"PL45 Cell:人胰腺導(dǎo)管腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣 細(xì)胞生長:貼壁 細(xì)胞背景資料:詳見相關(guān)文獻介紹 CAL62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2405細(xì)胞、NCI-H-82細(xì)胞、AgC11x3A細(xì)胞 Pa17C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-345細(xì)胞、2B4-L細(xì)胞、HT 1197.T細(xì)胞 Danio rerio Gill細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKG-3a細(xì)胞、343MG細(xì)胞、FHs74Int細(xì)胞 C8166細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:T 84細(xì)胞、Pa17C細(xì)胞、L-929細(xì)胞 細(xì)胞物種來源:人源或鼠源等其它物種來源 PL45 Cell:人胰腺導(dǎo)管腺癌細(xì)胞系 細(xì)胞消化過程總結(jié):其實絕大部分細(xì)胞消化的時候是只要用胰酶潤洗一遍即可,吸去胰酶后,殘留的那些無法計算體積的附著在細(xì)胞表面的微量胰酶在37度一般不到2min足夠消化細(xì)胞(絕大部分1min不到)。對于這些細(xì)胞原則上不要用胰酶孵育細(xì)胞,連續(xù)這樣傳代,對細(xì)胞傷害很大。簡單的程序是PBS潤洗吸去,胰酶潤洗吸去,然后37度消化。2,什么算是消化好了呢?不是細(xì)胞全部成間隔分布很離散的單個圓形才算消化好了,一般你肉眼觀察貼壁細(xì)胞層,只要能移動了,多半呈沙壯移動,其實已經(jīng)可以了,很多人喜歡把細(xì)胞消化或者吹打成完全分離細(xì)胞,這是沒有必要的。一般能移動了,說明細(xì)胞與培養(yǎng)基質(zhì)材料的附著已經(jīng)消失了,細(xì)胞之間的附著也已經(jīng)消失了,細(xì)胞已經(jīng)獨立分布了(雖然沒有呈現(xiàn)很廣的離散分布)。這個時候應(yīng)該停止消化,不要等到看到鏡下所有細(xì)胞都分離得非常好,間隙很大,才停止。細(xì)胞就是完全成單個細(xì)胞懸液,之后在貼壁的過程中仍然會聚集,這個是貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,尤其是腫瘤細(xì)胞的一個特性,無論死活的細(xì)胞都是如此,你可以嘗試,準(zhǔn)備100%的單個細(xì)胞懸液,貼壁后觀察細(xì)胞,仍然是幾個幾個細(xì)胞聚集在一起。一些懸浮培養(yǎng)細(xì)胞也是如此,容易聚集,不要去嘗試過幾個小時就拿出來吹打成單細(xì)胞懸液(不要笑,這個是初養(yǎng)懸浮細(xì)胞的人常犯的錯誤,以為懸浮培養(yǎng)就是一個一個分開)。細(xì)胞只要能從基質(zhì)上脫離下來,這個時候即使是成片的(比如Calu-3細(xì)胞),吹打不超過20次后(一般10次即可),成小規(guī)模聚集(10個細(xì)胞左右),是正常的,不要試圖再去延長消化時間,或者像有的同學(xué)那樣吹打1h,等待單細(xì)胞懸液出現(xiàn)。比較難消化的細(xì)胞(潤洗方法5min還不能消化),比如HCT15, LS411和KM12,這樣的細(xì)胞一般需要用少量胰酶孵育,但也不需要很多,一般100mm dish,一次最多加入500ul,就足夠了,一般我加300ul。即使這樣難消化的細(xì)胞,一般不超過5min,即可見細(xì)胞成片移動,就應(yīng)該停止消化。一些正常細(xì)胞也會有難消化的時候,比如tsDC細(xì)胞,但也只要用少量胰酶孵育,3min左右即可看到成片沙狀移動。 細(xì)胞產(chǎn)品包裝:復(fù)蘇形式:T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存形式:1ml凍存管(兩支) 細(xì)胞傳代方法:1:2傳代 細(xì)胞接收后的操作流程與注意事項:1)如果細(xì)胞為貼壁細(xì)胞,而收到時呈懸浮或者部分懸浮的狀態(tài),請將懸浮的細(xì)胞即時離心,加15%血清的完全培養(yǎng)基到新的培養(yǎng)皿/瓶繼續(xù)培養(yǎng)3天;同時原培養(yǎng)瓶中剩下的貼壁細(xì)胞更換為15%血清的完全培養(yǎng)基培養(yǎng)3天。3天后若原瓶或者新瓶中的細(xì)胞都沒有出現(xiàn)增值而是繼續(xù)脫落死亡,請及時聯(lián)系實驗室技術(shù)人員會跟進解決;2)貼壁細(xì)胞生長緩慢;適當(dāng)提高血清濃度(最高不能超過20%),或可根據(jù)該細(xì)胞生長密度,考慮胰酶消化后,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng);3)生長不均:貼壁細(xì)胞若出現(xiàn)分布不均,成島狀生長,可將細(xì)胞進行消化,重懸打散細(xì)胞,加入新鮮培養(yǎng)基進行培養(yǎng)。 