:LWnt-3A細胞、HT 1197.T細胞、SRA01/04細胞 H250細胞系相關產品:VM-CUB1細胞、RERF-LC-MS細胞、NU-GC-2細胞 hESC細胞系相關產品:BCAP37細胞、TE12細胞、174xCEM.T2細胞 MDCK-2細胞系相關產品:Ku812F細胞、HS578T細胞、Swiss/3T3細胞 TGBC11TKB細胞系相關產品:NCIH2085細胞、NCTC-3960細胞、OVCAR-433細胞 MOLM-14細胞系相關產品:C-643細胞、OCI-Ly07細胞、PANC0203細胞 NCI-H1666細胞系相關產品:Mouse Bladder Tumor line-2細胞、MDA-MB-435 S細胞、GM02131細胞 MH-22a細胞系相關產品:High-5細胞、NCI-H2286細胞、P3-NS1/1Ag 4.1細胞 KNS81細胞系相關產品:3T3-J2細胞、LS-513細胞、LUDLU 1細胞 TMK-1細胞系相關產品:MGHU3細胞、SF 295細胞、BOWES細胞 MLOY4細胞系相關產品:PC615.3細胞、GM346細胞、GM00346細胞 FAO-1細胞系相關產品:LS 174 T細胞、CORL23細胞、NCI-H2330細胞 H727細胞系相關產品:OCM-1細胞、A2780/CP70細胞、NCI-H358細胞 SCL-I細胞系相關產品:WM-266-4細胞、UCLA-SO-M20細胞、NCI-H647細胞 HEK 293-H細胞系相關產品:Hs870T細胞、KYSE510細胞、PLA801-95C細胞 SLMT-1細胞系相關產品:L5178Y TK+/- (clone 3.7.2C)細胞、SNU1細胞、BV173細胞 QG56細胞系相關產品:EVSA/T細胞、U-343MG細胞、Neuro2a細胞 U-266 AR1細胞系相關產品:DI TNC1細胞、SU86.86細胞、H1819細胞 PANC-1 Cell:人胰腺癌細胞系 HCC-1569細胞系相關產品:WSUDLCL2細胞、AN3 CA細胞、Hs606T細胞 P3HRI細胞系相關產品:SCL I細胞、CCF-STTG1細胞、MDST8細胞 BLO 11細胞系相關產品:COR-L105細胞、HEK-2細胞、MKN28細胞 CoCL3細胞系相關產品:H1355細胞、H2228細胞、T-ALL1細胞 HT29細胞系相關產品:SW 962細胞、OVCA-432細胞、HCT_116細胞 HONE1細胞系相關產品:T2 (174 x CEM.T2)細胞、TR-146細胞、Rin-M-5F細胞 SW 1463細胞系相關產品:HCC202細胞、H-345細胞、GT38細胞 SK.MEL.5細胞系相關產品:Co 115細胞、HCT.116細胞、PLA801C細胞 HASMC細胞系相關產品:HOS TE 85細胞、LIPF178C細胞、OCI Ly1細胞 EB-3細胞系相關產品:SW 1783細胞、SK-NM-C細胞、Y3-Ag 1.2.3細胞 COLO 201細胞系相關產品:Madin Darby Canine Kidney細胞、HuP-T3細胞、Bovine Turbinate細胞 GM05862細胞系相關產品:H-1404細胞、MHH-CALL2細胞、SK-BR3細胞 "
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