細(xì)胞來源說明:細(xì)胞主要來源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國外著名大學(xué)建系 A431/P細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2135細(xì)胞、MCF12F細(xì)胞、LMTK-細(xì)胞 SW 900細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H295R-S1細(xì)胞、H1563細(xì)胞、Tb1.Lu細(xì)胞 Wien133細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHL-CL-11細(xì)胞、BALL1細(xì)胞、LTEP-a2細(xì)胞 NCIH196細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:YES 2細(xì)胞、AZ521細(xì)胞、ZR75-1細(xì)胞 LA-N-6(OAN)細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mel RM細(xì)胞、MHCC97H細(xì)胞、NG 108-15細(xì)胞 細(xì)胞生長特性:貼壁生長 PL45 Cell:人胰腺導(dǎo)管腺癌細(xì)胞系 貼壁消化難題:1,先用PBS 把細(xì)胞洗兩遍,使瓶內(nèi)沒有血清了,減少對胰酶的中和,然后用新配的0.25%的胰酶加入3ml左右,放在37度,然后可以在細(xì)胞有些消化下來時,拿著瓶口,運用手腕的力量輕輕震蕩瓶內(nèi)液體,這樣細(xì)胞很快就下來了,還不需要吹打,分散也均勻;2,成團、絮狀:消化液里加入edta可以減少細(xì)胞成團的現(xiàn)象,血清可以終止胰酶的作用,如果是進口血清的話也能終止edta的作用。用胰酶消化后胰酶可以倒掉,也可以不倒,直接加血清終止,如果消化液中加入了edta的話,就要將消化液倒干凈,如果細(xì)胞貼壁要求不是很嚴(yán)格的話,一般不需要進行離心。鼻咽癌細(xì)胞的貼壁能力很強,用0.5%胰酶(含0.1%EDTA)一般要消化12~15min。用PBS洗滌時要洗凈殘余的培養(yǎng)基,加入胰酶后在培養(yǎng)箱中消化(避免細(xì)胞室溫下受損以及在此溫度時胰酶活性最強)至細(xì)胞收縮變圓(可顯微鏡下觀察)且有少許細(xì)胞脫落(有流下來的趨勢),隨后立即棄去胰酶(如果脫落的細(xì)胞很多且需要大量細(xì)胞實驗,則不能棄去胰酶),加入培養(yǎng)基仔細(xì)吹打(不能用無血清培養(yǎng)基或者PBS替代,否則細(xì)胞聚集成團塊或絮狀)。一般我都離心一次棄去上清(去除殘留的胰酶及漂浮的死細(xì)胞或細(xì)胞碎片);消化過度:馬上用培養(yǎng)基中和,用吸管吹打細(xì)胞,收集全部的細(xì)胞到以無菌的離心管中800RPM 3分鐘。棄上清,用全培重懸,換新的培養(yǎng)瓶繼續(xù)培養(yǎng),狀態(tài)不好的細(xì)胞在培養(yǎng)的過程中會死亡脫落,在換液的時候可以清除掉! 細(xì)胞形態(tài)特性:上皮樣 SK_N_BE2C細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MSTO-211 H細(xì)胞、NCI-H865細(xì)胞、NCIH2126細(xì)胞 Hepa 1-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H-2122細(xì)胞、UCH-1細(xì)胞、OCM1細(xì)胞 H1650_CO細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SNGM細(xì)胞、SW948細(xì)胞、H295R細(xì)胞 RGC5細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HeLa.S3細(xì)胞、L- cell細(xì)胞、SW839細(xì)胞 mRTEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MOLM-14細(xì)胞、MES13細(xì)胞、LL2細(xì)胞 NK92MI細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KYSE 450細(xì)胞、Biologics Standards-Cercopithecus-1細(xì)胞、Lu99A細(xì)胞 RSC 96細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ej138細(xì)胞、SKMEL-31細(xì)胞、IEC 18細(xì)胞 PL45 Cell:人胰腺導(dǎo)管腺癌細(xì)胞系 BC-025細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Ramos G6.C10細(xì)胞、Human Microglia Clone 3細(xì)胞、NCI-H748細(xì)胞 PaTu8988s細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs863T細(xì)胞、HCEC-B4G12細(xì)胞、HPBALL細(xì)胞 Calu-6細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:GTL-16細(xì)胞、SW-13細(xì)胞、GM06141細(xì)胞 KM12SM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:OV90細(xì)胞、16-HBEo細(xì)胞、SW 948細(xì)胞 GNM細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW579細(xì)胞、Stanford University Pediatric T-cell line 1細(xì)胞、SK.MEL.5細(xì)胞 NCI-H1693細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MARC 145細(xì)胞、RCK8細(xì)胞、Hs888Lu細(xì)胞 3T3 J2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Henrietta Lacks cells細(xì)胞、RPMI 8402細(xì)胞、G-401細(xì)胞 UMNSAH-DF 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:EOL1細(xì)胞、SK.MEL.2細(xì)胞、H2052_MM細(xì)胞 GA-10-Clone-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGH-U3細(xì)胞、NCIH2135細(xì)胞、SKLMS-1細(xì)胞 GA-10-Clone-4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MGH-U3細(xì)胞、NCIH2135細(xì)胞、SKLMS-1細(xì)胞 VK2/E6E7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ESC細(xì)胞、H660細(xì)胞、C17細(xì)胞 PANC-04-03細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MPC-83細(xì)胞、ADR-RES細(xì)胞、H-II-E-C3細(xì)胞 P388細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:KG1細(xì)胞、H-378細(xì)胞、NH-6細(xì)胞 CAL-62細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:mRMEC細(xì)胞、KYSE180細(xì)胞、HS766T細(xì)胞 TF-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Chang liver細(xì)胞、Alexander cells細(xì)胞、hTERT RPE1細(xì)胞 COLO 699細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:TE671/RD細(xì)胞、UCD-MLA-144細(xì)胞、ZR-75-30細(xì)胞 HNTEC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MES-SA細(xì)胞、NRK clone 52E細(xì)胞、MCM細(xì)胞 Human Microvascular Endothelial Cell line-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Transformed C3H Mouse Kidney-1細(xì)胞、201T細(xì)胞、Hs695T細(xì)胞 MDST8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH2286細(xì)胞、A-704細(xì)胞、MBdSMC細(xì)胞 NS1-Ag4細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H2196細(xì)胞、OCI-Ly 3細(xì)胞、SW-626細(xì)胞 TE7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1417細(xì)胞、CPA 47細(xì)胞、UM-UC-14細(xì)胞 TE7細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-H1417細(xì)胞、CPA 47細(xì)胞、UM-UC-14細(xì)胞 Roswell Park Memorial Institute 7951細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCI-ADR-RES細(xì)胞、SKN-AS細(xì)胞、A-375.S2細(xì)胞 HPMC細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:FF-WT-BJ細(xì)胞、HEL-92_1_7細(xì)胞、RFL6細(xì)胞 NCI H69細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SU.86.86細(xì)胞、CAL51細(xì)胞、SNU-387細(xì)胞 DMS79細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:RBL-1細(xì)胞、SK MES 1細(xì)胞、BGC-823細(xì)胞 C3H10T1/2 clone8細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:COS-1細(xì)胞、MCF10A細(xì)胞、NCIH322細(xì)胞 NCIH1869細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:H2.35細(xì)胞、NCI-H345細(xì)胞、NCI-H-295細(xì)胞 Neukoplast細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HKF細(xì)胞、Laboratory of Allergic Diseases 2細(xì)胞、TOV21G細(xì)胞 H711細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:IMCD-3細(xì)胞、SW 982細(xì)胞、MGHU3細(xì)胞 BV-173細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Hs 940.T細(xì)胞、Mv1.Lu細(xì)胞、H676細(xì)胞 Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:U-87 MG細(xì)胞、LAN-1細(xì)胞、MeT 5A細(xì)胞 NCI-H1915細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIADRRES細(xì)胞、NCI-H2195細(xì)胞、SK-N-BE-2c細(xì)胞 RCC-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKCO-1細(xì)胞、OCI-Ly 18細(xì)胞、NCIH1355細(xì)胞 DU 4475細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:WRL68細(xì)胞、32D.cl3細(xì)胞、K562/ADR細(xì)胞 SU-DHL-10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BC-020細(xì)胞、Rat-2細(xì)胞、NCIH2170細(xì)胞 Jiyoye細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:ABC-1細(xì)胞、LNCaP C4-2細(xì)胞、3AO細(xì)胞 JIMT1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SKMel-28細(xì)胞、CL40細(xì)胞、Calu-6細(xì)胞 H-378細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:SW839細(xì)胞、NCI-H87細(xì)胞、Alpha Mouse Liver 12細(xì)胞 NUGC3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:VMRC-RCZ細(xì)胞、SU-DHL6細(xì)胞、16-HBEo細(xì)胞 SW-1573細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDBK (NBL-1)細(xì)胞、IM 9細(xì)胞、NR 8383細(xì)胞 Human Corneal Epithelial cells-Transformed細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:NCIH1755細(xì)胞、NCI H69細(xì)胞、WEHI-3B細(xì)胞 RBL.2H3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:BT20細(xì)胞、HCC 70細(xì)胞、GM346細(xì)胞 PL45 Cell:人胰腺導(dǎo)管腺癌細(xì)胞系 Vx-2細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HuPT3細(xì)胞、GL-261細(xì)胞、Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50細(xì)胞 H889細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDAMB415細(xì)胞、MDA.MB.435細(xì)胞、Ramos 2G6 4C10細(xì)胞 Hs 863.T細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:CHO-Lec1細(xì)胞、A431細(xì)胞、WEHI-231細(xì)胞 CAMA-1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Human Microglia Clone 3細(xì)胞、PC3M-IE8細(xì)胞、WERI細(xì)胞 Lewis lung carcinoma line 1細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA157細(xì)胞、IPEC-1細(xì)胞、SNU119細(xì)胞 NCI-H1666細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Mouse Bladder Tumor line-2細(xì)胞、MDA-MB-435 S細(xì)胞、GM02131細(xì)胞 LIM1215細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HCC44細(xì)胞、HL60細(xì)胞、MDAMB468細(xì)胞 D10細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HDLM2細(xì)胞、ACC-2細(xì)胞、AAV293細(xì)胞 A-72細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:MDA-157細(xì)胞、aTC1 Clone 6細(xì)胞、NU-GC-4細(xì)胞 OCILY3細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Madison細(xì)胞、mouse Inner Medullary Collecting Duct-3細(xì)胞、HEK AD293細(xì)胞 H1238細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:Dysplastic Oral Keratinocyte細(xì)胞、PC-3M-IE8細(xì)胞、A549-Taxol細(xì)胞 WC00044細(xì)胞系相關(guān)產(chǎn)品:HEK 293 EBNA細(xì)胞、LA-N-6細(xì)胞、COLO-HSR細(xì)胞 "
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